HPV16/18型病毒感染與宮頸癌的關系探討

王偉 陳旭

【摘要】目的：研究探討HPV16/18型病毒感染與宮頸癌的相互關系，分析其臨床應用價值。方法：抽取我院2014年9月至2015年9月間收治的經病理診斷確診為宮頸癌患者81例作為研究對象，并選擇同期收治的198例宮頸炎癥患者作為對照，分別提取兩組患者宮頸分泌物中的DNA樣品，實施PCR擴增，通過實時熒光定量PCR分析對HPV16/18 DNA載量進行測定，計算并比較兩組患者的檢測陽性率。結果：宮頸癌患者和宮頸炎癥患者的HPV16/18 DNA 載量對數值分別為（7.34±4.62）和（4.51±3.03），陽性率分別為79.01%和27.27%，均有宮頸癌患者顯著高于宮頸炎癥患者的情況，比較有統計學差異（P<0.05）。結論：宮頸癌與HPV感染之間存在顯著相關性，且高危型HPV16＼＼18感染是病變發生的必要條件，高病毒載量在宮頸癌的發展中有重要作用，通過早期發現、早期治療，做好對高危人群的篩查，是宮頸癌的預防治療的重要途徑。

【關鍵詞】HPV16/18型病毒感染；宮頸癌；相關性

宮頸癌是婦科臨床上最為常見、發病率最高的惡性腫瘤之一，而人乳頭瘤病毒感染與宮頸病變之間息息相關，作為一種雙鏈DNA病毒，人乳頭瘤病毒能夠對皮膚、粘膜上皮細胞進行感染并誘發細胞增生，使其出現乳頭樣病變[1]，人乳頭瘤病毒有不同亞型，有研究認為，感染高危型人乳頭瘤病毒容易導致宮頸癌的發生，HPV16/18 亞型是最常見的高危型人乳頭瘤病毒[2]。本文就我院2014年9月到2015年9月間收治的宮頸癌患者81例作為研究對象，通過對其宮頸分泌物中的HPV16/18 DNA進行檢測，分析其與宮頸癌的相互關系。具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取我院2014年9月至2015年9月間收治的宮頸癌患者81例作為研究對象，所有患者均經病理診斷確診為宮頸鱗癌。患者的年齡在22歲～66歲之間，平均年齡為（36.1±3.1）歲。另取同期收治的宮頸炎癥患者198例作為對照組，患者的年齡在21歲到65歲之間，平均年齡為（37.2±3.5）歲。兩組患者在年齡比較上無統計學差異，P>0.05，具有可比性。

1.2 方法

分別采集兩組患者的宮頸口分泌物，將其置無菌試管內，并向其中生理鹽水1ml進行充分震蕩混合，然后后將液體移至離心管內，在12000r/min的速度下進行離心分離，10min后獲取底層沉淀物。然后，在沉淀物中加入50μL DNA提取液，充分混勻后，實施保溫處理，溫度為100℃，10min后再次對其實施離心分離，離心時間為5min，取5μL上清液，即為DNA樣品，用于實施PCR 反應。

將提取到的5μl DNA樣品加入到標記好的PCR反應管中，加入空白對照品及陽性對照品各5μl，礦物油1滴，在500r/min的速度下進行低速離心，然后再50℃、15min，95℃、10min，94℃、30s、42℃、90s，72℃、30s的條件下充分進行反應擴增，完成40個循環。然后給予雜交、孵育等一系列處理后，通過電腦自動計算對患者的檢測結果進行分析，每次實驗均要按照試劑盒提供的定量標準品繪制標準曲線，結果以基因拷貝數/mL（copies/mL）表示。

其中，HPV檢測試劑盒由中國凱普生物科技有限公司提供，檢測儀器采用ABI7300 型實時熒光定量PCR分析儀。

將實時熒光定量 PCR 檢測獲得的 HPV16/18 DNA檢測結果用對數法進行表示，分別比較宮頸癌患者和宮頸炎癥患者病毒載量的差異，并計算其陽性率。

1.3 統計學方法

本次實驗數據采用SPSS 12.0軟件進行統計學分析，計數資料以“n，%”表示，對比采用卡方檢驗，計量資料以“平均數±標準差”表示，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

分別對宮頸癌患者和宮頸炎癥患者的HPV16/18 DNA載量與陽性率進行比較，均有宮頸癌患者顯著高于宮頸炎癥患者的情況，比較有統計學差異（P<0.05）。見表1。

3 討論

調查數據顯示，宮頸癌是發病率僅次于乳腺癌的第二大的女性惡性腫瘤，是全球性的女性健康問題，尤其是在發展中國家，宮頸癌的發病率占到世界患者的75%～80%[3]，不僅以較高速度增長，而且有發病年齡年輕化的趨勢。我國人口基數大，每年新發宮頸癌患者的數量占世界新發患者總數的28%，已經對女性的健康、生命安全產生嚴重的威脅。同時，醫學研究結果也證實，宮頸癌的發生發展是一個緩慢的過程，在宮頸癌患病早期對其進行正確診斷和有效治療，絕大多數患者可以痊愈，五年生存可以達到90%[4]。而人乳頭瘤病毒作為已被肯定的腫瘤病毒，在宮頸癌的發生、發展中都發揮重要作用，樓微華等[5]的研究中對不同人乳頭瘤病毒高危亞型與宮頸病變發生的關系進行了分析，結果發現宮頸病變的發生由高危HPV亞型和低危HPV亞型共同參與，且隨著病情加重，高危HPV亞型所占比例不斷升高[6]，尤其是HPV 16亞型和HPV18亞型，在宮頸癌患者中的檢出率分別達到68.8%和6.2%，高危型HPV持續感染也被認為是發生癌變的必要條件。

由于HPV的致癌作用與HPV DNA的整合密切相關，HPV16、18兩種高危亞型的DNA均表現為整合形式，E2、E6、E7分別是發揮致癌作用的主要基因，其中，E2蛋白通過對病毒mRNA的轉錄、DNA的復制進行調節發揮致癌作用，同時對E6、E7的轉化作用進行調節[7]，而致癌基因E6、E7則可以同時發揮細胞直接轉化作用、宿主細胞DNA感染作用以及降低p53抑癌基因的作用，其在與細胞周期調控蛋白進行相互作用的過程中，對正常細胞周期調控造成干擾，引起癌細胞無限制生長引起癌變。

本文分別對病理診斷確診為宮頸癌和宮頸炎癥患者的HPV16/18型病毒感染的情況進行了分析，通過對兩組患者宮頸分泌物中的DNA的提取、擴增和檢測，獲得了其HPV16/18 DNA載量，發現宮頸癌患者的HPV16/18 DNA載量（7.34±4.62）顯著高于宮頸炎癥患者（4.51±3.03），而對其檢測陽性率進行比較，也有相同的規律，無論是HPV16型、HPV18型還是總的檢測陽性率都是如此（以HPV16型為主），這與于宗霞[8]的研究結果一致，提示持續的HPV16、HPV18型病毒感染是CIN轉變為宮頸癌的誘因，且高病毒載量在宮頸癌的發展中有重要作用，通過早期發現、早期治療，做好對高危人群的篩查，對于宮頸癌的預防治療都有重要意義。

參考文獻

[1] 董萍萍.婦科臨床病例中人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染特征的觀察[J].中國繼續醫學教育，2015，07（30）：1921.

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[3] 于云英，張建海，鄒存華，等.宮頸腺癌組織HPV16_18_E7與Cyclin D1/pRb及ER表達臨床意義分析[J].中華腫瘤防治雜志，2014，21（04）：256258.

[4] 木則帕爾·太來提，尼克孜·阿不都艾尼，瑪依努爾·尼牙孜，等.人乳頭狀瘤病毒16型、18型、單純皰疹病毒2型和巨細胞病毒感染與宮頸癌的關系[J].疾病預防控制通報，2013，28（01）：1017.

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[6] 苗小艷，孔繁斗，石敏，等.感染導致宮頸癌的分子機制研究[J].中國微生態學雜志，2015，27（10）：11521155.

[7] 符少月，焦慶昉，黃啟彬，等.帶有HPV16+e6/e7基因的DC疫苗抑制裸鼠宮頸癌生長的機制[J].中國老年醫學雜志，2013，32（10）：22992301.

[8] 于宗霞.例宮頸癌患者與HPV16/18感染的相關性分析[J].醫學動物防制，2013，29（05）：582585.