常見家畜血液病樣的采集與處理

2016-12-31 00:00:00趙杰

農民致富之友 2016年18期

[摘要]隨著本地區養殖產業規模不斷擴大，使家畜感染各種疾病的數量和種類也在擴大。本文主要講解了從事動物實驗室化驗工作，首先要掌握病料的采集方法主要用于大部分臨床化學檢查和免疫學檢驗，是保證正確診斷的基本條件。做好樣品采集，控制疾病發生以便促進本地養殖業的進一步健康發展。

[關鍵詞] 家畜養殖疾病樣品采集防治療健康生態發展

[中圖分類號] S851 [文獻標識碼] A [文章編號] 1003-1650（2016）09-0277-02

1 材料與方法

隨機選擇家畜專業養殖戶10家的300只生豬；10家的200只羊；10家的30只牛作為研究對象，在體重、公母等方面差異較小。在本次研究的過程中，對家畜禽養殖的從業人員、品種的選擇、相關疾病的發生、飼養的方法等進行研究，對其中存在的問題進行分析。

2 試驗結果

根據調查的結果，從事動物實驗室化驗工作，首先要掌握病料的采集方法，而動物血液的采集、保存與運輸技術尤為重要。本文就著重介紹本地主要家畜樣品采集方法，采樣人員應熟悉動物防疫的有關法律規定，具有一定的專業技術知識，熟練掌握采樣工作程序和采樣操作技術。

2.1 家畜采血技術方法

2.1.1 豬的采血方法

2.1.2 耳靜脈采血：豬站立或橫臥保定，采血部位消毒，保定人員用力捏壓靜脈近心端，使血管怒張。采血者左手平拉豬耳并使部位稍高，右手持注射器，以30—40度角沿血管刺入，隨即輕抽針芯，如見回血即為已刺入血管，去除捏壓血管的手指，將注射器與耳一起固定，右手緩緩地將血液抽出3毫升。采血完畢后，用消毒棉球按壓針部并拔出針頭。豬耳靜脈看不清，可剪去除采血部位耳毛有利于采血。

2.1.3 前腔靜脈采血：由2～4名飼養員進行仰臥保定。保定很重要，一般豬的保定需要四個人，把豬仰臥放在地上或一個約有80厘米左右高的臺子上，其中甲人保定后肢，乙人保定頭部，丙人保定前肢，丙人的保定很重要，丙的保定，直接決定采血者能否采出血來，丙要把豬的兩前肢立起來。母豬用保定繩圈住后吊到豬籠架子上，懸吊高度以腳不離地又使不上勁為宜，這樣豬不會亂動，豬的頭頸后仰，方便采血人員察看采血部位、又使前腔靜脈向外突出，靜脈血充脹。對準下針部位，使針頭偏向氣管15度角方向下針，拉緊針筒活塞，針頭插中頸腔靜脈，可見血液流出。有時頸腔靜脈較深，可用手頂緊針筒，將針頭插深點，若仍不見回血，可將針頭往后稍退或左右擺動，直到有血液流出，血液流出3毫升，采血完畢。

2.2 牛的采血方法

2.2.1 尾靜脈采血：牛尾根的1/2—1/3處的靜脈采血。采血量4毫升為好。

2.2.2 頸靜脈采血：一般應用突然刺針方法。即助手用牛鼻鉗或一手握角，一手握鼻中隔，將牛頭部安全固定。而后采血者左手拇指（其余4指）壓迫頸靜脈的下方，使靜脈怒張，右手持針頭，對準注射部位并與皮膚垂直，用腕的彈撥力迅速刺入血管，見有血液流出后，用滅菌容器如青霉素瓶或10毫升一次性注射器接入或吸入即可。采血量4毫升為好。

2.3 羊的采血方法

助手保定羊，采血者左手拇指按壓羊左側頸靜脈近心端，使血管怒張，右手持注射器沿靜脈以30度傾斜刺入血管，采血量3毫升為好。

將以上采好血液的注射器軸心向后稍稍拉出，以利于血清析出，并折彎針頭360。，注射器針頭朝上成30度角放置于2—8度冰箱內或即刻送達市畜牧局。

2.4 采血注意事項

A.采血場所有充足的光線；室溫夏季最好在25—28℃，冬季l5—20℃為宜。

B.采血人員應認真做好自身防護工作。

C.采血用具、采用部位要進行消毒。

D.采血用的采血器和注射器必須保持清潔干燥。

E.采血過程中禁止洗手，只能用吸水紙擦凈，否則會出現溶血，影響檢查的準確性。

F.若要送檢血清，夏天在常溫下放置一段時間，冬天要放置在25～37℃溫水中一段時間，以利血清析出。

2.5 采血時間

豬瘟苗注射后4天產生免疫力；豬口蹄疫病苗注射15無后產生免疫力；牛、羊口蹄疫病苗注射15天后產生免疫力。由此可見，采血的最佳時間應在防疫后20天左右采取，這樣才能都兼顧到。

2.5.1 樣品采集所遵循的一般原則和采集前的準備

①樣品采集所遵循的一般原則

②凡發現患畜（包括馬、牛、羊及豬等）有急性死亡時，懷疑是炭疽病，則不可隨意解剖，應采取其血液進行檢測，在無法抽取血液的情況時局部解剖作脾臟觸片的顯微檢查，只有在確定不是炭疽后，方可進行剖檢。對于表現為急性敗血性死亡的豬，還要注意是否是豬鏈球菌2型。

③采取病料，根據不同的疾病或檢查目的，采其相應的臟器、內容物、分泌物、排泄物或其他材料，樣品的數量應滿足統計學的要求。

④采樣時應小心謹慎，防止動物產生不必要的刺激或損害。

⑤不能確定病因時，可進行全面的采集。檢查病變與采集病料應統籌考慮。如做病料分離培養，應先采集病料，再觀察病理變化。

⑥內臟病料的采取，如患畜已死亡，應盡快采集，最遲不超過6h。否則易出現組織自溶和細菌污染，給診斷帶來困難。

⑦血液樣品在采集前一般禁食8h。否則采集的血液含較多的脂肪顆粒和乳糜，易形成膠凍狀，不易分離血清。

⑧做好人身防護，嚴防人畜共患病感染。如豬2型鏈球菌病高致病的人畜共患病。

⑨防止污染環境，防止疫病傳播，做好環境消毒和病害肉的處理。

2.6 使用器械的消毒

2.6.1 刀、剪、鑷子等用具煮沸30min，使用前用酒精擦拭，用時進行火焰消毒。

2.6.2 器皿（玻制、陶制等）經103kpa高壓30min，或經160℃干烤2h滅菌；或放于0.5—1%的碳酸氫鈉（NaHCO3）水中煮沸10min—15min，水洗后，無菌擦干水后，保存于溶液中備用。

2.6.3 注射器和針頭一般要求使用“一次性”。

2.6.4 采取一種病料，使用一套器械與容器，不可再采其他病料或容納其他臟器材料。

2.6.5 采過病料的用具應先消毒后清洗。檢查過傳染性海綿狀腦病的器械要放在2mol/L的氫氧化鈉（NaOH）溶液中浸泡2h以上，才可再使用。

2.7 口蹄疫樣品的采集和處理

2.7.1 樣品的選擇

用于病毒分離、鑒定的樣品以發病動物（牛，羊或豬）未破裂的水泡皮和水泡液為最好。對于臨床健康但懷疑帶毒的動物可在撲殺后采集淋巴結、脊髓、肌肉等組織樣品作為檢測材料。

2.7.2 品的采集和保存

樣品采集部位可用清水（切忌使用酒精、碘酒等消毒劑消毒、擦拭），剪取病畜的新鮮水泡皮3—5克放入滅菌小瓶中，加適量50%甘油/磷酸鹽緩進液（pH7.4），加蓋密封；也可采用無菌器具采集水泡液至少1毫升，裝入滅菌小瓶中（可加適量抗菌素），加蓋密封；在無法采集水泡皮和水泡液時，可采集淋巴結、脊髓、肌肉等組織樣品3—5克裝入消毒過的容器內，貼上標簽，寫明采樣地點，動物種類，編號，時間等。密封冷凍保存。

2.7.3 若要送檢血清，夏天在常溫下放置一段時間，冬天要放置在25～37℃溫水中一段時間，以利血清析出。

3 結果討論

對動物疫病的發生、流行、分布及相關因素進行系統的長時間的觀察與檢測，以把握動物疫病的發生情況和發展趨勢。采樣過程中要遵循一下幾個原則：

3.1 先排除后采樣的原則

急性死亡的動物，懷疑患有炭疽時，應先進行血液抹片鏡檢，確定不是炭疽后，方可解剖采樣。炭疽動物的樣品采集，按NY/T-561的2.1.2執行。

3.2 盡早采樣的原則

采集死亡動物的病料，應于動物死亡后2h以內采集，最遲不得超過6h。

3.3 無菌操作的原則

采樣過程應注意無菌操作，器械與容器用具應事先消毒，一套器械與容器只能采集一種病料樣品。

3.4 合理選擇采樣方法的原則

根據采樣的目的、內容和要求選擇樣品采集的種類、數量、部位與抽樣方法，采樣時應注意減少和消除影響樣品代表性的各種因素，使樣品能最大限度地代表總體情況。

3.5 生物安全防護的原則