常見病原菌基因組DNA快速提取試劑盒研制

曹飛揚，王　娉，趙曉美，談　笑，李　菲，江連洲，陳　穎*（.中國檢驗檢疫科學研究院農產品安全研究中心，北京0076；.東北農業大學食品學院，哈爾濱50030）

常見病原菌基因組DNA快速提取試劑盒研制

曹飛揚1,2，王娉1，趙曉美1，談笑1，李菲1，江連洲2，陳穎1*
（1.中國檢驗檢疫科學研究院農產品安全研究中心，北京100176；2.東北農業大學食品學院，哈爾濱150030）

以單增李斯特菌、金黃色葡萄球菌等6種常見食源性致病菌為研究對象，優化試劑盒工藝參數，采用瓊脂糖凝膠電泳及OD260/OD280分析基因組DNA提取效果。結果表明，試驗試劑盒可在30m in內完成基因組DNA提取，對常見10類食品樣品抗基質干擾能力強。與實時熒光PCR技術聯用，檢測染菌量1~10 cfu·25 g-1食品樣品時，僅一次增菌可得陽性結果；市售食品樣品檢測與國標方法結果無顯著差異。所研制病原菌基因組DNA提取試劑盒適用于食品病原菌快速檢測。

食源性致病菌；基因組DNA；提取試劑盒；快速

網絡出版時間2016-06-20 08:53[URL]http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20160620.0853.002.htm l

Cao Feiyang,Wang Ping,Zhao Xiaomei,et al.Preparation of rapid extraction kit of genomic DNA from common pathogens [J].Journal of Northeast Agricultural University,2016,47(6):81-88.(in Chinese with English abstract)

由病原微生物引起的食源性疾病是影響食品安全主要因素。食品生產和消費過程中病原微生物檢測和監管對保障食品安全尤為重要。目前，食源性致病菌以傳統培養檢測為主，耗時長且無法實現快速檢測。分子生物學技術是食源性致病菌快速檢測主要方向[1-3]。而食源性致病菌基因組DNA快速提取方法，是分子生物學技術在食品中應用關鍵，對快速檢測食源性致病菌具有重要意義。

目前常用病原菌基因組DNA提取方法主要有酚-氯仿法、離心柱法等，提取病原菌基因組DNA質量較好，但提取速率有待提高?！?br>