TB-IGRA在不同年齡兒童結核病診斷的敏感性和特異性分析

項薔薇　李海燕　林　立　羅運春　張海鄰　李昌崇

TB-IGRA在不同年齡兒童結核病診斷的敏感性和特異性分析

項薔薇李海燕林立羅運春張海鄰李昌崇

目的 探討γ-干擾素釋放試驗（TB-IGRA）診斷技術在不同年齡兒童結核病診斷的敏感性和特異性。方法 對2014年1月至2015年3月25例結核病感染患兒及39例非結核患兒進行TB-IGRA、純蛋白衍生物（PPD）試驗、結核抗體檢測，并作痰涂片分析。統計學分析比較不同方法的檢測結果，并作工作特征曲線（ROC）分析。結果 TB-IGRA診斷兒童結核病的敏感度88%，特異度為94.8%。PPD取硬結＞10mm為陽性判斷標準時其敏感度為76%，特異度為76.9%。與PPD試驗比較，敏感度和特異度均高于PPD試驗。對于＜6歲組，TB-IGRA和PPD敏感度一樣，敏感度均為76.9%，TB-IGRA特異度為95.2%，PPD特異度為89.5%。但對于7～14歲組兒童，IGRA的敏感度為100%，特異度為94.4%。而PPD的敏感度和特異度為83.3%，特異度為80%。TB-IGRA的曲線下面積為0.925，PPD曲線下面積為0.833，提示與PPD比較，TBIGRA對檢測兒童結核的診斷價值更佳。結論 TB-IGRA試驗具有相對較高的敏感度和特異度，是診斷兒童結核的快速敏感方法。

結核病 診斷 兒童 干擾素r釋放試驗 PPD試驗

兒童結核病在發展中國家占15%～20% ，在發達國家占3%～6%， 是引起發展中國家兒童死亡的重要原因之一［1］。體外γ-干擾素釋放試驗（IGRA） ，是通過檢測機體的細胞免疫功能， 來判斷是否存在結核分枝桿菌感染。目前認為，IGRA由于使用的抗原為結核分枝桿菌特異性蛋白而不受卡介苗接種及機體免疫狀態的影響［2］，因而在篩查潛伏結核感染兒童中具有較高的特異度［3］。作者于2014年1月至2015年3月對25例結核病患兒進行檢測，并選用39例非結核感染患兒作為對照，探討該方法對兒童結核病及不同年齡兒童結核的臨床診斷價值，現報道如下。

1　臨床資料

1.1一般資料 肺結核病例來源于本院兒童呼吸科病房確診的肺結核患兒。診斷標準［4］：對照組為在住院呼吸系統疾病兒童，排除結核菌感染、免疫性疾病、內分泌疾病、 HIV感染等疾病。病例及對照組按年齡分為兩組，分別為0～6歲組，7～14歲組。排除標準：符合以下任意一項者即排除：（1）進行皮試和T-SPOT測定前使用糖皮質激素及其他免疫抑制劑的患兒。（2）本次入院前已接受抗結核治療。共納入結核病例25例，對照組39例。其中男36例，女28例。0～6歲組32例，7～14歲組32例。

2　結果

2.1TB-IGRA和PPD檢測結果 見表1。

表1　TB-IGRA和PPD檢測結果［n（%）］

2.2受試者工作特征曲線（ROC）分析 TB-IGRA的曲線下面積為0.925，PPD曲線下面積為0.83，提示與PPD比較，TB-IGRA對檢測兒童結核的診斷價值更佳。2.3 不同年齡兒童TB-IGRA和PPD敏感度、特異度比較。見表2。

表2　不同年齡兒童TB-IGRA和PPD敏感度、特異度比較［n（%）］

2.4TB-IGRA和其他檢測方法結果比較 見表3。

表3　TB-IGRA和其他檢測方法結果比較

3　討論

結核病是導致發展中國家兒童發病和死亡的重要原因。加強兒童結核病和潛伏結核感染的診治，是控制結核病傳播的重要手段。然而，兒童結核病診斷存在著較大困難。兒童結核病癥狀不典型、病原學檢查陽性率較低等因素，均嚴重影響臨床醫師的診斷。本組 25例痰涂片檢驗僅1例陽性，陽性率僅4%，因此，痰涂片檢驗并非兒童結核診斷的首選。而結核菌培養法周期較長、要求比較高，且需在一定條件的實驗室進行，限制了其在臨床的應用。以結核抗體檢測為代表的免疫學診斷方法在臨床被廣泛應用，但由于結核分枝桿菌是一種胞內寄生菌，機體的抗結核免疫主要依賴于特異性的細胞免疫，因此結核抗體檢測的特異性和敏感度均會受到明顯影響，本資料中結核抗體檢測陽性率僅8.69%。

本資料檢測結果顯示TB-IGRA 診斷兒童結核病的敏感度為88%，特異性為 94.8%，與既往采用ELISPOT 法研究結果類似［5］，提示此兩種方法檢測結果一致性高，變異性小，對兒童結核病早期診斷有較高的應用價值。

本資料發現，雖然TB-IGRA試驗的敏感度略高于 PPD 試驗，但差異無統計學意義（P＞0.05）。但TBIGRA試驗的特異性明顯優于PPD，可能與PPD 為多種蛋白成分的混合物，每一批次試劑不完全相同，或與入選患兒不同，每個人對PPD反應有所差異有關。另外，TB-IGRA的ROC曲線下面積為0.925，PPD的ROC曲線下面積為0.833，提示與PPD比較，TBIGRA對檢測兒童結核的診斷價值較高。

本文將入組患兒分成0～6歲年齡組和7～14歲年齡組，分別進行TB-IGRA和PPD敏感度和特異度分析，發現＜6歲組，TB-IGRA和PPD敏感度相同，敏感度均為76.9%，TB-IGRA特異度為94.7%，PPD特異度為78.9%。但7～14歲組兒童，IGRA的敏感度為100%，特異度為95%。而PPD的敏感度和特異度為83.3%，特異度為75%。這是因為TB-IGRA的結果依賴于機體內效應性免疫細胞，尤其是CD4+T 淋巴細胞的應答。兒童的T淋巴細胞組分隨年齡的不同存在差異，越小的兒童越少，故對試驗結果可能產生一定影響。

1 Marais BJ，Gie RP，Schaaf HS，et al. Children pulmonary tuberculosis：old wisdom and new challenges. Am J Respir Crit Care Med， 2006，173（3）：1078～1090.

2 Kim SH，Song KH，Choi SJ，et al. Diagnostic usefulness of a T-cell-based assay for extrapulmonary tuberculosis in immunocompro mised patients. AmJMed，2009，122（2）：189～195.

3 Detjen AK，Keil T，Roll S，et al.Interferon-r release assay improve the diagnosis of tuberculosis and nontuberculous mycobacterial disease in children in a country with a low incidence of tuberculosis.ClinInfect Dis，2007，45（3）：322～328.

4 中華醫學會兒科學分會呼吸學組.中華兒科雜志編輯部.兒童肺結核的臨床診斷標準和治療方案（試行）.中華兒科雜志，2006，44（4）：249～251.

5 Lalvani A，Pareek M. Interferon gamma release assays：principles and practice. Enferm Infecc Microbiol Clin，2010，28（4）：245～252.

浙江省溫州市科技局基金項目（y20130237）；衛生部國家臨床重點專科（兒科呼吸）開放課題（20130215）

325000 溫州醫科大學附屬第二醫院、育英兒童醫院

1.2方法 （1）采集患兒病史，進行胸部X線和/或胸部CT、純蛋白衍生物（PPD）、結核抗體（ELISA法）、TB-IGRA及痰涂片查結核桿菌等檢測。（2）TB-IGRA檢測：肝素抗凝管采集靜脈血 5 ml，使用北京萬泰公司生產的試劑盒檢測；TB-AB 檢測為血清標本，使用南京大淵生物技術工程有限責任公司生產的試劑盒。檢測方法與結果判讀嚴格按照試劑盒說明書進行。結果≥14提示陽性，＜14為陰性。（3）PPD試驗： 用0.1 ml（5U）的結核菌素PPD于左前臂掌側前 1 /3 皮膚無瘢痕部位進行皮內注射，以出現7～8 mm大小橘皮樣圓形皮丘為宜。72h 后測量硬結橫縱直徑（mm），取平均值作為PPD皮試結果。以硬結平均直徑＜5mm或無反應為陰性， 5～9mm為+，10～19mm為++，＞20mm或伴有水皰、硬結為+++。

1.3統計學方法 采用SPSS21.0統計軟件。計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。對TBIGRA和PPD結果作ROC曲線，比較其敏感度和特異度。