龍頭魚中二甲胺的含量測定

◎徐佳杭，盧衍東，易會建（.浙江贊宇科技股份有限公司，浙江 杭州 30009；.浙江公正檢驗中心有限公司浙中分公司，浙江 義烏 3000）

龍頭魚中二甲胺的含量測定

◎徐佳杭1，盧衍東2，易會建2
（1.浙江贊宇科技股份有限公司，浙江 杭州 310009；
2.浙江公正檢驗中心有限公司浙中分公司，浙江 義烏 322000）

采用分光光度計法測定，在波長434 nm處比色定量測定龍頭魚中的二甲胺。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液所測得對應(yīng)的吸光度對其二甲胺含量作線性回歸來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為y=0.013 86x-0.027 93，相關(guān)系數(shù)為0.999 35。此次試驗線性良好，r2=0.999，試樣提取液中二甲胺檢出限為0.3 μ g/mL，重現(xiàn)性良好，R SD值為1.29%，加標(biāo)回收率在100.70%～108.30%。

龍頭魚；二甲胺；紫外分光光度法

龍頭魚（Bombay duck），燈籠魚目，龍頭魚科，學(xué)名Harpadon nehereus；分布于太平洋、印度北部的河口，為沿海中、下層魚類，是中國沿海常見食用魚類。龍頭魚富含蛋白質(zhì)，可以維持鉀鈉平衡，消除水腫，提高免疫力，調(diào)低血壓，緩沖貧血，有利于生長發(fā)育。富含膽固醇，能夠維持細(xì)胞的穩(wěn)定性，增加血管壁柔韌性，增加免疫力。富含鎂，提高精子的活力，增強(qiáng)男性生育能力。同時，也有助于調(diào)節(jié)人的心臟活動，降低血壓，預(yù)防心臟病；調(diào)節(jié)神經(jīng)和肌肉活動、增強(qiáng)耐久力。二甲胺是一種低分子有機(jī)物，廣泛存在自然環(huán)境和水產(chǎn)品中，通過呼吸、誤食、皮膚接觸途徑對眼和呼吸道有強(qiáng)烈的刺激作用。液態(tài)二甲胺接觸皮膚可引起壞死，眼睛接觸可引起角膜損傷、混濁。現(xiàn)采用紫外分光光度計法對龍頭魚中二甲胺的測定進(jìn)行方法確認(rèn)。

1　試驗部分

1.1儀器與試劑

1.1.1試驗儀器

紫外分光光度儀，高速臺式離心機(jī)，分析天平，渦漩振蕩器，恒溫水浴鍋。

1.1.2試驗試劑

①7.5%三氯乙酸溶液：準(zhǔn)確稱取7.5 g三氯乙酸固體至100.0 mL容量瓶，用水定容至100.0 mL。②銅氨試劑：分別準(zhǔn)確稱取20.0 g醋酸銨和0.2 g硫酸銅至潔凈燒杯中，加入20.0 mL水溶解；同時準(zhǔn)確稱取10.0 g氫氧化鈉溶于20.0 m L水中，待冷卻，混合上述兩種溶液，在加入20 mL濃氨水，用水定容至100.0 mL，常溫避光保存。③5%二硫化碳苯溶液：準(zhǔn)確量取5.0 mL二硫化碳至100.0 mL容量瓶，并用苯溶液定容（在通風(fēng)廚下進(jìn)行）。④30%冰醋酸溶液：準(zhǔn)確量取30.0 mL冰醋酸至100.0 mL容量瓶中，加入水稀釋至刻度。⑤二甲胺鹽酸鹽：純度99%。⑥二甲胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液：精確稱取0.090 5 g二甲胺鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品，用適量的水溶解并定容至100.0 mL，制成500.0 μ g/mL二甲胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，4 ℃冰箱保存，有效期6個月。⑦二甲胺標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確移取5.0 mL二甲胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用水稀釋定容至50.0 mL，制成50.0 μ g/mL二甲胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，4 ℃冰箱保存，有效期3 d。

1.2樣品預(yù)處理

1.2.1試樣制備

選取某市場有代表性的樣品200.0～500.0 g，用干凈容器存放，待測。

1.2.2樣品提取

在50 mL刻度聚乙烯離心管中，準(zhǔn)確稱取該試樣5.0 g，加入10.0 mL 7.5%三氯乙酸溶液，渦旋1 min，6 000 r/min離心15 min，取上清液；沉淀再用10.0 mL 7.5%三氯乙酸溶液提取一次，合并兩次上清液，過0.45 μ m水相膜，用水定容至100.0 mL，4 ℃保存待測。1.2.3 校準(zhǔn)曲線的繪制

取數(shù)支50.0 mL刻度聚乙烯離心管，分別加入0.2、 0.6、1.0、1.4、2.0 mL和3.0 mL二甲胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，用水稀釋至5.0 mL，空白為5.0 mL水同時測定。加入1.0 mL銅氨試劑搖勻；再加入10.0 mL 50%二硫化碳苯溶液。在50 ℃恒溫水浴鍋中水浴2 min，取出渦旋2 min，然后繼續(xù)水浴2 min，再渦旋2 min；然后加入1.0 mL 30%冰醋酸溶液，斡旋1 min，混勻充分，5 000 r/min離心5 min，使苯層和水完全分開。

再將苯層移至另一干燥潔凈試管中，加入適量無水硫酸鈉去除水分。取適量上清液于1 cm比色皿中，以二硫化碳苯溶液為參比溶液，在434 nm波長處測量吸光度，同時測定空白吸光度值。以系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中二甲胺質(zhì)量數(shù)為橫坐標(biāo)，以扣除空白試樣所測得的校正吸光值為縱坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。

1.2.4樣品測定

根據(jù)樣品中二甲胺含量，吸取5.0 mL樣品溶液，按上述步驟（1.2.3）測定，減去空白試驗所測定的吸光度，根據(jù)對應(yīng)的校準(zhǔn)曲線測得試樣中二甲胺含量。

1.2.5空白試驗

除不加試樣以外，其余完全根據(jù)測定步驟進(jìn)行平行操作。

1.3結(jié)果計算與表述

按以下公式進(jìn)行計算試樣中的二甲胺含量：

式中：C—試樣中的二甲胺含量（m g/kg）；D—在校準(zhǔn)曲線中測出的二甲胺含量（μ g）；V1—定容后的提取液體積（m L）；V2—樣品測定所提取液體積（m L）；m—準(zhǔn)確稱取的試樣重量（g）。

2　結(jié)果與討論

2.1校準(zhǔn)曲線和線性范圍

配制二甲胺標(biāo)準(zhǔn)工作濃度系列，含量分別為10.0、30.0、50.0、70.0、100.0 μ g和150.0 μ g，用紫外分光光度計在434 nm波長處測量相應(yīng)的吸光度，標(biāo)準(zhǔn)系列所測得對應(yīng)的吸光度對其二甲胺含量作直線回歸來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為y=0.013 86x-0.027 93，相關(guān)系數(shù)為0.999 35，標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。

2.2精密度試驗

在某市場購買某一批次龍頭魚樣品，按照上述實驗步驟對其本底做6個平行的測定。結(jié)果見表1。

2.3回收率試驗

在測得該批次龍頭魚樣品中二甲胺含量之后，對其進(jìn)行加標(biāo)試驗，分別做6個平行的測定，并算得其回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見表2。

圖1　二甲胺標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

表1　精密度試驗結(jié)果表

表2　龍頭魚中二甲胺加標(biāo)回收試驗表

3　結(jié)論

試驗結(jié)果表明，該方法結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，標(biāo)準(zhǔn)系列所對應(yīng)的吸光度對其二甲胺含量作直線回歸來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為y=0.013 86x-0.027 93,相關(guān)系數(shù)為0.999 35。此次試驗線性良好，r2=0.999，試樣提取液中二甲胺檢出限為0.3 μ g/mL，重現(xiàn)性良好，RSD 為1.29%，回收率在100.70%～108.30%，適用于龍頭魚中的二甲胺的定量分析。

[1]夏濤.龍頭魚甲醛、二甲胺和氧化三甲胺含量的研究[D].廣州：中山大學(xué)，2007．

[2]池葉艷，胡洋洋，鄭元建，等.淡水魚產(chǎn)品中二甲胺的含量分析[J].廣東化工，2011，10（38）：143-144.

[3]賈佳，朱軍莉，勵建榮.氣相色譜－氫火焰離子檢測器檢測海產(chǎn)品中的二甲胺[J].食品科學(xué)，2009，30（6）：167-170.

The Determination of Dimethylamine Concentration in Bombay Duck

Xu Jiahang1，Lu Yandong2，Yi Huijian2
（1.Zhejiang Polytron Technologies Inc，Hangzhou 310009，China；
2. Zhejiang Fair Test Venter Co. Ltd Zhejiang Branch，Yiwu 322000，China）

By the spectrophotometer，this papaer determined the leading fish in two methylamine colorimetry at the wavelength of 434 nm. The absorbance of standard series of solution measured corresponding of second methylamine content for linear regression to draw standard curve and regression equation y=0.013 86x-0.027 93，the correlation coefficient was 0.999 35. The test linearity was good，R2= 0.999，sample extraction two methylamine solution detection limit was 0.3 μg/mL，the reproducibility was good. The RSD values was 1.29%，the recovery rate between the 100.70%～108.30%.

Bombay duck； Dimethylamine； UV spectrophotometry

TS254

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.04.020