輸血依賴重型β-珠蛋白生成障礙性貧血患者同種抗體的特征性研究

李 嵐，方紅輝，翁 彬

(1.深圳市第二人民醫院輸血科，廣東深圳 518035；2.深圳市人民醫院檢驗科，廣東深圳 518020；3.深圳市人民醫院輸血科，廣東深圳 518020)

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·臨床研究·

輸血依賴重型β-珠蛋白生成障礙性貧血患者同種抗體的特征性研究

李 嵐1，方紅輝2△，翁 彬3

(1.深圳市第二人民醫院輸血科，廣東深圳 518035；2.深圳市人民醫院檢驗科，廣東深圳 518020；3.深圳市人民醫院輸血科，廣東深圳 518020)

目的 探討重型β-珠蛋白生成障礙性貧血(以下簡稱地貧)患者產生同種抗體的發生率及其類型。方法 選擇280例反復輸血的重型β-地貧患者(β-地貧組)配血困難的標本進行同種抗體鑒定并與155例非β-地貧血液系統疾病患者(非β-地貧組)進行比較分析。結果β-地貧組產生同種抗體概率高，280例患者中檢出陽性抗體27例，陽性率為9.64%(27/280)。累積輸血量小于40U患者產生具有臨床意義的同種抗體8例,≥40U患者產生同種抗體19例,二者比較差異有統計學意義(P<0.05)。非β-地貧組患者中產生同種抗體14例，陽性率為9.03%(14/155)。累積輸血量小于40U患者產生具有臨床意義的同種抗體2例,≥40U患者中產生同種抗體12例,二者比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論 隨著輸血次數的增加，產生同種抗體的概率相應增加，給予長期反復多次輸血的患者RH抗原表型相匹配的血液輸注，具有重要的臨床意義，可降低輸血不良反應發生率。

輸血； 重型β地中海貧血； 同種抗體

珠蛋白生成障礙性貧血(以下簡稱地貧)是我國南方常見的遺傳性疾病。由于珠蛋白基因的缺失或缺陷，引起血紅蛋白肽鏈中的一種或幾種合成不平衡所致的一組遺傳性疾病[1]。重型β-地貧因β-珠蛋白基因突變，使β-珠蛋白合成缺乏或極度減少，多余的α-珠蛋白形成α四聚體(α4)沉積在紅細胞膜上，紅細胞破壞增多，壽命明顯縮短，導致慢性溶血性貧血，定期輸血是治療重型β-地貧的主要方法。通過輸血，患者的生活質量得到很大改善，但反復、多次、長期輸血給患者帶來極大風險，臨床常遇見配血困難的情況，影響臨床治療，作者就此進行了分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2008年1月至2014年12月廣東省深圳市第二人民醫院收治的重型β地貧患者280例(β-地貧組)，其中男162例，女118例；年齡10個月至36歲，中位年齡17歲。首次開始輸血治療年齡2～16個月，輸血年限3個月至35年，中位年限16年。輸血間隔最短14 d，最長2個月，每次輸注1～4 U紅細胞懸液。選擇155例血液系統疾病(包括急性淋巴細胞白血病、骨髓增生異常綜合征、再生障礙性貧血等)患者(非β-地貧組),其中男73例，女82例；年齡21～76歲。輸血年限2～6年，輸血間隔2～10 d，每次輸注1～2 U紅細胞懸液。

1．2 儀器與試劑 同種抗體篩查用微柱凝膠卡(批號：14131.01)、孵育器(型號：Grifols.SN 319-0000797)及離心機(型號：Grifols DGSPIN)均由西班牙戴安娜公司提供。抗體篩選細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號(批號：20150102)由長春博德生物技術有限公司提供。鑒定譜細胞(批號：20150203)由上海血液生物醫藥有限公司提供。

1．3 方法 同種抗體篩查采用微柱凝膠法。取微柱凝膠卡做好標記，分別加篩選細胞50 μL及患者血清50 μL，置專用孵育器37 ℃孵育15 min，1 000 r/min離心10 min判讀結果。均勻沉于管底為陰性，懸浮于凝膠表面或凝膠中為陽性。陽性標本進行抗體鑒定加入篩選譜細胞，方法同上。比較兩組患者產生同種抗體的類型、例數及陽性率。

1．4 統計學處理 采用SPSS10.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率或構成比表示，采用χ2檢驗，檢驗水準：α=0.05，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2．1 β-地貧組患者產生同種抗體陽性結果分布情況 280例β-地貧患者輸血2 759例次，產生同種抗體27例，陽性率為9.64%(27/280)。其中Rh血型系統產生的同種抗體23例，占85.19%(23/27)，Kidd系統3例，占11.11%(3/27)，MNSsU系統1例，占3.70%(1/27)。累積輸血量小于40 U患者中產生同種抗體8例，占29.63%(8/27)；≥40 U患者中產生同種抗體19例，占70.37%(17/27)。二者比較差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2 非β-地貧組患者產生同種抗體陽性結果分布情況 155例非β-地貧患者輸血561例次，產生同種抗體14例，陽性率為9.03%(14/155)。全部均由Rh血型系統產生。累積輸血量小于40 U患者中產生同種抗體2例，占14.29%(2/14)；≥40 U患者中產生同種抗體12例，占85.71%(12/14)。兩組患者產生同種抗體陽性結果分布情況見表1。

2.3 不同性別及輸血量患者產生同種抗體陽性結果分布情況 輸血量越多、頻次越高的患者產生同種抗體比例越高，兩組患者中產生同種抗體者輸血均在3次以上；<18歲女性患者同種抗體抗體檢出率與男性相似，≥18歲者同種抗體檢出率高于男性。

表1 兩組患者產生同種抗體陽性結果分布情況(n)

*:P<0.05，與同組小于40 U比較。

3 討 論

地貧是我國南方常見的遺傳性疾病。重型β-地貧患者從父母雙方各繼承一個異常β-珠蛋白基因，即為純合子β-地貧。若父母雙方的異常β-基因突變類型不同，則為雙重雜合子β-地貧，臨床表現與純合子相似。重型β-地貧患者出生時正常，一般于3～6個月開始發病，造血干細胞移植是目前臨床唯一可行的治愈方法，但由于匹配干細胞供者少，費用昂貴，僅有小部分患者受益[2]。通過基因治療替代缺陷的β-珠蛋白基因恢復正常造血功能，已有成功的個案報道[3]，但受限于基因表達的時空復雜性，目前仍處于探索階段。因此，絕大部分重型β-地貧患者需依賴定期規范輸血維持生命。但長期輸血可導致多種同種抗體的產生，給輸血治療帶來困難。

本研究結果顯示，β-地貧組患者輸血2 759例次，檢出具有臨床意義的同種抗體27例，陽性率為9.64%(27/280)。其中Rh血型系統產生的同種抗體23例(85.19%)，Kidd系統3例(11.11%)，MNSsU系統1例(3.70%)。累積輸血量小于40 U患者中產生同種抗體8例，≥40 U患者中產生同種抗體19例。

非β-地貧組患者輸血561例次，檢出具有臨床意義的同種抗體14例，陽性率為9.03%。全部均由Rh血型系統產生。累積輸血量小于40 U患者中產生同種抗體2例，≥40 U患者中產生同種抗體12例。非β-地貧患者雖在較短時間內輸血量大，頻率高，但從整體來講，其輸血年限和輸血總量仍遠遠低于β-地貧組，故產生同種抗體的概率略低于β-地貧組。本研究結果顯示，輸血量越大、頻次越高，產生同種抗體比例越高。兩組產生同種抗體患者輸血均在3次以上，<18歲女性患者檢出不規則抗體與男性相似，≥18歲女性在妊娠等生理因素影響下，與機體受到免疫刺激有關，可能同時存在輸血和妊娠雙重機會，所以成年女性同種抗體檢出率高于男性患者，與文獻[4]報道的結果一致，<18歲患者則無這種性別差異。

本研究中具有臨床意義的同種抗體以Rh血型抗體比例最高，β-地貧組占85.19%(23/27)，非β-地貧組則為100.0%(14/14)，Rh血型抗體是引起免疫性溶血性輸血反應最常見的同種抗體。該類抗體通常是患者經輸血刺激后發生紅細胞同種免疫而產生[5]，雖然Rh血型系統中D抗原的強度高于E抗原，但從表1可見，抗E卻多于抗D，這與近年來由于醫院將D抗原檢測納入常規血型檢測項目有關[6],所以降低了抗-D檢出率和引起不良反應的機會。反而臨床上患者產生抗E的概率大于抗-D。抗c一般通過免疫產生，在Rh血型系統中，其重要性僅次于抗D和抗E[7]。臨床工作中較少關注Rh血型系統中的E、e、C、c抗原是否相符。其實Rh血型系統的臨床重要性僅次于ABO血型系統，所以在檢出患者體內有Rh血型抗體時應盡量給予Rh表型同型血液輸注[8]。能最大限度地保證長期輸血患者的輸血安全，避免因輸入含有抗原陽性血液而引起遲發型輸血不良反應[9]。

Kidd系統的JKa與JKb的免疫性微弱，常與其他抗體同時存在，難以鑒定，二者均由懷孕或輸血致敏作用后形成，通常抗JKa較抗JKb常見。本研究中抗JKa陽性患者就同時合并抗E和抗c陽性。

抗-M為冷凝集素，常以免疫球蛋白M的形式存在，一般不在體內引起溶血性反應，但當機體處于冷抗體最適溫度范圍(4～20 ℃)時也可發生溶血反應[10]。

綜上所述，重型β-地貧患者在開始第一次輸血前明確血型很重要,包括ABO血型，Rh(D)陽性還是陰性，以及較為罕見的Rh系統C、c、E、e，甚至Kell、Kidd系統，這樣患者就能接受盡可能血型相符的血液，減少血液不吻合或不相容產生的排斥反應，避免輸血相關性溶血。因此，重型β-地貧患者的同種抗體檢查對于預防輸血不良反應、為有可能行干細胞移植治療的患者創造條件顯得尤為重要。

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深圳市科技研發資金資助項目(JCYJ2014041470821162)。△

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.02.038

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1673-4130(2016)02-0236-03

2015-07-28)