免疫組化聯合抗體在胸腹水沉渣石蠟包埋病理診斷中的應用觀察

彭麗姿

摘要：目的 探討在胸腹水沉渣石蠟包埋中聯合應用免疫組化進行檢查的效果。方法 選取我院惡性及存在惡性傾向的體液標本共56例，對其進行沉渣石蠟包埋、切片，采用免疫組化法進行檢查，觀察檢查結果。結果 沉渣石蠟包埋聯合免疫組化檢測法檢出的陽性率為82.1%，高于液基細胞學檢測法，組間比較有差異（P<0.05）。結論 在胸腹水沉渣石蠟包埋中聯合應用免疫組化進行檢查，能夠提升臨床檢出率，確定腫瘤細胞的來源及其發病部位，為臨床治療提供參考意見。

關鍵詞：胸腹水沉渣石蠟包埋；免疫組化；診斷

胸腹水是臨床上一種常見的并發癥，臨床上對其進行診斷時往往采用體液細胞學檢測法，但這種檢測方法的診斷率相對較低。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取于2013年9月～2015年9月我院各個科室送檢的胸腹水標本共260例。其中，患者的年齡41～79歲，平均年齡（56.67±3.29）歲。依據患者的臨床資料與標本的鏡下形態選取惡性及存在惡性傾向的體液標本共56例。

1.2方法

1.2.1切片制作方法 將選取的56例標本進行離心，然后舍棄上清液，吸取沉淀物后，將其制作成1張液基細胞涂片，采用濾紙將剩余的沉淀物進行包埋，包埋完成后進行組織學標號，并將其與組織標本放置于脫水機中，按照組織標本的制作方法對其進行固定、脫水、透明以及浸蠟，制成石蠟組織塊后，再將其制成3～4μm的切片。

1.2.2免疫組化染色方法 檢測方法使用Elivision法，抗體采用CEA、CK-H以及CKlow等，試劑采用福州邁新生物技術有限公司生產。染色方法具體如下：首先，將切片進行常規脫蠟至水，洗液采用PBS。然后，滴入3%的過氧化氫，于常溫下將其放置10min，并依據相關要求進行抗原修復操作，再滴入一抗，將其放置于4℃的冰箱中過夜。最后，向其滴入二抗，DAB顯色后，再采用蘇木素進行復染，并用鹽酸乙醇對其進行分化，并將切片脫水、封片。

1.3評價指標 陽性的評判標準主要包括三種，分別是：①CEA、D2-40以及Tg等部分腫瘤細胞的細胞質著色；②CK-H、CKlow、Calretin以及CA125腫瘤細胞的細胞膜著色；③Ki-67、TTF-1腫瘤細胞的細胞核著色。

1.4統計學方法 采取統計學軟件SPSS19.0對上述數據處理，計數采取率（%），組間率對比采取χ2檢驗，對比以P<0.05有統計學意義。

2 結果

2.1兩種方法檢測胸腹水的檢出率比較分析 沉渣石蠟包埋聯合免疫組化檢測法檢出的陽性率為82.1%，高于液基細胞學檢測法，組間比較有差異（P<0.05）。見表1。

2.2免疫組化檢測法結果分析 沉渣石蠟包埋聯合免疫組化檢測法檢出的46例患者中，其中，表現為肺腺癌的患者共21例，表現為鱗癌的患者共10例，表現為卵巢癌的患者共4例，表現為胃腺癌的患者共9例，表現為間皮瘤的患者共2例。見表2。

3 討論

胸腹水脫落細胞學檢查是臨床上一種常用的檢測方法，該方法具有簡便、準確性高等特點，是臨床上診斷良惡性胸腹水的一種常用方法[1]。近幾年，隨著檢測技術的不斷發展，膜式超薄液基細胞學檢測技術以及沉渣石蠟包埋法已經廣泛應用于胸腹水細胞的涂片中，其中，采用沉渣石蠟包埋法制作切片，不僅可以提升切片的制作數量，保存細胞的完整性，提升臨床檢出率，同時還能夠對其進行免疫組化染色，在此基礎上還可以聯合使用抗體檢測，從而能夠對腫瘤細胞進行有效分類[2]。

目前，臨床上采用胸腹水脫落細胞學檢查時，診斷較為困難的是對間皮細胞與癌細胞的區分，特別是當間皮細胞退化后，由于不具有典型性，更易被誤診[3]。針對較難確診的患者，可以進一步采用免疫組化聯合抗體法進行檢查。臨床實踐中，我們依據單個抗體對不同的腫瘤細胞具有不同的特異性與敏感性的原理，在此基礎上，根據胸腹水沉渣石蠟包埋切片的結果選取相應的抗體，進而采用多種抗體進行聯合檢測[4]。目前，在胸腹水細胞學涂片中，我們常常采用Calretin、CK-H、CEA以及TTF-1四種抗體進行腫瘤的鑒別。其中，Calretin屬于一種鈣結合蛋白，該物質主要存在于人體的神經元以及其他細胞中，常見于間皮瘤中，而在腺癌中則較少見，因此，該物質可以作為惡性間皮瘤的標志物[5]；CK-H屬于一種高分子量的細胞角蛋白，往往在人體皮膚的基底細胞、棘層細胞以及部分前列腺基底細胞等細胞層均有所表達，既可以作為鱗癌與腺癌之間鑒別的標志物，同時還可以作為間皮瘤與腺癌之間鑒別的標志物[6]；CEA主要存在于人體各種腺皮上皮源性腫瘤中，特別是在各種腺癌細胞中廣泛存在，其中，該物質在人體的胃腸道腺癌中具有較高的陽性率，而在人體的體腔間皮細胞中則不存在，且在間皮瘤與增生性間皮細胞中呈現為不表達或者是低表達，因此，該物質是腺癌與間皮癌之間鑒別的重要標志[7]；TTF-1主要存在于原發性肺腺癌中，且對其具有較高的敏感性與特異性，因此，該物質可以作為原發性肺腺癌與轉移性肺腺癌之間鑒別的標志物，同時該物質對于肺原發性低分化腺癌與鱗癌也具有一定的鑒別價值[8]。臨床上采用CKlow、CK-H、CEA以及TTF-1一組抗體聯合應用作為鱗癌與腺癌的鑒別，同時還可以作為腫瘤細胞來源于肺臟的依據。Calretin呈現為陽性表達說明患者為間皮瘤間皮增生，但是對其良惡性的具體判斷還需依據患者腫瘤細胞的異型性、核分裂數等進行綜合判斷。CKlow與CK-H均呈現為陰性，但TTF-1呈現為陽性，則應該考慮患者為肺未分化癌。

綜上所述，在胸腹水沉渣石蠟包埋中聯合應用免疫組化進行檢查，能夠提升臨床檢出率，確定腫瘤細胞的來源及其發病部位，為臨床治療提供參考意見。

參考文獻：

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編輯/哈濤