糖原合成酶激酶-3β抑制劑TDZD-8抑制大鼠C6膠質(zhì)細胞瘤細胞體外增殖及誘導(dǎo)凋亡的作用和機制

湯漢心　林喜容　陳錦鏡

(廣東省汕頭市潮陽區(qū)大峰醫(yī)院神經(jīng)外科，廣東 汕頭 515154)

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·論著·

糖原合成酶激酶-3β抑制劑TDZD-8抑制大鼠C6膠質(zhì)細胞瘤細胞體外增殖及誘導(dǎo)凋亡的作用和機制

湯漢心*林喜容陳錦鏡

(廣東省汕頭市潮陽區(qū)大峰醫(yī)院神經(jīng)外科，廣東 汕頭 515154)

目的:探討糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)抑制劑TDZD-8(4-芐基-2-甲基-1，2，4-噻二唑烷-3，5-二酮)對大鼠C6膠質(zhì)細胞瘤細胞增殖的抑制作用及誘導(dǎo)凋亡的機制。方法：采用MTT方法檢測TDZD-8不同濃度(10、20、40和80 μmol/L)處理大鼠C6膠質(zhì)細胞瘤細胞6、12、24和48 h后對細胞增殖的影響；流式細胞術(shù)檢測其對細胞凋亡和細胞周期的作用，同時分析凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2和P53的表達變化。結(jié)果：TDZD-8濃度、時間依賴性的抑制大鼠C6膠質(zhì)細胞瘤細胞的增殖(P<0.05)。流式細胞術(shù)顯示TDZD-8濃度依賴誘導(dǎo)細胞凋亡，其中在20、40和80 μmol/L組有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。40和80 μmol/L TDZD-8處理C6細胞后，G0/G1期細胞數(shù)量明顯增多，分別升高到83%和90%(P<0.05)；而S期和G2/M期細胞數(shù)則顯著降低(P<0.05)。同時，40和80 μmol/L TDZD-8使Bax和P53表達顯著增加，而使Bcl-2表達降低(P均<0.05)。結(jié)論：GSK-3β抑制劑TDZD-8可以濃度依賴性抑制C6細胞增殖同時誘導(dǎo)其凋亡，并引起細胞周期阻滯，這可能與其對Bax、P53和Bcl-2的調(diào)控相關(guān)。

糖原合酶激酶3β；TDZD-8；膠質(zhì)細胞瘤；細胞增殖；細胞凋亡；細胞周期

糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase 3β，GSK-3β)是一種絲/蘇氨酸磷酸激酶，廣泛存在于各種細胞中，在細胞周期調(diào)控、基因轉(zhuǎn)錄、細胞凋亡及存活、細胞分化等過程發(fā)揮重要調(diào)控作用。GSK-3β參與調(diào)控Wnt，胰島素通路，NF-Κb，PI3K/Akt等多個信號通路；當其表達異常，將導(dǎo)致異常的生理功能，如胰島素抵抗、阿爾茨海默病、腫瘤、艾滋病等[1-2]。目前GSK-3β已成為廣受關(guān)注的新的藥物作用靶點。TDZD-8是GSK-3β的特異性小分子抑制物。最近研究報道，GSK-3β抑制劑TDZD-8在體內(nèi)外模型中抑制膠質(zhì)細胞瘤[3]，然而其機制還有待進一步研究。為此，本研究探索GSK-3β抑制劑TDZD-8對細胞增殖凋亡及細胞周期的影響，并進一步研究其可能參與的分子機制，為腫瘤藥物治療提供實驗依據(jù)。

1　材料和方法

1.1實驗材料