大鼠胰島細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定

蘇力擔(dān)卡扎·仇曼，林海，何鐵英，程坤，王松，郝曉文，陳啟龍，韓瑋

（新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 胰腺外科，新疆 烏魯木齊 830054）

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大鼠胰島細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定

蘇力擔(dān)卡扎·仇曼，林海，何鐵英，程坤，王松，郝曉文，陳啟龍，韓瑋

（新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 胰腺外科，新疆 烏魯木齊 830054）

目的 探討胰島細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定。方法 從實(shí)驗(yàn)室中挑選出30只成年雄性大鼠，將膠原酶注入大鼠的胰腺導(dǎo)管，聚蔗糖梯度離心法分離胰島細(xì)胞，并培養(yǎng)與鑒定胰島細(xì)胞。培養(yǎng)1周后用雙硫腙（DTZ）行胰島細(xì)胞鑒定。用丫啶橙（AO）、碘丙啶（PI）檢測(cè)胰島細(xì)胞活性。結(jié)果 經(jīng)過分離與純化，大鼠胰島細(xì)胞的獲得率較高且較穩(wěn)定；分離后的胰島細(xì)胞在適宜環(huán)境中生長，生長狀態(tài)較佳，在培養(yǎng)后的12～24 h可貼壁，在培養(yǎng)后4～5 d細(xì)胞生長狀態(tài)達(dá)到頂峰，細(xì)胞完好，且折光性能優(yōu)異。利用免疫組化法鑒定胰島細(xì)胞，分離的細(xì)胞SMA及PDGFR表達(dá)呈陽性，少數(shù)細(xì)胞vWF表達(dá)呈陽性。結(jié)論 我科此次分離純化大鼠胰島細(xì)胞的方法為逆行灌注膠原酶+原位消化+Ficoll液梯度分離法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯著，能在一定程度上獲取純度較高的大鼠胰島細(xì)胞。分離后的胰島細(xì)胞在培養(yǎng)4～5 d后達(dá)到最佳狀態(tài)，適用于作為實(shí)驗(yàn)室胰島細(xì)胞功能深入研究的實(shí)驗(yàn)材料。

胰島細(xì)胞；分離；培養(yǎng)；鑒定；大鼠

20世紀(jì)90年代末期以來，國內(nèi)及國外許多優(yōu)秀的醫(yī)學(xué)研究學(xué)者把實(shí)驗(yàn)室大鼠胰島細(xì)胞的分離與培養(yǎng)作為研究胰島細(xì)胞功能的一項(xiàng)重要科學(xué)課題［1-2］。該課題開展的……