蔡佳文,金曉霞*,于麗杰,崔柏楊,魏迅,董延龍
(1.哈爾濱師范大學生命科學與技術學院,植物生物學黑龍江省高校重點實驗室,哈爾濱 150025;2.黑龍江省農業(yè)科學院園藝分院,哈爾濱 150069)
龍葵E2泛素結合酶基因SorUBC克隆及表達特性分析
蔡佳文1,金曉霞1*,于麗杰1,崔柏楊1,魏迅1,董延龍2
(1.哈爾濱師范大學生命科學與技術學院,植物生物學黑龍江省高校重點實驗室,哈爾濱 150025;2.黑龍江省農業(yè)科學院園藝分院,哈爾濱 150069)
對龍葵SorUBC基因克隆并分析其在多種非生物脅迫處理下表達特性,為E2泛素結合酶在植物逆境脅迫中應用提供理論依據(jù)。試驗采用電子克隆結合RT-PCR方法從龍葵中克隆得到泛素E2結合酶UBC基因編碼區(qū)序列,命名為SorUBC,登陸GenBank,編號:KU233684。SorUBC基因編碼區(qū)全長888 bp,編碼295個氨基酸。進化樹分析顯示,該基因編碼氨基酸序列與馬鈴薯、番茄同源性最高,為95%,其次是煙草,為91%。該蛋白在第266~284氨基酸位具有1個跨膜螺旋區(qū)域,泛素化位點預測表明其含有8個泛素化位點。利用熒光定量PCR技術分析SorUBC基因在龍葵各器官表達特征和不同非生物脅迫處理下(干旱、鹽、堿、高溫和低溫)根部和葉片表達特性,同時測定龍葵葉片生理響應。結果表明,SorUBC基因表達具有組織差異性,在葉片和果實中表達量較高。非生物脅迫處理(干旱、鹽、堿、高溫和低溫)后根部和葉片基因表達情況顯示該基因存在早期(3或5h)應答上調表達,且根部與葉片基因表達量和變化趨勢差異顯著,根部表達量變化比葉片顯著,推測SorUBC基因在龍葵早期響應干旱、鹽、堿、高溫和低溫非生物脅迫中起調控作用。……