燈盞乙素抑制熱應激誘導豬腎小管上皮細胞凋亡研究

叢霞，李華濤，陳健偉，張東君，曹榮峰，田文儒*

（1.青島農業大學動物科技學院，山東青島 266109；2.肥城市畜牧獸醫局，山東肥城 271600）

燈盞乙素抑制熱應激誘導豬腎小管上皮細胞凋亡研究

叢霞1，李華濤1，陳健偉1，張東君2，曹榮峰1，田文儒1*

（1.青島農業大學動物科技學院，山東青島 266109；2.肥城市畜牧獸醫局，山東肥城 271600）

燈盞乙素（Scu）為燈盞花中提取的單一黃酮類化合物，具有清熱解毒和保護細胞免受熱應激損傷的作用。試驗將不同濃度Suc培養的豬腎小管上皮細胞（LLC-PK1）在42℃下熱應激1 h，采用RNA干擾法沉默細胞HSP72基因表達，熒光定量PCR和Western blot檢測細胞熱休克蛋白（HSP）70、Bcl-2、Bax、細胞色素C（Cyt-c）和caspase-3裂解。結果表明，Scu顯著增加細胞Bcl-2蛋白和HSP70蛋白水平，增加Bcl-2/Bax比值，抑制Cyt-c的釋放及pro-caspase-3裂解和caspase-3表達；但沉默HSP70后，細胞Cyt-c釋放和caspase-3表達均顯著增加。由此可知，Scu抑制LLC-PK1凋亡，保護細胞免受熱應激損傷。

燈盞乙素；LLC-PK1；凋亡；熱應激；HSP70

腎臟疾病如急性腎小管阻塞、慢性痛風性腎病、尿酸腎結石等，可引起腎臟組織損害，炎性細胞浸潤，導致腎功能損傷。Choe等研究認為，細胞凋亡可能是腎臟（尤其是腎小管上皮）細胞損傷發病機制之一[1]。細胞凋亡具有兩個主要調節途徑，即死亡受體誘導的外源性和線粒體小體介導的內源性途徑。Bax和Bcl-2在線粒體介導的凋亡途徑中發揮重要作用，能調節線粒體外膜通透性，使細胞色素C（Cyt-c）釋放到細胞質中。Cyt-c促進凋亡蛋白酶激活因子活化并激活caspase-9，促進procaspase-3裂解成caspase-3，導致蛋白水解和細胞凋亡[2]。在內源性途徑中，HSP70能穩定部分變性蛋白，去除不可逆損傷蛋白，維持細胞正常功能并抑制熱應激引起細胞凋亡?！?br>