對ABO血型鑒定正反定型不符標準操作規程的建立及探討

摘要：目的 探討通過制定ABO血型鑒定正反不符的標準操作規程，為輸血科檢驗人員提供指導，在遇到ABO血型鑒定正反定型不符時提供一個簡單有效的處理辦法。方法 對我院2013年～2015年間遇到的19例ABO血型鑒定正反定型不符通過疑難血型SOP進行檢測和分析。結果 19例ABO血型正反不符均得到解決，患者得以順利輸上血液。其中9例因冷凝集效價較高所致，6例因抗體減弱所致，3例因不規則抗體的檢出所致，1例因血漿蛋白異常干擾所致。結論 冷凝集素、抗體減弱及不規則抗體的出現都是導致ABO血型鑒定正反不符的常見原因之一，不同的原因有不同的檢測方法，制定一個疑難血型的標準操作規程，能有效縮短檢測時間，有利于血型的正確定型，以便選擇合適的血液，保障輸血的及時性和安全性。

關鍵詞：ABO血型鑒定正反不符；疑難血型標準操作規程

輸血是臨床上常用的一種治療手段，正確鑒定血型則是臨床安全輸血的重要前提，造成ABO血型正反定型不符的原因很多，本科室就2013年～2015年間發現的的19例ABO血型正反定型不符做回顧性分析，探討制定一個標準的鑒定疑難血型的操作規程，現報告如下。

1資料與方法

1.1標本來源 選取我院2013年～2015年間住院患者中檢出的19例ABO血型鑒定正反不符病例，年齡從25～70歲不等，內科患者15例，外科患者4例。

1.2試劑來源 ABO紅細胞試劑和抗A、抗B血清由上海血液生物醫藥有限公司提供，抗篩試劑由長春博德公司提供，微柱凝膠卡由長春博訊公司提供。

1.3試驗方法 按照《臨床檢驗技術操作規程》中制定的血型血清學操作規程進行操作[1]，采用鹽水試管法、微柱凝膠法兩種方法進行。

1.4 ABO血型鑒定正反不符SOP操作規程

1.4.1 第一步 核對患者信息：包括患者姓名、科室、住院號、血樣編號等信息，確認無誤。

1.4.2 第二步 了解病史：查看患者年齡、妊娠史、輸血史等信息，以及臨床診斷、輸血目的、血紅蛋白量等，初步考慮血型鑒定正反不符是否與年齡、妊娠及疾病有關，如某些白血病、惡性腫瘤、自身免疫性疾病等均可引起ABO血型鑒定正反不符。

1.4.3 第三步 標本處理：將血樣置離心機于3000r/min下離心3min，吸取患者紅細胞用生理鹽水洗滌三遍做ABO血型正定型，吸取上層血漿做ABO反定型，同時做直接抗人球蛋白試驗、抗體篩查、自身對照試驗。

1.4.4 第四步 結果記錄及判斷：做個簡單列表，見表1。

①如果后三項陰性，正反定型不符先考慮是否人為差錯、ABO亞型或抗原抗體減弱。一般人為差錯重做后可糾正；懷疑抗原抗體減弱可將室溫反應時間延長15minmin、反復離心或置4℃冰箱10 min觀察結果、同時可將血清加倍與紅細胞反應，如無法解決，加做吸收放散試驗進行檢測；懷疑ABO亞型可用抗A1、抗AB、抗H、A2細胞等加做試驗即可解決，如確因試劑缺乏就送至上一級單位進行協助鑒定；②如果后三項任何一個陽性，都可引起血型鑒定正反定型不符，可考慮是否冷凝、有意外抗體的出現或疾病致血漿蛋白異常及紅細胞全凝集現象的影響等。按照先簡后繁的原則進行檢測，見圖1。

2結果

我科根據疑難血型鑒定操作規則，進行多種試驗，結合臨床資料做出血型最終定型，最終我院2013～2015年遇到的19例ABO血型正反定型不符均得到解決，9例因冷凝集效價較高所致，6例因抗體減弱所致，3例因不規則抗體的檢出所致，1例因血漿蛋白異常干擾所致。

3討論

輸血是臨床上常見的一種治療手段，正確鑒定血型是保證安全輸血的前提。在血型分類中沒有疑難血型，迄今為止在文獻中也查不到\"疑難血型\"的定義，因為\"疑難血型\"是1 種血型難以檢定或判定的\"現象\"， 而不是1種型別。檢定1份標本是否屬\"疑難血型\"，除了標本本身的特殊性外， 還與實驗室的設備、技術人員的水平、經驗等多種因素有關[2]，在遇到血型鑒定正反不符的時候，很多檢驗人員無法進一步做鑒定，常常顯得手足無措，在急診搶救時更是亂了陣腳，遇到此類情況時，如果能制定一個標準的疑難血型操作流程，給檢驗人員提供參考，則會節約很多檢測時間，避免多做一些不必要的試驗，不至于毫無章法，為血型的正確定型和交叉配血的順利進行找準方向。導致ABO血型鑒定正反定型不符原因很多，實驗之前必須全面分析病歷情況，有選擇的運用相應手段來解決問題，其中導致血型鑒定困難的常見因素有高效價冷凝素和不規則抗體[3]，像我院遇到的血型正反定型不符中冷凝現象造成的非常常見，一般人血清中冷凝素效價多在1：16以下，且 < 4℃才有活性，20℃即不凝集。某些患者如自身免疫性溶血性貧血、支原體肺炎、腎功能不全、肝硬化患者等血清中含有較高效價的病理性自身冷凝素，導致血型鑒定和交叉配血困難，這種情況只需將紅細胞和血清分別放在37℃的溫水中，然后再進行正反定型，或者在試驗進行中將試管放入37°C水浴中搖晃數秒即可解決。對于由血型不規則抗體所致的ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合，則可通過譜細胞或吸收放散試驗來確定其血型的型別[4]。本文重點探討一些簡易的判斷方法，不管何種原因，我們都可通過疑難血型SOP進行檢測，遵從先簡后繁的原則，利用逐步分析法，按照不同的確診試驗分別進行鑒定分析判斷。總之，在遇到ABO血型鑒定正反定型不符時，基層醫院如能制定一個相應的操作流程尤為重要，使一線工作人員熟練掌握相應的理論知識和技能，遇到疑難血型時能按SOP 要求進行操作[5]，規范操作流程，會為臨床合理安全用血打下良好基礎，保障其用血的安全性。

參考文獻：

[1]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3 版.南京：東南大學出版社，2006：246-258.

[2]蘭炯采，陳靜嫻，馬紅麗，等.推薦ABO疑難血型三步分析法[J].中國輸血雜志，2010，23（3）：165-167.

[3]馬鳳蓮，魯會田.高效價冷凝集素對血型鑒定和交叉配血的影響分析[J].中國醫藥指南，2012，10（23）：312-313.

[4]闕朝錦.淺析ABO血型正反定型不符與交叉配血不合的原因及處理方法.當代醫藥論叢， 015，13（ 8）：44-45.

[5]朱培元，唐雯，相曉，等.ABO 血型正反定型不符標準操作規程的建立與應用.臨床誤診誤治，2011，24（8）：9-11.

編輯/申磊