聯合檢驗對珠蛋白生成障礙性貧血與缺鐵性貧血的診斷價值評價

余喜然，卓德祥，湯俊峰，鄭水娥

(福建醫科大學附屬三明第一醫院檢驗科，福建三明 365000)

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·論 著·

聯合檢驗對珠蛋白生成障礙性貧血與缺鐵性貧血的診斷價值評價

余喜然，卓德祥，湯俊峰，鄭水娥

(福建醫科大學附屬三明第一醫院檢驗科，福建三明 365000)

目的 研究聯合檢驗對珠蛋白生成障礙性貧血(以下簡稱地貧)與缺鐵性貧血(IDA)的診斷價值。方法 選擇2013年8月至2015年2月該院收治的地貧患者36例、IDA患者34例及健康體檢者30例作為研究對象。對各組入選樣本進行聯合檢驗，檢測內容包括平均紅細胞比容(MCV)、紅細胞體積分布寬度(RDW)、血紅蛋白(Hb)電泳及紅細胞(RBC)滲透脆性試驗(以下簡稱RBC脆性)等血液學指標。結果IDA組和地貧組患者MCV、RBC脆性均下降，IDA組患者RDW上升，地貧組患者HbA2上升，與對照組比較差異均有統計學意義(P<0.05)。RDW對IDA的靈敏度為70.6%，低于地貧(77.8%)，但差異無統計學意義(P>0.05)。MCV、Hb電泳、RBC脆性對地貧的靈敏度分別為97.2%、88.9%、77.8%，特異性分別為80.0%、90.0%、83.3%。MCV聯合Hb電泳、Hb電泳聯合RBC脆性、MCV聯合Hb電泳聯合RBC脆性并聯試驗對地貧的靈敏度分別為100.0%、97.2%、100.0%，明顯高于單項檢驗的靈敏度；而MCV聯合Hb電泳、Hb電泳聯合RBC脆性、MCV聯合Hb電泳聯合RBC脆性串聯試驗對地貧的特異性分別為96.7%、100.0%、100.0%，明顯高于單項檢驗特異性，差異均有統計學意義(P<0.05)。結論 應用血液學指標、Hb電泳及RBC脆性聯合檢驗地貧與IDA能顯著提高診斷準確性，值得推廣應用。

實驗室技術和方法； 地中海貧血/診斷； 貧血,缺鐵性/診斷

珠蛋白生成障礙性貧血(以下簡稱地貧)是一種遺傳性溶血性疾病，是由珠蛋白肽鏈合成速率不平衡，引起血紅蛋白合成障礙所致[1]。地貧除伴輕微貧血或精神不佳外通常無明顯臨床特征，但當配偶均為地貧雜合子攜帶者時則易發生基因缺失或突變，導致新生兒死亡或妊娠晚期胎死腹中。隨著循證檢驗醫學的興起，發現過多的檢查會干擾診斷結果和治療預后。鑒于此，本研究從循證觀念著手，對平均紅細胞比容(MCV)、紅細胞體積分布寬度(RDW)、血紅蛋白(Hb)電泳及紅細胞(RBC)滲透脆性試驗(以下簡稱RBC脆性)等指標檢測及其聯合檢測進行系統分析，旨在篩查出地貧雜合子攜帶者，改善圍生兒不良結局，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年8月至2015年2月本院收治的地貧患者36例(地貧組)，其中男21例，女15例；年齡7～42歲，平均(24.9±3.3)歲。缺鐵性貧血(IDA)患者34例(IDA組)，其中男12例，女22例；年齡10～54歲，平均(31.4±4.1)歲。地貧組和IDA組患者均經《血液病診斷及療效標準》分型確診[2]。另選擇同期健康體檢者30例為對照組，其中男14例，女16例；年齡19～51歲，平均(33.6±3.4)歲。

1.2 標本采集及檢驗 采集入選者早晨空腹肘靜脈血1～2 mL置于含乙二胺四乙酸二鉀的冷試管中混合10～20 min，保存于溫室中，每日質控。

1.2.1 MCV、RDW檢驗 采用日本K-4500型全自動紅細胞計數儀嚴格按操作流程進行測定。正常范圍：MCV 82～94 fL，RDW 11.6%～14.6%。

1.2.2 Hb電泳檢驗 采用美國spife3000型全自動電泳分析儀進行Hb電泳檢驗。參考標準：(1)伴快速區帶初步診斷為α-地貧；(2)HbA2 3.5%～6.0%診斷為輕型β-地貧；(3)HbF>40.0%，僅少量或無HbA確診為重型β-地貧。

1.2.3 RBC脆性檢驗 采用簡易紅細胞脆性一管法，正常參考值為溶血百分率大于60%。

1.2.4 地貧基因診斷 α-珠蛋白基因檢驗應用雙重PCR擴增技術，β-珠蛋白基因采用反向雜交技術。

1.3 診斷評價 參考全國臨床血液學指標檢驗標準[3]：MCV陽性數和敏感數均為小于82 fL，陰性數和不敏感數均為大于82 fL；RDW陽性數和敏感數均為大于14.6%，陰性數和不敏感數均為11.6%～14.6%；Hb電泳陽性數和敏感數均為小于2.5%或大于3.5%，陰性數和不敏感數均為2.5%～3.5%；RBC脆性陽性數和敏感數均為小于60%，陰性數和不敏感數均為大于60%。并聯試驗：檢驗中存在陽性結果即為陽性數；串聯試驗：所有檢驗均為陽性結果即為陽性數。

2 結 果

2.1 各組血液學指標比較IDA組患者MCV下降，RDW上升，RBC脆性下降；地貧組患者MCV下降，HbA2上升，RBC脆性下降。與對照組比較差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組血液學指標比較

*：P<0.05，與對照組比較。

2.2RDW檢驗IDA與地貧的結果 34例IDA組患者中RDW陽性14例，陰性10例，RDW對IDA的靈敏度為70.6%；36例地貧組患者中RDW陽性8例，陰性28例，RDW對IDA的靈敏度為77.8%。RDW對IDA的靈敏度低于地貧，但差異無統計學意義(P>0.05)。

2.3 單項檢驗對地貧的診斷評價 36例地貧組患者中MCV陽性35例，陰性1例；Hb電泳陽性32例，陰性4例；RBC脆性陽性28例，陰性8例。30例對照組健康者中MCV陽性5例，陰性24例；Hb電泳陽性3例，陰性27例；RBC脆性陽性5例，陰性25例。MCV對地貧的靈敏度為97.2%，特異性為80.0%；Hb電泳對地貧的靈敏度為88.9%，特異性為90.0%；RBC脆性對地貧的靈敏度為77.8%，特異性為83.3%。

2.4 聯合檢驗對地貧的診斷評價MCV聯合Hb電泳、Hb電泳聯合RBC脆性、MCV聯合Hb電泳聯合RBC脆性并聯試驗對地貧的靈敏度分別為100.0%、97.2%、100.0%；MCV聯合Hb電泳、Hb電泳聯合RBC脆性、MCV聯合Hb電泳聯合RBC脆性串聯試驗對地貧的特異性分別為96.7%、100.0%、100.0%。見表2。

表2 聯合檢驗對地貧的診斷評價(n)

3 討 論

IDA是由體內鐵供應量難以滿足正常紅細胞生長的需求量而引起Hb合成障礙的一種常見貧血[4]。而地貧是一組染色體不完全顯性遺傳性溶血性貧血，地貧患者可以通過配偶雙方遺傳給下代。因此，婚齡夫婦在婚前、孕前進行地貧檢查對改善圍生兒不良結局至關重要。據國內外文獻報道，聚合酶鏈反應(PCR)技術結合其他分子生物學檢驗是地貧檢測最有效的診斷方法，但價格昂貴、操作復雜，不利于臨床普檢[5-6]。IDA和地貧均為小細胞低色素貧血[7]，且MCV、RDW、Hb電泳及RBC脆性血液學指標均是小細胞低色素貧血的常用分類指標。因此，本研究將該類血液學指標應用于產前對地貧雜合子攜帶者的篩查，且與分子學檢驗結果進行比較，以評價上述檢驗方式在篩查地貧中的應用價值，進而獲得一種最為合適的檢驗方式。

本研究結果顯示，與對照組比較IDA組患者RDW上升，而地貧組患者RDW無明顯變化，且RDW對IDA的靈敏度為70.6%。提示RDW能區分IDA與地貧，且可以作為篩查IDA的初步診斷指標，與Singer等[8]和張莉等[9]研究結果相似，依據MCV、RDW參數分類法，IDA屬小細胞不均一性貧血，表現為MCV下降，RDW上升；而地貧屬小細胞均一性貧血，表現為MCV下降，RDW正常。同時還發現，地貧組患者MCV、HbA2、RBC脆性與對照組比較差異均有統計學意義(P<0.05)，表明MCV、HbA2、RBC脆性聯合檢驗可降低漏檢率。另外在單項檢驗中發現，MCV對地貧的靈敏度優于Hb電泳、RBC脆性，提示MCV下降是地貧的一種普遍特性。這可能與以下因素有關：(1)在行電泳區帶的洗脫及檢驗時易出現洗脫不徹底或比色卡誤差，進而造成對輕型β-地貧的漏診；(2)重癥地貧會發生溶血反應，使網織紅細胞或紅細胞碎片增加或采集血液不新鮮都易產生假陰性[10]，影響RBC脆性結果，使地貧攜帶者未能被檢查出來。然而從本研究結果可知，IDA也常伴MCV下降，因而單純MCV診斷仍有漏診的可能。為進一步提高對地貧的檢驗結果，本研究遵循循證檢驗醫學原理將已有的檢驗相結合，即聯合檢驗。結果表明，MCV聯合Hb電泳、MCV聯合Hb電泳聯合RBC脆性并聯試驗對地貧的靈敏度均達100.0%，且Hb電泳聯合RBC脆性、MCV聯合Hb電泳聯合RBC脆性串聯試驗對地貧的特異性也均達100.0%，與李萍[11]和Khalil等[12]研究結果相符，說明并聯試驗有利于提高地貧的靈敏度，而串聯試驗則提高了地貧的特異性。提示實施MCV聯合Hb電泳聯合RBC脆性并聯試驗對診斷地貧的應用價值較高。

綜上所述，應用血液學指標、Hb電泳、RBC脆性聯合檢驗能有效提高對地貧與IDA的診斷準確性，且時效性強，操作簡單，值得臨床廣泛應用。

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The value of the combined test for the diagnosis of thalassemia and iron deficiency anemia

YuXiran，ZhuoDexiang，TangJunfeng，ZhengShui′e

(DeparmentofClinicalLaboratory,theFirstHospitalofSanmingCityAffiliatedtoFujianMedicalUniversity,Sanming,Fujian365000,China)

Objective To investigate the value of the combined test in the diagnosis of thalassemia and iron deficiency anemia(IDA).Methods From August 2013 to February 2015,36 patients with thalassemia,34 patients with IDA,and 30 healthy people who had undergone physical examination were enrolled in the study.The blood samples of those people were tested,and items of the combined test included content of red blood cell volume(MCA),red blood cell volume distribution width(RDW),hemoglobin(Hb) electrophoresis and red blood cell(RBC).Results The patients with IDA or thalassemia had reduced MCA and RBC fragile,patients with IDA had increased RDW,and patients with thalassemia had increased HbA2,compared with the control group the differences were all statistically significant(P<0.05).The sensitivity of RDW to IDA was 70.6%,and to thalassemia was 77.8%,the difference was not statistically significant (P>0.05).The sensitivities of MCV,Hb electrophoresis,RBC fragility to thalassemia were 97.2%,88.9%,77.8% respectively,and the specificity were 80.0%,90.0%,83.3% respectively.The sensitivities of MCA test combined with Hb electrophoresis,hemoglobin electrophoresis combined with RBC brittleness test and parallel combined test of MCA，Hb electrophoresis and RBC brittleness to thalassemia were 100.0%,97.2%,100.0% respectively,which were significantly higher than those of single tests;the specificities were 96.7%,100.0% and 100.0% respectively,which were significantly higher than those of single tests;the differences were statistically significant(P<0.05).Conclusion The application of hematological parameters,Hb and RBC in the diagnosis of anemia and IDA could significantly improve the diagnostic accuracy,and it is worthy of popularization and application.

laboratory techniques and procedures； thalassemia/diagnosis； anemia,iron-deficiency/diagnosis

余喜然，男，副主任技師，主要從事臨床血液學檢驗的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.02.011

A

1673-4130(2016)02-0169-03

2015-07-10)