子宮內(nèi)膜腺癌組織STMN、p27蛋白表達(dá)觀察

岳瑞芹，李燚，辛峰

(聊城市第二人民醫(yī)院，山東聊城 252600)

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子宮內(nèi)膜腺癌組織STMN、p27蛋白表達(dá)觀察

岳瑞芹，李燚，辛峰

(聊城市第二人民醫(yī)院，山東聊城 252600)

目的 觀察子宮內(nèi)膜腺癌組織STMN、p27蛋白表達(dá)變化。方法 子宮內(nèi)膜腺癌組織50例份(觀察組)，非典型增生子宮內(nèi)膜組織30例份(對照組1)，正常增殖期子宮內(nèi)膜組織30例份(對照組2)，采用免疫組化SP法檢測三組子宮內(nèi)膜組織中的STMN、p27蛋白。分析STMN、p27蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系。結(jié)果 觀察組、對照組1、對照組2子宮內(nèi)膜組織STMN蛋白表達(dá)陽性率分別為82.0%、43.3%、23.3%，p27蛋白表達(dá)陽性率分別為26.0%、70.0%、86.7%，觀察組與對照組1、對照組2相比，對照組1與對照組2相比，P均<0.01。STMN蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌組織學(xué)分化程度、手術(shù)病理分期、肌層浸潤程度有關(guān)(P均<0.05)，與患者年齡無關(guān)(P>0.05)。p27蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌患者年齡、組織學(xué)分化程度、肌層浸潤程度、手術(shù)病理分期均無關(guān)(P>0.05)。STMN、p27蛋白在子宮內(nèi)膜腺癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.8944，P<0.01)。結(jié)論 子宮內(nèi)膜腺癌組織中STMN蛋白高表達(dá)、p27蛋白低表達(dá)，兩者可能共同參與了子宮內(nèi)膜腺癌的發(fā)生和發(fā)展。

微管解聚蛋白；p27蛋白；子宮內(nèi)膜腺癌

子宮內(nèi)膜癌為女性生殖道最常見惡性腫瘤[1]，主要病理類型為腺癌。子宮內(nèi)膜癌患者的預(yù)后與腫瘤的惡性程度密切相關(guān)。STMN蛋白是近年研究頗多的一種微管解聚蛋白，在多種惡性腫瘤中高表達(dá)，與腫瘤發(fā)生、發(fā)展以及患者預(yù)后密切相關(guān)[2]，但目前STMN與子宮內(nèi)膜癌關(guān)系的研究較少。p27蛋白是細(xì)胞周期蛋白激酶抑制因子(CKIs)家族成員之一，對細(xì)胞周期進(jìn)行負(fù)性調(diào)節(jié)。本研究觀察了子宮內(nèi)膜腺癌組織STMN、p27蛋白表達(dá)變化，并探討其與子宮內(nèi)膜腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 選擇2013年6月～2014年12月在聊城市第二人民醫(yī)院病理科存放的子宮內(nèi)膜手術(shù)標(biāo)本，共110例份。其中，子宮內(nèi)膜腺癌組織50例份(觀察組)，所有標(biāo)本來源于子宮內(nèi)膜腺癌50例患者，患者年齡37～66歲、平均55.1歲，組織學(xué)分級高分化21例、中分化19例、低分化10例，肌層浸潤程度<1/2者21例、≥1/2者29例，手術(shù)病理分期(FIGO，2009年)Ⅰ期29例、Ⅱ期+Ⅲ期21例；非典型增生子宮內(nèi)膜組織30例份(對照組1)，標(biāo)本來源于因異常子宮出血行診斷性刮宮的30例患者，患者年齡30～56歲、平均46.4歲；正常增殖期子宮內(nèi)膜組織30例份(對照組2)，標(biāo)本來源于因子宮肌瘤行子宮全切術(shù)后的患者，患者年齡35～53歲、平均45.2歲。所選病例病理診斷明確。

1.2 STMN、p27蛋白檢測及判定標(biāo)準(zhǔn) STMN多克隆抗體(濃縮型，1∶150稀釋)購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司；p27單克隆抗體(濃縮型，1∶100稀釋)購自英國ABCOM公司；SP試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。所有標(biāo)本行連續(xù)切片，4 μm厚，采用免疫組化SP法染色，按照試劑盒說明書操作檢測三組子宮內(nèi)膜組織STMN、p27蛋白。觀察各視野染色分布強(qiáng)度和面積。先在100倍低倍鏡視野下選取細(xì)胞分布均勻視野，再隨機(jī)觀察5個不重疊的400倍高倍鏡視野，分別計數(shù)200個細(xì)胞，觀察胞質(zhì)、胞膜或胞核內(nèi)的棕黃色顆粒分布情況。按照Sulzers分級法判定染色結(jié)果。STMN在子宮內(nèi)膜的腺上皮細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)。p27在細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)中染成明顯的棕黃色顆粒為陽性表達(dá)。按照著色強(qiáng)度計分，不著色計0分、淺黃色顆粒計1分、棕黃色顆粒計2分、棕褐色顆粒計3分；按著色范圍計分，無陽性著色計0分、陽性細(xì)胞率≤25%計1分、陽性細(xì)胞率為26%～50%計2分、陽性細(xì)胞率≥51%計3分。將上述兩項得分相乘，0為-、1～2為+、3～6為++、7～9為+++，將+、++、+++定為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較用χ2檢驗，兩變量間的相關(guān)性檢驗采用Spearman等級相關(guān)分析法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組子宮內(nèi)膜組織STMN、p27蛋白表達(dá)比較 觀察組子宮內(nèi)膜組織STMN蛋白表達(dá)-9例、+8例、++12例、+++21例，陽性率為82.0%；對照組1分別為17、6、4、3例及43.3%；對照組2分別為23、3、3、1例及23.3%；觀察組與對照組1、對照組2陽性率相比，對照組1與對照組2陽性率相比，P均<0.01。STMN蛋白陽性表達(dá)與子宮內(nèi)膜病變級別呈正相關(guān)(r=0.532，P<0.01)。

觀察組子宮內(nèi)膜組織p27蛋白表達(dá)-37例、+7例、++4例、+++2例，陽性率為26.0%；對照組1分別為9、3、8、10例及70.0%；對照組2分別為4、6、9、11例及86.7%；觀察組與對照組1、對照組2陽性率相比，對照組1與對照組2陽性率相比，P均<0.01。p27蛋白陽性表達(dá)與子宮內(nèi)膜病變級別呈負(fù)相關(guān)(r=-0.498，P<0.01)。

2.2 STMN、p27蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 STMN蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌組織學(xué)分化程度、手術(shù)病理分期、肌層浸潤程度有關(guān)(P均<0.05)，與患者年齡無關(guān)(P>0.05)。p27蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌患者年齡、組織學(xué)分化程度、肌層浸潤程度、手術(shù)病理分期均無關(guān)(P>0.05)。見表1。

表1 STMN、p27蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系(例)

2.3 子宮內(nèi)膜腺癌組織中STMN、p27蛋白表達(dá)相關(guān)性分析 STMN、p27蛋白在子宮內(nèi)膜腺癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.894 4，P<0.01)。

3 討論

STMN蛋白由位于人染色體1p36.1的STMN基因編碼，含有149個氨基酸。STMN蛋白主要作用于細(xì)胞的M期，調(diào)節(jié)微管蛋白的功能[3]。STMN蛋白是近年來研究較多的一個免疫組化標(biāo)志物，目前已經(jīng)證實STMN在多種惡性腫瘤(骨肉瘤、白血病、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、宮頸癌)高表達(dá)，提示STMN可能參與多種惡性腫瘤的發(fā)生。STMN蛋白的陽性表達(dá)與腫瘤發(fā)生、發(fā)展及腫瘤患者預(yù)后密切相關(guān)[4～12]。Trovik等[13]應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測子宮內(nèi)膜組織STMN蛋白、Akt及磷酸化Akt，發(fā)現(xiàn)STMN蛋白表達(dá)高于Akt和磷酸化Akt，提示STMN蛋白可以更好地表示磷脂酰肌醇3激酶的激活水平。Trovik等通過采集子宮內(nèi)膜癌患者的病例資料，記錄每個患者淋巴結(jié)受累狀態(tài)及其存活率，發(fā)現(xiàn)STMN蛋白高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性，STMN蛋白高表達(dá)者生存預(yù)后差。可見STMN蛋白可以作為子宮內(nèi)膜癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和生存率的預(yù)測指標(biāo)。

p27基因位于染色體12p12-12p13.1，含有198個氨基酸殘基。p27具有阻止細(xì)胞通過G1期向S期轉(zhuǎn)換的作用，使細(xì)胞停滯在G1期。p27對腫瘤的抑制功能是通過其蛋白表達(dá)水平來實現(xiàn)的。p27蛋白在人類很多惡性腫瘤中表達(dá)降低，包括男性前列腺癌以及女性生殖道的子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、宮頸癌等。在許多預(yù)后不良惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)了p27蛋白的高降解，如子宮內(nèi)膜細(xì)胞增生減少伴隨著p27的降解減少[14]。可見p27蛋白在人類惡性腫瘤發(fā)病機(jī)制中具有重要作用。

STMN蛋白的表達(dá)受到許多細(xì)胞因子的負(fù)性調(diào)節(jié)，已知的有p53，目前研究較多的還有p27等因子。Karst等[15]在研究輸卵管癌的癌前病變中發(fā)現(xiàn)，病變過度表達(dá)STMN蛋白時p27是陰性的，病變中STMN蛋白表達(dá)少時p27高表達(dá)。STMN與p27兩者均可作用于細(xì)胞周期，但作用相反，在細(xì)胞遷移過程中相互制約。本研究通過免疫組化的方法發(fā)現(xiàn)，在正常增殖期子宮內(nèi)膜組織、非典型增生子宮內(nèi)膜組織、子宮內(nèi)膜腺癌組織中STMN蛋白的陽性表達(dá)率依次升高，p27蛋白陽性表達(dá)率依次降低。該結(jié)果表明STMN和p27蛋白在子宮內(nèi)膜腺癌發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，STMN蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌組織學(xué)分化程度、手術(shù)病理分期、肌層浸潤程度有關(guān)，與年齡無關(guān)，可見STMN蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌的惡性程度與預(yù)后有關(guān)。但p27蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌患者年齡、組織學(xué)分化程度、肌層浸潤程度、手術(shù)病理分期均無關(guān)。

綜上可見，子宮內(nèi)膜腺癌組織中STMN蛋白高表達(dá)、p27蛋白低表達(dá)，兩者可能共同參與了子宮內(nèi)膜腺癌的發(fā)生和發(fā)展。

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