連翹中具有抗菌活性的苯乙醇苷類化學(xué)成分研究△

姜醒，魯麗敏，張春蕾，王興焱，孫琦，王佳天，苑光軍

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 佳木斯學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

·基礎(chǔ)研究·

連翹中具有抗菌活性的苯乙醇苷類化學(xué)成分研究△

姜醒，魯麗敏，張春蕾，王興焱，孫琦，王佳天，苑光軍*

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 佳木斯學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

目的：研究連翹中具有抗菌活性的苯乙醇苷類化合物，探討連翹抗菌藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。方法：采用有機(jī)溶劑提取藥材，不同極性有機(jī)溶劑萃取提取液，抗菌活性跟蹤結(jié)合各種色譜法，獲得活性化合物。與文獻(xiàn)報道譜學(xué)數(shù)據(jù)對比確定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從該藥材中分離獲得9個化合物，分別鑒定為6′-O-(順式-1，4-二羥基環(huán)己乙酰基)-類葉升麻苷(1)，4-O-鼠李糖基-7S，8R-7′，8′-赤式-蒜芥茄脂素(2)，毛花球花苷A (3)，黃花馬纓丹苷B (4)，石蠶苷B (5)，紫莖女貞苷J(rèn) (6)，厚樸苷F (7)，松果菊苷(8)，異厚葉車前苷 (9)。化合物1、6、8對金黃色葡萄球菌(ATCC 33591)生長具有中等強(qiáng)度抑制作用，MIC值分別為8.0、16.0、4.0 μg·mL-1。結(jié)論：8個苯乙醇苷類化合物(1，3～9)和1個木脂素類化合物(2)系首次從該植物中獲得。

連翹；苯乙醇苷類化合物；抗菌活性

連翹為木犀科 (Oleaceae) 植物連翹Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl 的干燥成熟果實(shí)，又名落翹，《中華人民共和國藥典》2015版收載[1]。連翹在全國范圍內(nèi)均有種植，野生多生于河邊，商品藥材以野生為主，有“老翹”、“青翹”之分。連翹主要分布于秦嶺、太行山一帶，主產(chǎn)于陜、晉、川等地。其味苦，性微寒，歸肺、心、小腸經(jīng)，具有清熱解毒、消腫散結(jié)、疏散風(fēng)熱等功效，可以與金銀花、牡丹皮、梔子、大黃等多種中藥配伍，如復(fù)方銀翹散、涼隔散等，多數(shù)用于瘡、癰、瘰疬、熱毒的治療，為“瘡家之圣藥”。連翹中主要的成分為苯乙烯及其苷類、黃酮類、香豆素類、酚酸類等多種成分，具有很強(qiáng)的抗菌、抗炎、抗病毒等作用[2]。以往研究表明苯乙醇苷類是連翹主要的抗菌活性成分[3-4]，已經(jīng)作為先導(dǎo)化合物應(yīng)用于尋找新藥[5]。本文繼續(xù)尋找連翹中具有抗菌活性的苯乙醇苷類化合物，結(jié)果從該植物中首次分離得到9個苯乙醇苷類化合物并進(jìn)行了抗菌活性研究。

1 儀器與材料

BRUKER AV500型核磁共振儀(德國布魯克公司)，溶劑峰為內(nèi)標(biāo)；島津 LC-6AD (日本島津公司)；島津Shim-pack PREP-ODS制備色譜柱(250 mm×25 mm，日本島津公司)；所用試劑為色譜純或分析純。

金黃色葡萄球菌ATCC 33591、ATCC 33591，大腸埃希菌(ATCC 25922)，糞腸球菌(ATCC 29212)，購于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物技術(shù)研究所。

樣品于2013年6月購于河北省安國中藥材集散中心，經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)趙喜副教授鑒定為木犀科植物連翹Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl的干燥成熟果實(shí)。

2 提取、分離

甲醇作為提取溶劑進(jìn)行回流提取藥材(8 kg)，提取物減壓回收后分散于水中，先后采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，分別得到石油醚部分(300 g)、乙酸乙酯部分(500 g)、正丁醇部分(350 g)。其中，乙酸乙酯部分在質(zhì)量濃度為100 μg·mL-1時顯示出抗菌活性；因此，選擇硅膠柱色譜法對乙酸乙酯部分進(jìn)行下一步分離，洗脫劑采用三氯甲烷-甲醇溶劑系統(tǒng)(100∶1～1∶1)，極性由低到高進(jìn)行梯度洗脫。在薄層色譜法的跟蹤檢測下，共收集到了10個流分(Fr.1～Fr.10)。Fr.3部分(17.2 g)，先后采用硅膠柱色譜法和高效液相色譜法(反相柱：流動相為乙腈-水溶劑系統(tǒng))進(jìn)行分離純化，分別得到化合物1(10 mg)和2(5 mg)。Fr.6 部分(15 g)先后采用硅膠和高效液相柱色譜法進(jìn)行分離純化，分別得到化合物3(12 mg)、4(8 mg)、5(3 mg)。Fr.7 部分(20 g) 先后采用硅膠和高效液相柱色譜法進(jìn)行分離純化，分別得到化合物6(353 mg)，7(206 mg)和8(62 mg).Fr.9部分 (10 g) 采用中壓制備色譜和高效液相色譜法進(jìn)行分離純化，得到化合物9(8 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末。ESI-MS：m/z779[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：acetylcyclohexyl：1.80 (2H，m，H-2，6)，1.54 (2H，m，H-2，6)，1.68 (4H，m，H-3，5)，3.53 (1H，m，H-4)，2.49 (2H，s，H-7)；glycosyl：4.43 (1H，d，J=8.3 Hz，H-1′)，3.44 (1H，m，H-2′)，3.86(1H，t，J=9.0 Hz，H-3′)，5.03 (1H，t，J=9.5 Hz，H-4′)，3.77 (1H，m，H-5′)，4.24 (1H，dd，J=11.7，2.7 Hz，H-6′a)，4.15 (1H，dd，J=11.7，5.1 Hz，H-6′b)；aglycone：6.71 (1H，d，J=2.4 Hz，H-2″)，6.70 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5″)，6.60 (1H，dd，J=8.3，2.0 Hz，H-6″)，3.99 (1H，m，H-αa)，3.74 (1H，m，H-αb)，2.83 (2H，m，H-β)；caffeoyl：7.09 (1H，d，J=1.9 Hz，H-2?)，6.81 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5?)，6.99 (1H，dd，J=8.3，1.9 Hz，H-6?)，6.31 (1H，d，J=16.1 Hz，H-α)，7.63 (1H，d，J=15.6 Hz，H-β)；rhamnosyl：5.21 (1H，d，J=1.5 Hz，H-1″″)，3.94 (1H，m，H-2″″)，3.59 (1H，m，H-3″″)，3.32 (1H，m，H-4″″)，3.61 (1H，d，J=2.9 Hz，H-5″″)，1.13 (3H，d，J=6.4 Hz，H-6″″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：acetylcyclohexyl：70.6 (C-1)，36.1 (C-2，6)，31.6 (C-3，5)，70.7 (C-4)，48.5 (C-7)，172.7 (C-8)；glycosyl：104.4 (C-1′)，76.3 (C-2′)，81.5 (C-3′)，73.2 (C-4′)，73.9 (C-5′)，63.9 (C-6′)；aglycone：131.8 (C-1″)，117.4 (C-2″)，146.4 (C-3″)，145.1 (C-4″)，116.6 (C-5″)，121.5 (C-6″)，37.0 (C-7″)，72.8(C-8″)；caffeoyl：127.9 (C-1?)，115.6 (C-2?)，147.2 (C-3?)，150.3 (C-4?)，116.8 (C-5?)，123.5 (C-6?)，148.4 (C-7?)，114.9 (C-8?)，168.3 (CO)，103.4 (C-1″″)，72.6(C-2″″)，70.8 (C-3″″)，74.1 (C-4″″)，72.3 (C-5″″)，18.8 (C-6″″)。以上核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[6]，所以化合物1鑒定為6′-O-(cis-1，4-dihydroxycyclohexanacetyl)-acteoside，為首次從該植物中分離得到。

化合物2：白色粉末。ESI-MS：m/z537[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：7.05 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，7.09 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5)，6.93 (1H，dd，J=8.3，2.0，H-6)，5.62 (1H，d，J=5.9 Hz，H-7)，3.49 (1H，m，H-8)，3.87 (1H，m，H-9a)，3.79 (1H，m，H-9b)，3.81 (3H，s，3-OMe)，6.97 (1H，br s，H-2′)，6.91 (1H，br s，H-6′)，4.59 (1H，d，J=5.9 Hz，H-7′)，3.69 (1H，m，H-8′)，3.55 (1H，dd，J=11.5，4.2 Hz，H-9′a)，3.40 (1H，dd，J=11.2，6.4 Hz，H-9′b)，3.91 (3H，S，3′-OMe)，5.36 (1H，d，J=1.5 Hz，H-1″)，4.08 (1H，dd，J=3.2，1.7 Hz，H-2″)，3.87 (1H，m，H-3″)，3.49 (1H，m，H-4″)，3.78 (1H，m，H-5″)，1.24 (3H，d，J=6.4 Hz，H-6″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：138.9 (C-1)，111.6 (C-2)，152.4 (C-3)，146.7 (C-4)，119.9 (C-5)，119.3 (C-6)，89.1 (C-7)，55.8 (C-8)，65.3 (C-7)，56.8 (3-OMe)，137.4 (C-1′)，112.9 (C-2′)，145.6 (C-3′)，149.3 (C-4′)，129.8 (C-5′)，116.9 (C-6′)，75.8 (C-7′)，77.7 (C-8′)，64.5 (C-9′)，57.1 (3′-OMe)，101.7 (C-1″)，72.3 (C-2″)，72.5 (C-3″)，74.1 (C-4″)，71.1 (C-5″)，18.3 (C-6″)。以上核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[6]，所以化合物2鑒定為4-O-rhamnosyl-7S，8R-7′，8′-erythro-sisymbrifolin，為首次從該植物中分離得到。

化合物3：白色粉末。ESI-MS：m/z257[M+1]+；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：aglycon：6.72 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，6.71 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.59 (1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6)，4.07 (1H，m，H-αa)，3.74 (1H，m，H-αb)，2.82 (1H，m，H-β)；glucosyl：4.41 (1H，d，J=7.9 Hz，H-1′)，3.43 (1H，dd，J=7.9，9.1 Hz，H-2′)，3.87 (1H，t，J=9.1 Hz，H-3′)，4.95 (1H，t，J=9.5 Hz，H-4′)，3.55 (1H，m，H-5′)，3.70 (1H，H-6′a)，3.63 (1H，H-6′b)；rhamnosyl：5.27 (1H，d，J=1.7 Hz，H-1″)，3.96 (1H，dd，J=1.7，3.2 Hz，H-2″)，3.79 (1H，dd，J=3.2，9.5 Hz，H-3″)，3.48 (1H，t，J=9.5 Hz，H-4″)，3.66 (1H，H-5″)，1.18 (3H，d，J=6.2 Hz，H-6″)；xylopentaose：4.41 (1H，d，J=7.7 Hz，H-1?)，3.04 (1H，dd，J=7.7， 9.0 Hz，H-2?)，3.26 (1H，t，J=9.0 Hz，H-3?)，3.39 (1H，m，H-4?)，3.75(1H，H-5?a)，3.10 (1H，dd，J=11.2，10.4 Hz，H-5?b)；caffeoyl：7.09 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2″″)，6.82 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5″″)，6.98 (1H，dd，J=8.3，2.0 Hz，H-6″″)，6.28 (1H，d，J=15.9 Hz，H-α′)，7.60 (1H，d，J=15.9 Hz，H-β′)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：aglycon：131.42 (C-1)，117.09 (C-2)，146.10 (C-3)，144.64 (C-4)，116.29 (C-5)，121.25 (C-5)，72.20 (C-α)，36.54 (C-β)；glucosyl：104.15 (C-1′)，76.31 (C-2′)，80.64 (C-3′)，70.43 (C-4′)，75.92 (C-5′)，62.28 (C-6′)；rhamnosyl：102.35 (C-1″)，72.10 (C-2″)，72.27 (C-3″)，83.64 (C-4″)，68.70 (C-5″)，18.41 (C-6″)；xylopentaose：106.52 (C-1?)，75.71 (C-2?)，78.03 (C-3?)，70.96 (C-4?)，67.05 (C-5?)；caffeoyl：127.65 (C-1″″)，115.36 (C-2″″)，146.75 (C-3″″)，149.76 (C-4″″)，116.52 (C-5″″)，123.37 (C-6″″)，114.55 (C-α′)，148.20 (C-β′)，168.14 (C=O)。以上核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[7]，所以化合物3鑒定為trichosanthoside A，為首次從該植物中分離得到。

化合物4：白色粉末。ESI-MS：m/z741[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：aglycone：6.74 (1H，d，J=1.7 Hz，H-2)，6.72 (1H，d，J=7.9 Hz，H-5)，6.62 (1H，dd，J=7.9，1.7 Hz，H-6)，4.09 (1H，m，H-αa)，3.75 (1H，m，H-αb)，2.83 (2H，m，H-β)；glucosyl：4.55 (1H，d，J=7.6 Hz，H-1′)，3.68 (1H，dd，J=7.6，9.4 Hz，H-2′)，3.93 (1H，t，J=9.4 Hz，H-3′)，4.94 (1H，t，J=9.4 Hz，H-4′)，3.60 (1H，m，H-5′)，3.61 (1H，dd，J=12.0，5.0 Hz，H-6′a)，3.75 (1H，dd，J=12.0，3.8 Hz，H-6′b)；xylopentaose：4.64 (1H，d，J=7.4 Hz，H-1″)，3.26 (1H，dd，J=7.4，8.9 Hz，H-2″)，3.37 (1H，dd，J=8.9，8.9 Hz，H-3″)，3.58 (1H，m，H-4″)，3.20 (1H，dd，J=11.0，2.5 Hz，H-5″a)，3.91 (1H，dd，J=11.0，5.0 Hz，H-5″b)；apiosyl：5.34 (1H，d，J=3.2 Hz，H-1?)，3.99 (1H，d，J=3.2 Hz，H-2?)，3.77 (1H，d，J=9.8 Hz，H-4?a)，4.14 (1H，d，J=9.8 Hz，H-4?b)，3.53 (2H，br s，H-5?)；caffeoyl：7.08 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2″″)，6.82 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5″″)，6.98 (1H，dd，J=8.2，2.0 Hz，H-6″″)，6.31 (1H，d，J=15.9 Hz，H-α″″)，7.63 (1H，d，J=15.9 Hz，H-β″″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：aglycone：132.9 (C-1)，117.5 (C-2)，147.5 (C-3)，145.8 (C-4)，117.2 (C-5)，122.1 (C-6)，72.3 (C-α)，36.2 (C-β)；glucosyl：103.5 (C-1′)，82.7 (C-2′)，83.6 (C-3′)，71.3 (C-4′)，76.0 (C-5′)，62.8 (C-6′)；xylopentaose：105.9 (C-1″)，76.2 (C-2″)，77.9 (C-3″)，71.5 (C-4″)，67.5 (C-5″)；apiosyl：112.3 (C-1?)，78.8 (C-2?)，81.8 (C-3?)，75.2 (C-4?)，65.6 (C-5?)；caffeoyl：124.1 (C-1″″)，115.6 (C-2″″)，149.9 (C-3″″)，147.6 (C-4″″)，117.1(C-5″″)，123.2 (C-6″″)，116.1 (C-α″″)，148.5 (C-β″″)，169.2 (C=O)。以上核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[8]，所以化合物4鑒定為fucatoside B，為首次從該植物中分離得到。

化合物5：白色粉末。 ESI-MS：m/z925[M+Na]+；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：caffeoyl：7.06 (1H，s，H-2)，6.79 (1H，d，J=8.1 Hz，H-5)，6.96 (1H，dd，J=8.1，1.2 Hz，H-6)，7.65 (1H，d，J=15.7 Hz，H-7)，6.29 (1H，d，J=15.7 Hz，H-8)；phenylethylalcohol：6.72 (1H，s，H-2)，6.68 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.58 (1H，dd，J=1.2，8.0 Hz，H-6)，3.99 (1H，m，H-αa)，3.75 (1H，m，H-αb)，2.81 (2H，m，H-β)：glycosyl：4.39 (1H，d，J=7.9 Hz，H-1′)，3.39 (1H，H-2′)，3.77 (1H，H-3′)，5.01 (1H，t，J=9.9 Hz，H-4′)，3.70 (1H，m，H-5′)，3.49 (1H，dd，J=11.4，5.6 Hz，H-6′a)，3.77 (1H，H-6′b)；rhamnosyl I：4.63 (1H，d，J=1.4 Hz，H-1″)，3.85 (1H，H-2″)，3.69 (1H，H-3″)，3.37 (1H，H-4″)，3.61 (1H，H-5″)，1.22 (3H，d，J=6.1 Hz，H-6″)；rhamnosyl II：5.49 (1H，d，J=1.4 Hz，H-1?)，3.96 (1H，dd，J=1.4，3.2 Hz，H-2?)，3.66 (1H，H-3?)，3.29 (1H，t，J=8.6 Hz，H-4?)，3.55 (1H，H-5?)，1.08 (3H，d，J=6.1 Hz，H-6?)；arabinosyl：4.31 (1H，d，J=7.3 Hz，H-1″″)，3.60 (1H，H-2″″)，3.51 (1H，H-3″″)，3.79 (1H，H-4″″)，3.55 (1H，H-5″″a)，3.87 (1H，H-5″″b)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：caffeoyl：127.7 (C-1)，115.1 (C-2)，147.2 (C-3)，150.1 (C-4)，116.4 (C-5)，123.1 (C-6)，147.9 (C-7)，114.5 (C-8)，167.7 (C-9)；phenylethylalcohol：131.3 (C-1)，117.0 (C-2)，147.1 (C-3)，144.9 (C-4)，116.3 (C-5)，121.1 (C-6)，72.8 (C-α)，36.5 (C-β)；glycosyl：104.2 (C-1′)，75.9 (C-2′)，82.2 (C-3′)，70.1 (C-4′)，74.5 (C-5′)，67.4 (C-6′)；rhamnosyl I：102.0 (C-1″)，71.8 (C-2″)，71.9 (C-3″)，73.9 (C-4″)，69.9 (C-5″)，17.9 (C-6″)；rhamnosyl II：101.8 (C-1?)，82.8 (C-2?)，72.1 (C-3?)，73.9 (C-4?)，70.3 (C-5?)，18.5 (C-6?)，arabinosyl 107.3 (C-1″″)，72.6 (C-2″″)，74.2 (C-3″″)，69.8 (C-4″″)，67.3 (C-5″″)。以上核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[9]，所以化合物5鑒定為poliumoside B，為首次從該植物中分離得到。

化合物6：白色粉末。ESI-MS：m/z793[M+Na]+；1H-NMR (MeOD，500 MHz)δ：6.68 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，6.63 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.55 (1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6)，2.79 (2H，t，J=7.4 Hz，H-7)，3.96 (1H，m，H-8a)，3.74 (1H，m，H-8b)，4.34 (1H，d，J=8.0 Hz，H-1′)，3.32 (1H，m，H-2′)，3.51 (1H，m，H-3′)，3.42 (1H，m，J=9.9 Hz，H-4′)，3.55 (1H，m，H-5′)，4.50 (1H，dd，J=11.9，1.7 Hz，H-6′a)，4.34 (1H，J=11.9，6.2 Hz，H-6′b)，5.19 (1H，s，H-1″)，3.98 (1H，m，H-2″)，3.87 (1H，m，H-3″)，3.53 (1H，m，H-4″)，4.12 (1H，dd，J=9.5，6.2 Hz，H-5″)，1.25 (3H，d，J=6.2 Hz，H-6″)，5.19 (1H，s，H-1?)，3.88 (1H，m，H-2?)，3.59 (1H，m，H-3?)，3.41 (1H，m，H-4?)，3.72 (1H，m，H-5?)，1.29 (3H，d，J=6.2 Hz，H-6?)，7.04 (1H，d，J=1.9 Hz，H-2″″)，6.79 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5″″)，6.89 (1H，dd，J=8.3，1.9 Hz，H-6″″)，7.57 (1H，d，J=15.9 Hz，H-7″″)，6.29 (1H，d，J=15.9 Hz，H-8″″)；13C-NMR (MeOD，125 MHz)δ：131.4 (C-1)，117.3 (C-2)，144.7 (C-3)，146.4 (C-4)，116.7 (C-5)，121.3 (C-6)，36.8 (C-7)，72.6 (C-8)，104.7 (C-1′)，75.9 (C-2′)，83.6 (C-3′)，70.6 (C-4′)，75.5 (C-5′)，64.9 (C-6′)，103.3 (C-1″)，72.6 (C-2″)，73.1 (C-3″)，81.3 (C-4″)，68.5 (C-5″)，18.8 (C-6″)，102.5 (C-1?)，73.2 (C-2?)，72.5 (C-3?)，73.9 (C-4?)，70.6 (C-5?)，17.9 (C-6?)，127.9 (C-1″″)，115.4 (C-2″″)，146.9 (C-3″″)，149.8 (C-4″″)，116.4 (C-5″″)，123.5 (C-6″″)，147.4 (C-7″″)，115.0 (C-8″″)，169.3 (C-9″″)。以上核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[10]，所以化合物6鑒定為ligupurpuroside J，為首次從該植物中分離得到。

化合物7：白色粉末。ESI-MS：m/z785[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：7.31 (1H，d，J=1.8 Hz，H-2)，7.21 (1H，overlap，H-5)，6.82 (1H，dd，J=7.8，1.2 Hz，H-6)，3.06 (2H，t，J=7.2 Hz，H-β)，4.39 (1H，m，H-αa)，3.82 (1H，dt，J=9.6，7.8 Hz，H-αb)，5.46 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，4.20 (1H，dd，J=7.8，2.4 Hz，H-2′)，5.19 (1H，t，J=2.4 Hz，H-3′)，5.51 (1H，dd，J=9.6，2.4 Hz，H-4′)，4.86 (1H，ddd，J=9.6，5.4，1.8 Hz，H-5′)，4.59 (1H，overlap，H-6′a)，4.12 (1H，dd，J=11.4，5.4 Hz，H-6′b)；glucosyl： 4.98 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)，4.06 (1H，dd，J=8.4，7.8 Hz，H-2″)，4.25 (1H，dd，J=9.6，8.4 Hz，H-3″)，4.27 (1H，dd，J=9.6，9.0 Hz，H-4″)，3.94 (1H，m，H-5″)，4.53 (1H，dd，J=11.4，1.8 Hz，H-6″a)，4.38 (1H，overlap，H-6″b)；rhamnosyl：5.68 (1H，br s，H-1?)，4.57 (1H，overlap，H-2?)，4.69 (1H，dd，J=9.6，3.0 Hz，H-3?)，4.33 (1H，t，J=9.6 Hz，H-4?)，4.78 (1H，m，H-5?)，1.70 (3H，d，J=6.0 Hz，H-6?)，7.54 (1H，d，J=1.2 Hz，H-2″″)，7.21 (1H，overlap，H-5″″)，7.11 (1H，dd，J=8.4，1.2 Hz，H-6″″)，7.97 (1H，d，J=15.6 Hz，H-7″″)，6.58 (1H，d，J=15.6 Hz，H-8″″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：130.9 (C-1)，117.8 (C-2)，147.8 (C-3)，145.9 (C-4)，116.8 (C-5)，120.8 (C-6)，36.6 (C-β)，71.8 (C-α)；glucosyl：100.5 (C-1′)，74.1 (C-2′)，65.6 (C-3′)，70.9 (C-4′)，72.1 (C-5′)，69.6 (C-6′)，105.8 (C-1″)，75.4 (C-2″)，78.4 (C-3″)，71.7 (C-4″)，78.6 (C-5″)，62.9 (C-6″)；rhamnosyl：97.8 (C-1?)，72.6 (C-2?)，72.8 (C-3?)，74.3 (C-4?)，69.9 (C-5?)，18.8 (C-6?)，126.9 (C-1″″)，116.1 (C-2″″)，147.0 (C-3″″)，150.8 (C-4″″)，116.8 (C-5″″)，122.3 (C-6″″)，146.7 (C-7″″)，114.8 (C-8″″)，166.9 (C-9″″)。以上核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[11]，所以化合物7被鑒定為magnoloside F，為首次從該植物中分離得到。

化合物8：白色粉末。ESI-MS：m/z785[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：aglycone：6.73 (1H，d，J=2.1 Hz，H-2)，6.69 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.58 (1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6)，2.81 (2H，t，J=7.4 Hz，H-7)，4.04(1H，m，H-8a)，3.75 (1H，m，H-8b)；glucosyl (glc)：4.40 (1H，d，J=7.9 Hz，H-1′)，3.41 (1H，dd，J=7.9，9.2 Hz，H-2′)，3.83 (1H，t，J=9.2 Hz，H-3′)，5.01 (1H，dd，J=9.9，9.3 Hz，H-4′)，3.78 (1H，m，H-5′)，3.92 (1H，dd，J=11.5，2.5 Hz，H-6′a)，3.66 (1H，m，H-6′b)；rhamnosyl：5.19 (1H，d，J=1.8 Hz，H-1″)，3.93 (1H，dd，J=3.3，1.8 Hz，H-2″)，3.57 (1H，dd，J=9.6，3.3 Hz，H-3″)，3.30 (1H，m，H-4″)，3.57 (1H，m，H-5″)，1.09 (3H，d，J=6.2 Hz，H-6″)；caffeoyl：6.28 (1H，d，J=15.9 Hz，H-α?)，7.61 (1H，d，J=15.9 Hz，H-β?)，7.07 (1H，d，J=2.1 Hz，H-2?)，6.79 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5?)，6.98 (1H，dd，J=8.3，2.1 Hz，H-6?)；6′-O-glc：4.34 (1H，d，J=7.7 Hz，H-1″″)，3.26 (1H，dd，J=9.0，7.8 Hz，H-2″″)，3.48 (1H，m，H-3″″)，3.55 (1H，m，H-4″″)，3.34 (1H，m，H-5″″)，3.84 (2H，m，H-6″″)；4Glc-O-6′-O-glc：4.37 (1H，d，J=7.9 Hz，H-1″″′)，3.23 (1H，dd，J=8.9，7.9 Hz，H-2″″′)，3.38 (1H，m，H-3″″′)，3.35 (1H，m，H-4″″′)，3.34 (1H，m，H-5″″′)，3.86 (1H，m，H-6″″′a)，3.68 (1H，m，H-6″″′b)；13C-NMR(CD3OD，125 MHz)δ：aglycone：131.8 (C-1)，117.5 (C-2)，146.4 (C-3)，144.9 (C-4)，116.7 (C-5)，121.6 (C-6)，36.9 (C-7)，72.7 (C-8)；glucosyl：104.5 (C-1′)，76.4 (C-2′)，81.9 (C-3′)，71.1 (C-4′)，75.0 (C-5′)，69.8 (C-6′)；rhamnosyl：103.3 (C-1″)，72.6 (C-2″)，72.3 (C-3″)，74.1 (C-4″)，70.7 (C-5″)，18.6 (C-6″)；caffeoyl：114.9 (C-α?)，148.5 (C-β?)，168.8 (C=O)，127.9 (C-1?)，115.7 (C-2?)，147.1 (C-3?)，150.2 (C-4?)，116.9 (C-5?)，123.5 (C-6?)；6′-O-Glc：104.6 (C-1″″)，75.2 (C-2″″)，76.4 (C-3″″)，80.7 (C-4″″)，76.8 (C-5″″)，62.1 (C-6″″)；4Glc-O-6′-O-Glc：104.8 (C-1″″′)，75.1 (C-2″″′)，78.1 (C-3″″′)，71.5 (C-4″″′)，78.4 (C-5″″′)，62.6 (C-6″″′)。以上核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[12]，所以化合物8被鑒定為echinacoside，為首次從該植物中分離得到。

化合物9：白色粉末。ESI-MS：m/z769[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：aglycone：6.69 (1H，d，J=1.9，H-2)，6.64 (1H，d，J=8.1 Hz，H-5)，6.55 (1H，dd，J=8.1，1.9 Hz，H-6)，2.81 (2H，m，H-7)，3.96 (1H，m，H-8a)，3.73 (1H，m，H-8b)；caffeoyl：7.04 (1H，d，J=1.9 Hz，H-2′)，6.79 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5′)，6.88 (1H，dd，J=8.2，1.9 Hz，H-6′)，7.58 (1H，d，J=15.9 Hz，H-7′)，6.29 (1H，d，J=15.9 Hz，H-8′)；glucosyl：4.46 (1H，d，J=7.7 Hz，H-1″)，3.47 (1H，dd，J=8.9，7.7 Hz，H-2″)，3.62 (1H，dd，J=8.9，8.9 Hz，H-3″)，3.46 (1H，H-4″)，3.54 (1H，H-5″)，4.52 (1H，dd，J=11.7，1.7 Hz，H-6″a)，4.36 (1H，dd，J=11.7，5.9 Hz，H-6″b)；rhamnosyl-I：4.95 (1H，brs，H-1?)，3.91 (1H，H-2?)，3.73 (1H，H-3?)，3.43 (1H，H-4?)，3.99 (1H，H-5?)，1.21 (3H，d，J=6.0 Hz，H-6?)；rhamnosyl-II：4.99 (1H，brs，H-1″″)，3.91 (1H，H-2″″)，3.74 (1H，H-3″″)，3.44 (1H，H-4″″)，3.99 (1H，H-5″″)，1.24 (3H，d，J=6.0 Hz，H-6″″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：aglycone：131.3 (C-1)，117.3 (C-2)，146.2 (C-3)，144.9 (C-4)，116.8 (C-5)，121.5 (C-6)，36.8 (C-7)，72.6 (C-8)；caffeoyl：127.8 (C-1′)，115.4 (C-2′)，146.9 (C-3′)，149.7 (C-4′)，116.8 (C-5′)，123.4 (C-6′)，147.5 (C-7′)，115.1 (C-8′)，169.3 (C-9′)；glucosyl：102.9 (C-1″)，80.3 (C-2″)，87.4 (C-3″)，70.8 (C-4″)，75.4 (C-5″)，64.7 (C-6″)；rhamnosyl-I：103.9 (C-1?)，72.6 (C-2?)，72.5 (C-3?)，74.1 (C-4?)，70.9 (C-5?)，18.0 (C-6?)；rhamnosyl-II：103.1 (C-1″″)，72.6 (C-2″″)，72.4 (C-3″″)，73.7 (C-4″″)，70.3 (C-5″″)，18.2 (C-6″″)。以上核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[13]，所以化合物9被鑒定為isocrassifolioside，為首次從該植物分離得到。

4 活性測定

采用二倍稀釋法(將待測樣品分別設(shè)定為64、32、16.0、4.0、2.0 μg·mL-1)對分離到的化合物分別進(jìn)行金黃色葡萄球菌ATCC 33591、ATCC 33591，大腸埃希菌(ATCC 25922)，糞腸球菌(ATCC 29212)抑菌活性測試。結(jié)果表明化合物1、6、8對金黃色葡萄球菌(ATCC 33591)生長具有中等強(qiáng)度抑制作用，MIC值分別為8.0、16.0、4.0 μg·mL-1。

5 討論

本文報道從連翹干燥果實(shí)中分離鑒定了9個化合物，均為首次從該植物中分離得到，并發(fā)現(xiàn)其中的3個化合物具有抑制金黃色葡萄球菌(ATCC 33591)生長的作用。連翹具有清熱解毒的功效，已經(jīng)制成包括雙黃連在內(nèi)的多種制劑。本文的研究成果進(jìn)一步明確了連翹清熱解毒的藥效物質(zhì)，為該藥的進(jìn)一步開發(fā)奠定了理論基礎(chǔ)。

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AntibacterialPhenylethanoidGlycosidesfromFruitsofForsythiasuspensa

JIANG Xing，LU Limim，ZHANG Chunlei，WANG Xingyan，SUN Qi，WANG Jiatian，YUAN Guangjun*

(iamusiCollege，HeilongjiangUniversityofChineseMedicine，Jiamusi154007，China)

Objective：To Study on the antibacterial phenylethanoids from the fruits ofForsythiasuspensa.Methods：The plant materials were extracted with organic solvent.The extract was extracted by different polarity organic solvents again.Compounds were obtained by comprehensive chromatography.The structures were identified by NMR.Results：Nine compounds were isolated and identified from the fruits ofF.suspensa，including 6′-O-(cis-1，4-dihydroxycyclohexanacetyl)-acteoside (1)，4-O-rhamnosyl-7S，8R-7′，8′-erythro-sisymbrifolin (2)，trichosanthoside A (3)，fucatoside B (4)，poliumoside B (5)，ligupurpuroside J (6)，magnoloside F (7)，echinacoside (8)，and isocrassifolioside (9).Compounds1，6，8showed antibacterial activity againstStaphylococcusaureuswith MICs of 8.0，16.0 and 4.0 μg·mL-1，respectively.Conclusion：Eight phenylethanoide glycosides (1，3-9) and a neolignan (2) were obtained from the plant firstly.

Forsythiasuspensa；phenylethanoide glycosides；antibacterial activity

黑龍江省自然基金項(xiàng)目 (H201464)

] 苑光軍，副教授，研究方向：中草藥藥效物質(zhì)；Tel：(0554)6103868，E-mail：yuanguangjun@sina.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.5.010

2016-08-01)

*[