不同產地及不同采收期五味子中木脂素含量比較

葛會奇　徐月

[摘要]目的 通過測定不同產地及不同采收期五味子中木脂素的含量，為明確五味子的適宜產地及適宜采收時間提供依據。方法 采用Ecosil Cts-AQ色譜柱（250ram×4.6mm，5μm），乙腈-水為流動相，進行梯度洗脫，流速1mL/min，檢測波長為217nm。結果 不同產地五味子中木脂素含量差異明顯，遼寧東部山區（丹東、本溪）所產五味子中混合木脂素含量較高，含量在0.9658%～1.1232%之間；不同采收期五味子中木脂素含量差異不大。結論遼寧東部山區（丹東、本溪）適合五味子栽培，九月份是五味子的適宜采收期。

[關鍵詞]五味子；HPLC；木脂素；不同產地；不同采收期

[中圖分類號]R917 [文獻標識碼]A [文章編號]2095-0616（2016）11-38-04

五味子是木蘭科植物五味子Sehisandrachinensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果實。五味子是遼寧省的主產藥材，有遼五味之稱。如果通過研究，能夠科學規范引導五味子種植，確定五味子的適宜采收期、適宜種植區域將大大提高五味子質量，將為遼寧藥都（本溪）注入新的活力。

五味子中含有木脂素、揮發油、多糖及有機酸等成分，我們對不同產地、不同采收期的五味子進行全成分研究，以期從化學成分角度為五味子的適宜采收期、適宜種植區域的確定提供依據。木脂素類成分為五味子中主要活性成分，本文是對不同產地、不同采收期五味子中木脂素含量的比較研究。

1儀器與試藥

1.1實驗儀器

Waters高效液相色譜儀（Waters e2695 pump、Waters2998檢測器，Empower3數字處理軟件）；KQ-250DB型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；電熱恒溫水浴鍋（北京市永光明醫療器械有限公司）；AE240型十萬分之一分析天平（瑞士METTLER）；FA1004B電子天平（上海精密科學儀器有限公司）。

1.2實驗藥材

五味子由遼寧中醫藥大學王冰教授鑒定。

1.3實驗試劑

五味子醇甲（1106-101018），五味子醇乙（1327-091027），五味子酯甲（1330-110116），五味子甲素（0764-200006），五味子乙素（110765-200205）均購自中國藥品生物制品檢定研究院；五味子丙素（A0593）購于成都曼思特生物科技有限公司。甲醇、乙腈為色譜純，娃哈哈純凈水。

2方法與結果

2.1色譜條件

Ecosil C₁₈色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈（A）-水（B），梯度洗脫（0-20min，55%A；20～25min，55%～75%A：25～40min，75%～65%A：40～45min，65%～55%A）；檢測波長217nm；流速1mL/min；進樣量10μL；柱溫30℃。色譜圖見圖1。

2.2對照品溶液制備

精密稱取五味子醇甲、醇乙、甲素、酯甲、乙素、丙素對照品適量，置5mL容量瓶中，配制成濃度分別為0.076、0.046、0.01552、0.03528、0.05504、0.02272mg/mL的五味子混合對照品溶液，4℃冰箱中保存，備用。

2.3供試品溶液制備

取五味子粉末（過60目篩）約0.25g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20mL，密塞，稱重，超聲30min，用甲醇補足失重，搖勻，濾過，取續濾液，經0.45μm微孔濾膜濾過，即得。

2.4線性關系考察

精密吸取上述混合對照品，分別進樣1、5、10、15、20μL，依上述色譜條件進行測定，以進樣量（μg）為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程見表1。

2.5精密度試驗

精密吸取混合木脂素對照品溶液10μL，連續進樣6次，測定峰面積，五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素、丙素的RSD分別為0.64%、1.48%、0.55%、0.90%、0.90%、1.39%，均小于3%，表明儀器性能良好。

2.6穩定性試驗

精密吸取同一五味子供試品溶液10μL，分別在0、2、4、6、8、10h進樣測定，結果五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素、丙素6種木脂素峰面積的RSD分別為0.51%、1.50%、2.14%、2.52%、1.32%、1.62%，表明供試品在10h內保持穩定。

2.7重復性試驗

精密稱取同一五味子粉末6份，各0.25g，按“2.3”項下制備供試品溶液，依本實驗方法測定并計算含量，結果五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素、丙素6種木脂素的含量的RSD分別為1.22%、2.03%、2.81%、1.56%、2.15%、2.34%，表明方法重復性良好。

2.8加樣回收率試驗

取已知含量的五味子粉末0.12g，精密稱定，共6份。根據樣品中五味子醇甲的含量，加入混合對照品1.7mL，按“2.3”項下方法操作，并按“2.1”項下色譜條件測定，計算五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素的加樣回收率平均值分別為95.13%、97.11%、97.28%、97.53%、98.06%、98.25%，RSD分別為1.54%、0.90%、1.22%、1.40%、1.07%、1.09%。

2.9樣品測定

取不同產地及采收期五味子樣品，粉碎，過60目篩，分別按照“2.3”項下方法制備供試品溶液，分別依相應的色譜條件進行HPLC測定，記錄峰面積，計算含量，結果見表2～3。

由表2可知，混合木脂素含量以遼寧東部地區丹東、本溪含量較高，在0.9658%～1.1232%之間，其他地區在0.8348%～0.9343%之間。結果表明，遼寧東部地區丹東、本溪產地的五味子混合木脂素含量較高。

由表3可知，本溪產地不同采收期的五味子中混合木脂素的含量未見差異，含量均在1.11%左右，可見9月份五味子中木脂素含量變化不明顯，9月份均適宜采收。

3討論

五味子木脂素類成分具有抗炎、抗氧化、抗病毒及抑制潰瘍等藥理作用，有文獻報道，木脂素成分具有較強的保肝作用。現代藥理學研究表明，五味子中木脂素類成分主要用于治療消化系統、中樞神經系統、心血管系統、泌尿系統等疾病。由此，五味子被廣泛用于中醫臨床方劑和中藥制劑中，并已開發研制聯苯雙酯、雙環醇和五仁醇膠囊等保肝降酶藥物。本實驗對五味子中的代表性有效成分木脂素類成分進行研究，對確定五味子的適宜種植區域及適宜采收期是有明顯意義的。

五味子中含有多種木脂素，其中五味子醇甲是2015版中國藥典含量測定的指標性成分。本實驗對多種五味子木脂素同時進行含量測定，包括五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素、丙素等，來探討不同產地及不同采收期對五味子混合木脂素的影響。

研究表明，遼寧東部（丹東、本溪）所產五味子中木脂素含量較高。遼寧東部多為山區，多年來一直對五味子有栽培。本研究結果從有效成分含量的角度驗證了遼寧東部山區適宜五味子的種植。五味子一般成熟期在九月份內，研究表明在成熟期內木脂素含量變化不十分明顯，如果以木脂素含量為依據，可確定九月份均適宜采收。

五味子中尚含有揮發油、多糖及有機酸等成分，我們將對不同產地、不同采收期的五味子進行全成分研究，以期從化學成分角度為五味子的適宜采收期、適宜種植區域的確定提供依據。