Kartogenin與TGF?β3/BMP?2/DEX對兔滑膜間充質干細胞增殖及成軟骨分化的對比研究

謝金碩 周義欽 陳松 邵加華 符培亮 許震宇 吳海山

Kartogenin與TGF?β3/BMP?2/DEX對兔滑膜間充質干細胞增殖及成軟骨分化的對比研究

謝金碩 周義欽 陳松 邵加華 符培亮 許震宇 吳海山

目的 比較Kartogenin（KGN）與轉化生長因子β3（TGF?β3）/骨形態發生蛋白2（BMP?2）/地塞米松（DEX）對兔滑膜間充質干細胞（synovial?derivedmesenchymal stem cells,SMSCs）增殖及成軟骨分化的作用。方法 于6～10月齡新西蘭大白兔膝關節處滑膜中分離培養SMSCs，并進行鑒定。設置KGN組（采用KGN干預）、T/B/D組（TGF?β3/BMP?2/DEX聯合干預）及空白對照組，采用PELLET系統培養法分別培養各組細胞。通過比較各組細胞的增殖速度、軟骨微球的直徑和重量、Ⅱ型膠原（Col?Ⅱ）表達情況、成軟骨分化相關標志基因表達及蛋白質合成量等指標來評價KGN對SMSCs增殖及成軟骨能力的影響。結果 成功從兔膝關節滑膜分離出SMSCs；KGN組的SMSCs增殖能力弱于T/B/D組，但KGN組軟骨微球直徑最大，重量最重，Ⅱ型膠原合成量最多，且均顯著高于其他組；PCR及Western Blot結果表明KGN組成軟骨分化相關基因的表達最強，蛋白質合成量最多。結論 KGN不能明顯增強SMSCs的增殖能力，但對SMSCs的成軟骨分化能力強于TGF?β3/BMP?2/DEX，將來可能應用于修復軟骨損傷。

滑膜；間質干細胞；細胞增殖；細胞分化；軟骨細胞；轉化生長因子

滑膜間充質干細胞（synovial?derivedmesenchy? mal stem cells,SMSCs）是一種關節滑膜源性的組織特異性的間充質干細胞（mesenchymal stem cells, MSCs）［1］，具有很強的成軟骨分化能力［2］，而眾多細胞因子參與這一過程并起到關鍵作用。多項研究報道，轉化生長因子β3（transforming growth factor?β3, TGF?β3）、骨形態發生蛋白2（bonemorphogenetic protein?2,BMP?2）、地塞米松（dexamethasone,DEX）

是促肝細胞成軟骨分化的常用因子，并且三者聯合體外誘導SMSCs成軟骨分化比單一因子或兩兩聯合的誘導效率都要高［3?6］。……