BDNF基因轉染神經干細胞移植腦損傷大鼠移植細胞存活率和Trkβ、Erk1/2、Ras及Trx的表達

尹良偉 ，王禹茲，陳　濤，張舒珊，初海鷹，孔　力，馬海英

(1.大連市中心醫院 綜合六病房，遼寧 大連 116033；2.大連醫科大學 組織胚胎學教研室，遼寧 大連 116044)

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BDNF基因轉染神經干細胞移植腦損傷大鼠移植細胞存活率和Trkβ、Erk1/2、Ras及Trx的表達

尹良偉1，王禹茲2，陳濤2，張舒珊2，初海鷹2，孔力2，馬海英2

(1.大連市中心醫院 綜合六病房，遼寧 大連 116033；2.大連醫科大學 組織胚胎學教研室，遼寧 大連 116044)

目的探討腦源性神經營養因子基因修飾神經干細胞(BDNF/NSCs)移植大鼠創傷性腦損傷(TBI)模型后，對移植細胞存活數量的影響及其機制。方法采用Feeney法制備TBI模型，于造模后72 h，隨機分為兩組：BDNF/NSCs移植組及 NSCs移植組，將3 μL(1×108/mL)BDNF/NSCs或 NSCs直接移植于腦損傷區。分別于移植后1、2、3和4周取腦組織，凍存或制備冰凍切片。在熒光顯微鏡下計數移植細胞存活數量，并采用免疫組織化學技術檢測p-Erk1/2、Ras蛋白的表達；通過RT-PCR技術檢測腦損傷區及周圍組織中Trx、Trkβ基因的表達。結果BDNF/NSCs 組和NSCs 組細胞存活數隨移植時間延長而減少，在移植后的不同時間點，BDNF/NSCs 組移植細胞存活率均明顯高于NSCs 組(P<0.05)；BDNF/NSCs組在移植后不同時間點移植細胞的p-Erk1/2、Ras蛋白表達強度均明顯高于NSCs組(P<0.05)；與NSCs組比較，BDNF/NSCs組損傷灶及周圍腦組織中Trx、Trkβ基因的表達水平均明顯增強(P<0.05)。結論BDNF基因轉染NSCs移植大鼠TBI后，能夠明顯提高移植細胞的存活率，上調Trkβ、p-Erk1/2、Ras及Trx的表達。BDNF與其受體Trkβ結合后，可能通過Ras/Raf/Erk途徑激活其下游的Trx基因從而激活細胞的抗氧化作用，進而減少移植細胞的氧化損傷，提高移植細胞在腦組織損傷區的存活率。

腦源性神經營養因子；神經干細胞；創傷性腦損傷；Ras/Raf/Erk

[引用本文]尹良偉，王禹茲，陳濤，等.BDNF基因轉染神經干細胞移植腦損傷大鼠移植細胞存活率和Trkβ、Erk1/2、Ras及Trx的表達[J].大連醫科大學學報，2016,38(5)：422-427.

創傷性腦損傷(traumatic brain injury，TBI)是指由外傷引起的腦組織損傷，是損傷致死的主要原因之一，也是兒童和青少年致殘的主要原因之一[1]。隨著現代醫療技術的不斷發展，對TBI的治療已經取得了很大的進展，但對TBI患者恢復腦功能仍缺乏有效的治療手段。……