尿足細胞標志蛋白Podocalyxin、Mindin水平與糖尿病視網膜病變的關系

邵雪景　韋玉和　 馮小芬　趙志勇　印　永

?

尿足細胞標志蛋白Podocalyxin、Mindin水平與糖尿病視網膜病變的關系

邵雪景韋玉和*馮小芬趙志勇印永

目的：探討2型糖尿病(T2DM)患者尿足細胞標記蛋白Podocalyxin(PCX)、Mindin(MIN)與糖尿病視網膜病變(DR)的關系。方法：選擇90例T2DM患者(A組)，依據視網膜病變程度分為3個亞組：糖尿病無DR組(A1組，n=36)、非增生型DR組(A2組，n=29)和增生型DR組(A3組，n=25)；另選32名健康體檢者作為對照組(B組)。平行測定各組尿PCX、MIN、血肌酐(Scr)和尿肌酐(Ucr)，計算尿PCX相對值(PCR=尿PCX/Ucr)、尿MIN相對值(MCR=尿MIN/Ucr)和腎小球濾過率(eGFR)，比較各組各指標差異及其相關性。結果：各組PCR、MCR、Scr、eGFR差異均有統計學意義(P<0.01)。A組各亞組MCR、PCR、Scr顯著高于B組，eGFR 顯著低于B組(均P<0.05)；MCR、PCR從A1-A3組逐漸遞增(P<0.05)。PCR與MCR呈正相關(P<0.05)；PCR、MCR與DR分級呈正相關(P<0.05)，且均與Scr呈正相關(P<0.05)，與eGFR呈負相關(P<0.05)。結論：尿PCX、MIN水平升高與DR有關，可作為DM微血管病變觀察、治療的新靶標。

Podocalyxin；Mindin；糖尿病視網膜病變

糖尿病視網膜病變(DR)是糖尿病最常見的慢性并發癥，是代謝紊亂和內分泌系統與血液系統損害在視網膜上的反映，可導致視力下降，甚至失明，嚴重影響患者的生活質量。我國糖尿病人群中DR患病率為24.7%-34.5%。其中增殖期DR比例在3.3%-7.4%[1]。DR與糖尿病腎病(DN)均為糖尿病微血管病變，臨床表現往往具有同步性。已有研究表明尿足細胞標志蛋白Podocalyxin(PCX)、Mindin(MIN)可靈敏反映 DN早期病變[2,3]，但尚未見到早期反映DR的臨床報道。因此，本文檢測分析不同分級DR患者尿PCX、MIN水平變化及其與DN指標變化的一致性，為臨床早發現、早治療DR并兼顧DN提供新方法。

1　資料與方法

1.1對象和分組

2型糖尿病(T2DM)患者90例(A組)，男41例，女49例，年齡31-80歲。診斷均符合1999年WHO的DM診斷標準[4]。排除急、慢性腎炎、自身免疫性腎病、尿路感染等可能影響足細胞的疾病。DR的診斷及分級采用2003年國際臨床嚴重程度分級標準[5]。對所有入選患者按眼底檢查結果分為A1組，即T2DM無DR組，36例，男16例，女20例，年齡60.94±11.06歲；A2組，即非增生型糖尿病視網膜病變(NPDR)組，29例，男14例，女15例，年齡63.86±8.15歲；A3組，即增生型糖尿病視網膜病變(PDR)組，25例，男11例，女14例，年齡60.19±8.13歲。另選體檢合格的健康人群作為對照組(B組)，32例，男15例，女17例，年齡58.59±5.86歲。四組性別、年齡分布差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1收集基本資料：包括一般性資料如身高、體重、體質量指數(BMI=體重/身高2)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、糖尿病病程及實驗室資料如空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、甘油三酯/高密度脂蛋白膽固醇比值(TG/HDL-c)。

1.2.2主要檢測指標：各組受檢者空腹8h以上清晨采血(患者未服藥)5ml,置于普通促凝試管離心分離血清，同時留取晨尿20ml，離心取上清-80℃凍存批檢。血肌酐(Scr)及尿肌酐(Ucr)采用日本Olympus公司AU5421型全自動生化分析儀及配套試劑(批號AUZ2084、AUZ0750)測定，并通過腎臟病飲食改良(MDRD)公式[6]估算腎小球濾過率(eGFR，ml/min/1.73m2)[=175×Scr-1.234×年齡-0.179(女性×0.79)]。用ELISA測定尿PCX和尿MIN水平,試劑盒購于武漢優爾生科技有限公司(批號L141016360、L141022468)，參照試劑盒說明書操作，并計算兩者與Ucr比值，即尿PCX相對值(PCR，g/μmol)[=尿PCX(ng/ml)/Ucr(μmol/L) ×1 000]，尿MIN相對值(MCR，mg/μmol)[=尿MIN(pg/ml)/Ucr(μmol/L) ×1 000]。由于Ucr排出量晝夜相對恒定,受干擾因素較少,可校正尿量不同及個體差異，故本文以Ucr校正尿PCX及MCR使其更為客觀、準確。

1.3統計學處理

2　結　果

2.1各組基本資料比較

各組間BMI、SBP、DBP、FPG、HbA1c、TG/HDL-c差異均有統計學意義(P<0.01)。A1、A2、A3組上述指標水平高于B組(t均>-10.77,P均<0.01)，A3組病程明顯長于A1組和A2組(t=-3.68、-2.18,P<0.05)。A3組SBP明顯高于A1組和A2組(t=-3.98、-3.13,P<0.05)，其它指標差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2各組主要觀察指標比較

各組MCR、PCR、Scr、eGFR差異均有統計學意義(P<0.01)。A1、A2、A3組MCR、PCR、Scr顯著高于B組(t均>24.33,P<0.01)，eGFR 顯著低于B組(t>4.63、P<0.01)。A2組MCR、PCR明顯高A1組(t=13.58、8.70，P均<0.01),A3組MCR、PCR明顯高于A2組(t=32.05、-29.49、P均<0.01)。Scr在A2組與A1組差異無充計學意義(P>0.05)，但A3組明顯高于A1組和A2組，差異有統計學意義(t=4.89、-6.62,P<0.01)；eGFR在A組內呈遞減趨勢,但A2組較A1組下降無統計學意義(P>0.05)，A3組較A2組下降明顯，差異有統計學意義(t=-3.48，P<0.01)。見表2。

表1　各組基本資料比較±s)

注：與B組比較，1)P<0.01；與A1組比較，2)P<0.05；與A2組比較，3)P<0.05

表2　各組主要觀察指標比較±s)

注：與B組比較，1)P<0.01；與A1組比較，2)P<0.01;與A2組比較，3)P<0.01

2.3相關及回歸分析

(1)尿MCR與尿PCR水平變化呈正相關(r=0.461，P<0.05)；(2)尿MCR、PCR與DR分級呈正相關(r=0.465、0.480,P均<0.01)。以DR分級為因變量，以MCR和PCR測值為自變量，可得回歸方程：Y=1.598+0.00006585MCR+0.02PCR；(3)尿MCR與Scr水平變化呈正相關(r=0.402，P<0.05)，與eGFR水平變化呈負相關(r=-0.398，P<0.05)；尿PCR與Scr水平變化呈正相關(r=0.379，P<0.05)，與eGFR水平變化呈負相關(r=-0.383，P<0.05)。

3　討　論

DR與DN不僅有共同的發病機制，如高血糖、多元醇代謝異常、蛋白質非酶糖化、細胞因子和自由基作用、炎性介質和氧化應激以及遺傳背景等，而且大量研究發現DR與DN患者具有同步性，通過DN可預知DR的發生。熊曉清等[7]將330例T2DM患者以蛋白尿分組研究發現隨著DN的加重，DR的發病率也呈明顯增加趨勢；Yu等[8]也在595例中國北方老年DR的臨床特征研究中發現，DN為DR的危險因素，還有一項薈萃分析顯示，DR可用于診斷及篩查DN[9]。但也有研究認為，兩種病變表現出非同步性[10]，即有蛋白尿患者無視網膜病變，或有視網膜病變患者卻無蛋白尿,或蛋白尿量與視網膜病變程度不平行，這些現象的原因有待進一步研究論證。

PCX和MIN蛋白是足細胞標志蛋白，其早期診斷DN得到了大多數學者的認可。Hara等[2]研究發現，PCX為DM患者足細胞損傷的早期標志物。Ye等[12]的研究結果顯示PCX有助于DN的早期診斷。Murakoshi等[13]指出MIN是DN的有效生物學標志物。本課題組在此之前的臨床觀察也驗證了尿MIN在DN診斷中的重要價值[14]。但PCX與MIN對DR的診斷意義少有研究報道?；贒R與DN的形成機制及臨床表現有較高一致性的特征，本文探討了PCX、MIN與DR分級的相關性，以及與DN相關指標Scr、eGFR的關聯。

本文結果發現，尿PCX、MIN在DR患者水平顯著高于對照組及無DR的T2DM患者組，且隨分級升高而遞增，即反映DR的嚴重程度隨著PCX、MIN水平的升高而加重。提示PCX、MIN可作為DR早期篩查及輔助分級和臨床診斷指標。與此同時，我們觀察到DR患者Scr升高和eGFR降低(DN表現)，且eGFR降低與PCX、MIN升高呈負相關，即DR患者同時存在DN，兩者保持了較好一致性。提示臨床分析糖尿病微血管并發癥時，要充分考慮DN與DR的緊密關聯[15]，兼顧兩者的治療和預后，使患者獲得事半功倍的收益。

綜上，尿足細胞標志蛋白PCX、MIN水平升高可反映DR及其進展，是DR、DN危險因素，也是早期篩查、診斷糖尿病微血管并發癥(DR、DN)的有效指標和臨床治療新靶標。今后還需加強PCX、MIN與傳統危險因素(表1)的關聯度分析，使之能更好地應用于臨床。

?

本文第一作者簡介：

邵雪景(1984-)，女，漢族，醫學碩士，主治醫師，主要從事糖尿病及其并發癥研究

1中華醫學會眼科學分會.我國糖尿病視網膜病變臨床診療指南(2014年)[J].中華眼科雜志，2014,50(11):851-865.

2Hara M,Yamagata K,Tomino Y,et al.Urinary podocalyxin is an early marker for podocyte injury in patients with diabetes:establishment of a highly sensitive ELISA to detect urinary podocalyxin[J].Diabetologia，2012,55(11):2 913-2 919.

3廖鈺，夏寧.Mindin：糖尿病腎病足細胞損傷的新型標記物[J].國際內分泌代謝雜志，2012,32(1):18-20.

4中華醫學會糖尿病學分會.中國2型糖尿病防治指南(2013年版)[J].中華糖尿病雜志，2014,6(7)：447-498.

5Wilkinson CP,Ferris FL,Klein RE,et al.Proposed international clinical diabetic retinopathy and diabetic macular edema disease severity scales[J].Ophthalmology,2003,110(9):1 677-1 682.

6Ma YC,Zuo L,Chen JH,et al.Modified glomerular filtration rate estimating equation for Chinese patients with chronic kidney disease[J] J Am Soc Nephrol ,2006,17(10):2 937-2 944.

7熊曉清，李萬根.2型糖尿病腎病與糖尿病視網膜病變的相關性與平行性研究[J].臨床醫學工程，2010，17(9)：34-35.

8Yu X,Song S,Yang F，et al.Clinical features of diabetes retinopathy in elderly patients with type 2 diabetes in Northern Chinese[J].Nigerian Journal of Clinical Practice,2015,18(2):183-187.

9He F,Xia X，Wu XF,et al.Diabetic retinopathy in predicting diabetic nephropathy in patients with type 2 diabetes and renal disease:a meta-analysis[J].Diabetologia,2013,56(3):457-466.

10彭艷,徐勇.糖尿病腎病與糖尿病視網膜病變關系研究進展[J].醫學綜述，2008,14(20)：3 131-3 134.

11Reidy K,Kang HM,Hostetter T,et al.Molecular mechanisms of diabetic kidney disease[J].J Clin Invest,2014,124(6):2 333-2 340.

12Ye H,Bai X,Gao H,et al.Urinary podocalyxin positive-element occurs in the early stage of diabetic nephropathy and is correlated with a clinical diagnosis of diabetic nephropathy[J].J Diabetes Complications,2014,28(1):96-100.

13Murakoshi M,Tanimoto M,Gohda T,et al.Mindin:a novel marker for podocyte injury in diabetic nephropathy [J].Nephrol Dial Transplant,2011,26(7):2 153-2 160.

14邵雪景,韋玉和,馮小芬,等.2型糖尿病腎病患者尿液Mindin的變化及意義[J].江蘇醫藥，2015,41(8):904-907.

15霍瑞婷,朱瀟瀟,關小宏.從甲襞微循環探討糖尿病視網膜病變與糖尿病腎病的對應關系[J].微循環學雜志，2016,26(1):30-33,37.

The Relationship of Urinary Podocyte Marker Protein Podocalyxin and Mindin with Diabetic Retinopathy

SHAO Xue-jing,WEI Yu-he*,FENG Xiao-fen,ZHAO Zhi-yong,YIN Yong

Department of Endocrinology,Affiliated Wujin Hospital,Jiangsu University,Changzhou 213000,China；*Corresponding author

Objective:To investigate the relationship of urinary podocyte marker protein podocalyxin(PCX) and mindin(MIN) with diabetic retinopathy(DR).Method:To choice 90 cases of patients with type 2 diabetes as the case group(group A),another 32 healthy volunteers as control group(group B).On the basis of the presence of retinopathy ,group A was assigned into three subgroups,without diabetic retinopathy(A1,n=36),non-proliferative diabetic retinopathy(A2,n=29) and diabetic retinopathy(A3,n=25).We measured the levels of urinary PCX,MIN,urine creatinine(Ucr) in parallel,calculated the relative value of PCX(PCR=PCX/Ucr),MIN relative value (MCR=MIN/Ucr),glomerular filtration rate(eGFR),and compared the differences of each index and their correlation.Results:The differences of PCR,MCR,serum creatinine (Scr) and eGFR were statistically significant (P<0.05) in each group.The level of MCR,PCR and Scr in each sub gruoup of A was significantly higher than that of B group,eGFR was significantly lower than that of B group (P<0.05).PCR,MCR from the A1-A3 group gradually increased (P<0.05).PCR was positively correlated with MCR (P<0.05),PCR,MCR were positively correlated with DR classification (P<0.05),and were positively correlated with Scr (P<0.05),and negatively correlated with eGFR (P<0.05).Conclusion:Urinary PCX,MIN levels were associated with DR,which can be a new target for the treatment of DM microvascular lesions.

Podocalyxin; Mindin; Diabetic retinopathy

單位]江蘇省常州市武進人民醫院內分泌科，常州 213000；*

，E-mail:877957735@qq.com.

本文2016-05-09收到，2016-07-06修回

R587.2[文獻標識碼]A

1005-1740(2016)03-0054-04