楊秀芹,萬洪宇,王金奎,韓麗鑫,杜 欣,禚建樹(東北農業大學動物科學技術學院,哈爾濱150030)
豬miR-101表達特性分析
楊秀芹,萬洪宇,王金奎,韓麗鑫,杜欣,禚建樹
(東北農業大學動物科學技術學院,哈爾濱150030)
miRNA是一類長20~25 nt內源性、單鏈、非編碼小分子RNA,通過調控靶基因轉錄后表達參與機體各項生命活動。人類miR-101是重要疾病相關miRNA,參與維持機體健康、抵御疾病。目前有關豬miR-101研究尚不多見,為確定其在豬抗病毒免疫反應中作用,研究利用stem-loop RT-PCR方法構建豬m iR-101組織表達譜和poly(I:C)誘導表達譜。結果表明,豬miR-101在肝臟組織中表達量最高,高濃度poly(I:C)能有效抑制豬miR-101轉錄表達。為深入闡明m iR-101在豬抗病毒免疫反應中作用奠定基礎,為培育高抗病性豬品種(系)提供參考。
豬;miR-101;poly(I:C);stem loop RT-PCR;表達
網絡出版時間2016-6-17 15:21:59[URL]http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20160617.1521.014.htm l
楊秀芹,萬洪宇,王金奎,等.豬miR-101表達特性分析[J].東北農業大學學報,2016,47(6):74-80.
Yang Xiuqin,Wan Hongyu,Wang Jinkui,et al.Characterization of expression profile of miR-101 in pig[J].Journal of Northeast Agricultural University,2016,47(6):74-80.(in Chinese with English abstract)
miRNA(microRNA)是一類內源性、單鏈、非編碼小分子RNA,長20~25 nt,3'端有1~2個堿基長度變化。成熟miRNA在5'端有一個磷酸基團,3'端為羥基,因此區別于大多數寡核苷酸和功能RNA降解片段。目前,植物、動物和真菌中均發現成熟miRNA。細胞核內miRNA基因首先在RNA聚合酶Ⅱ作用下,轉錄為帶帽子結構和多聚腺苷酸尾巴初始轉錄本(pri-miRNA);再經含有Drosha酶微處理器(Microprocessor)加工,產生長約70 nt、帶有莖環結構前體miRNA(pre-miRNA);pre-miR?NA與轉運蛋白Exportin-5結合,運送至細胞質內;細胞質內經具有RNA內切酶Ⅲ活性Dicer酶加工,形成復合結構雙鏈miRNA;最終在解鏈酶作用下降解為成熟單鏈miRNA[1]。
成熟miRNA在RNA誘導復合物(RISC)作用下與靶基因3'UTR區互補配對,降解mRNA或者抑制其翻譯,負性調控靶基因表達。……