不同年齡活動性肺結核患者T細胞亞群分析及動態變化

劉　會，張曉光，黃新莉，劉　銳，安賀娟，王　勇

(1.河北省胸科醫院結核內科,河北 石家莊 050041;2.河北省胸科醫院腎內科,河北 石家莊 050041，3.河北醫科大學基礎醫學院病理與病理生理學教研室,河北 石家莊 050017)

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·論著·

不同年齡活動性肺結核患者T細胞亞群分析及動態變化

劉會1，張曉光2*，黃新莉3，劉銳1，安賀娟1，王勇1

(1.河北省胸科醫院結核內科,河北 石家莊 050041;2.河北省胸科醫院腎內科,河北 石家莊 050041，3.河北醫科大學基礎醫學院病理與病理生理學教研室,河北 石家莊 050017)

目的觀察不同年齡活動性肺結核患者治療過程的臨床表現以及T細胞亞群的動態改變，探討老年肺結核患者T細胞免疫狀態與疾病恢復的關系。方法選擇初治菌陽肺結核患者80例，根據年齡分為A組(年齡<60歲，40例)、B組(年齡≥60歲，40例)。A、B組均完成2HRZE/4HR抗結核治療。分別于明確診斷后治療前(T0期)、治療1個月(T1期)、治療6個月(T6期)3個不同時點，觀察患者臨床癥狀、痰涂片轉陰情況、胸部X線及T細胞亞群變化，比較2組在各治療階段免疫狀態的動態變化。結果T1期時A組 臨床療效、痰抗酸染色轉陰率及影像學好轉率均高于B組，而T6期2組差異無統計學意義。T細胞：組間、時點間、組間·時點間交互作用差異均有統計學意義(P<0.05)。Th細胞：組間、時點間差異有統計學意義(P<0.05)，組間·時點間交互作用差異無統計學意義(P>0.05)。Ts細胞：組間差異有統計學意義(P<0.05)，時點間、組間·時點間交互作用差異無統計學意義(P>0.05)。Th/Ts比值：組間差異有統計學意義(P<0.05)，時點間、組間·時點間交互作用差異無統計學意義(P>0.05)。結論老年繼發性肺結核患者T細胞免疫功能較中青年患者低，且直接影響老年肺結核患者治療效果以及治愈時間。

結核，肺；T細胞亞群；細胞免疫；放射攝影術

10.3969/j.issn.1007-3205.2016.08.005

第5次全國流行病學調查顯示，結核病的發病率隨增齡呈上升趨勢，55歲以后明顯增多，75歲達到高峰，且高峰每10年后移5歲[1]。WHO報告顯示我國是全球第3大結核病高負擔國家之一[2]。老年人作為結核高危人群對結核病流行病學影響很大[3]。機體免疫系統在結核病的發病、發展及轉歸方面扮演重要的角色，直接影響患者預后。結核病免疫主要是T淋巴細胞介導的細胞免疫應答，細胞免疫對結核菌感染的發病和演變具有決定性的意義。結核病的發生與機體細胞免疫功能失衡有關。T淋巴細胞通過多種功能效應在感染性疾病中起著抵抗侵入病原菌的重要作用。T淋巴細胞可分為CD4+和CD8+兩大亞群。T細胞亞群比例是決定細胞免疫強弱的主要因素，可以介導調節炎癥反應平衡[4]。本研究動態觀察不同年齡肺結核患者T細胞亞群的變化，旨在了解老年肺結核患者T細胞免疫狀態及動態改變，以及疾病過程和恢復程度與免疫學特點的關系。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2015年7月—2016年2月在河北省胸科醫院結核科住院、經臨床檢查符合活動性肺結核診斷標準、痰涂片抗酸染色陽性，最終診斷為繼發性肺結核的患者80例。根據年齡分為2組：年齡<60歲為A組(40例)，男性21例，女性19例，年齡13～60歲，平均(27.45±11.68)歲；②年齡≥60歲為B組(40例)，男性22例，女性18例，年齡60～81，平均(69.40±5.66)歲。

1.2入選及排除標準入選標準：按照中華醫學會結核病分科學會制定的結核病臨床診療指南[5]，符合繼發性肺結核診斷標準以及痰涂片抗酸染色陽性。排除標準：合并免疫系統疾病或者合并其他系統感染的人群；應用免疫抑制劑或免疫調節劑患者；院外抗結核治療患者；治療過程中出現嚴重不良反應及依從性差患者。

1.3方法2組均采用2HRZE/4HR抗結核治療方案，療程共6個月，采用全程監督化療的管理模式。其間隨時觀察、隨診，并記錄病情變化及藥物的不良反應。以確保每位患者順利完成全程規范化療。

1.4觀察指標①臨床標準：觀察患者咳嗽、咳痰、發熱、乏力、盜汗、咯血等臨床癥狀變化情況，以上癥狀逐漸好轉直至消失為有效，臨床有效率=有效例數/總例數×100%。②細菌學檢測：患者留取3份痰標本(清晨痰、夜間痰及隨機痰)送檢，以連續3次痰涂片抗酸染色陰性為涂陰。③影像學檢查：所有患者明確診斷前或治療前(T0期)、治療1個月(T1期)、治療6個月(T6期)均行胸部X線檢查，X線顯示病灶吸收≥1/2原病灶，定為A級；病灶吸收<1/2原病灶，定為B級；病灶無明顯變化，定為C級；病灶擴大或播散，定為D級。治療有效率=(A級+B級)例數/總例數×100%。④T淋巴細胞亞群分析：2組T0期采血均在應用治療藥物之前進行，T1、T6期采血于抗結核治療足1個月、6個月后進行。應用流式細胞儀檢測CD3、CD4、CD8，進行T細胞亞群分析(以CD3+百分比記數T細胞，以CD3+CD4+CD8-百分比記數Th細胞，以CD3+CD4-CD8+百分比記數Ts細胞，CD4+/CD8+表示Th/Ts)。

1.5統計學方法應用SPSS 19.0統計軟件進行處理數據。計量資料比較采用重復測量的方差分析；計數資料比較采用χ2檢驗；等級資料比較采用秩和檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　　果

2.1臨床療效比較觀察患者咳嗽、咳痰、發熱、乏力、盜汗、咯血等臨床癥狀變化情況，以上癥狀逐漸好轉直至消失為有效。以連續3次痰涂片抗酸染色陰性為涂陰，認為痰菌轉陰。A組T1期臨床有效率、痰菌轉陰率均高于B組，差異有統計學意義(P<0.05)；2組T6期有效率、痰菌轉陰率差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　2組臨床療效、痰菌轉陰比較

2.2影像學觀察T1時，2組X線檢查A、B、C、D級分布差異有統計學意義(P<0.05),有效率差異有統計學意義(P<0.05)；T6期2組A、B、C、D分布和有效率差異均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2　2組T1、T6期影像學表現比較

2.3T細胞檢測①T細胞：2組均呈先升高然后保持平衡趨勢，但A組升高幅度大，2組組間、時點間、組間·時點間交互作用差異均有統計學意義(P<0.05)。②Th細胞：A組先升高再下降，B組逐漸升高，2組組間、時點間差異有統計學意義(P<0.05)，組間·時點間交互作用差異無統計學意義(P>0.05)。③Ts細胞：A組先升高后降低，B組緩慢下降，2組組間差異有統計學意義(P<0.05)，時點間、組間·時點間交互作用差異無統計學意義(P>0.05)。④Th/Ts比值：A組先升高后下降，B組逐斬升高，2組組間差異有統計學意義(P<0.05)，時點間、組間·時點間交互作用差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表32組3個時期T細胞、Th細胞、Ts細胞、Th/Ts細胞水平比較

Table 3The comparision of level of T cell, Th cells, Ts cells and Th/Ts cells in three periods between two groups

組別 T細胞(%)T0T1T6Th細胞(%)T0T1T6A組 60.49±4.1070.14±5.1369.21±5.3741.90±5.1248.93±6.7045.25±6.71B組 54.50±6.4459.54±7.0060.52±4.1632.75±7.5736.77±4.8437.37±5.63組間 F=142.195 P=0.000F=149.181 P=0.000時點間 F=48.170 P=0.000F=17.042 P=0.000組間·時點間F=3.576 P=0.030F=2.528 P=0.082組別 Ts(%)T0T1T6Th/TsT0T1T6A組 26.33±4.5429.37±6.9027.63±3.761.63±0.321.77±0.521.67±0.33B組 29.74±8.5130.79±7.6128.46±6.141.19±0.461.25±0.301.38±0.38組間 F=5.101 P=0.025F=67.655 P=0.000時點間 F=2.664 P=0.072F=1.841 P=0.161組間·時點間F=0.873 P=0.419F=1.745 P=0.177

3　討　　論

HIV感染的蔓延、移民問題以及多發耐藥菌株的蔓延等使結核分枝桿菌的感染在全世界范圍內尤其是亞非國家的感染仍居高不下[6]。全國第5次結核病流行病學抽樣調查發現肺結核患者中老年人口(>60歲)所占比例為48.8%[1]，提示老年肺結核患病率較中青年明顯升高。有研究顯示，老年肺結核組強化期化療后的痰菌涂片轉陰率為 77%，低于中青年對照組85%[7]。老年肺結核傳染性強，耐藥率高，癥狀不典型且病程長，加之化療藥物易引起多種不良反應，給老年肺結核防治工作帶來了極大困難[8]，如何更好地控制老年肺結核對結核病的控制有重要意義[9]。本研究分析不同年齡活動性肺結核患者T細胞亞群，了解其免疫狀態，比較臨床和影像學療效，希望從細胞免疫方面為老齡肺結核人群的預后判斷及治療提供更廣闊的思路。

在機體的免疫系統中，T淋巴細胞可以通過多種功能效應，在感染性疾病中抵抗侵入病原菌，保護機體健康。人體對于結核菌的免疫防護主要是由T淋巴細胞介導的細胞免疫完成[10]。研究證明，多種呼吸道感染性疾病如支原體肺炎、肺結核等的發生發展與機體免疫功能有關[11]。而結核病的發生與人體細胞免疫功能失衡息息相關[12-13]。多種細胞因子通過多種途徑，調節T淋巴細胞活化，誘使單核吞噬細胞到炎癥部位聚集，從而加強了機體對結核桿菌的免疫功能[14]。有研究認為，Th/Ts比值能反映機體的細胞免疫狀態，Th/Ts降低常提示細胞免疫功能低下[15]。

本研究通過檢測CD3+、CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+以及CD4+/CD8+來觀察不同年齡尤其是老年肺結核患者體內T細胞、Th細胞、Ts細胞、Th/Ts比值的動態變化，以此觀察老年患者T細胞免疫狀態以及其與結核病發展與轉歸的關系。結果顯示，治療前(T0期，即繼發性肺結核的活動期)，患者被大量結核菌侵襲，大多存在免疫功能低下以及免疫功能失衡情況，出現Ts細胞的比例上升，Th/Ts的下降，尤以老年人表現為著，而經過初期的強化治療，中青年患者對于治療的反應及疾病恢復情況比起老年患者更為理想，表明中青年患者T細胞免疫功能優于老年患者；隨著治療的進行，時間的延長，免疫低下及免疫功能失衡情況逐漸恢復，2組間差異逐漸縮小，但老年人機體本身的免疫功能偏低，恢復慢于中青年人，甚至治愈后，其T細胞免疫水平仍低于中青年人。相對于老年患者的臨床表現恢復情況來看，細胞免疫功能低下是在其疾病控制方面起負面效應的因素。

本研究結果顯示，老年繼發性肺結核患者的T細胞免疫功能較中青年患者低，且直接影響老年肺結核患者的治療效果及治愈時間，在治療過程中恢復較慢。因此，在對老年肺結核的臨床治療上，除了對于控制結核菌方面的治療外，更應該關注老年肺結核免疫功能調節的治療，如給予老年患者增加提高細胞免疫功能的藥物，可能對其疾病的恢復及控制有一定的幫助。

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(本文編輯：劉斯靜)

Dynamic observation and analysis of T lymphocyte subpopulations in patients with active pulmonary tuberculosis in different age groups

LIU Hui1， ZHANG Xiao-guang2*， HUANG Xin-li3， LIU Rui1， AN He-juan1， WANG Yong1

(1. Department of Tuberculosis， Chest Hospital of Hebei Province， Shijiazhuang 050041，China；2.Department of Nephrology， Chest Hospital of Hebei Province， Shijiazhuang 050041， China；3.Department of Pathophysiology， the School of Basic Medical Science, Hebei Medical Univenity， Shijiazhuang 050017， China)

ObjectiveThrough the dynamic observation of clinical manifestation and T cell subsets in patients with active pulmonary tuberculosis in differet ages and in different stages of the treatment, to investigate the relationship between the disease variety and T cell-mediated immunity in elderly patients. MethodsEighty patients with secondary pulmonary tuberculosis were divided into group A(younger than 60 years old,40 cases) and group B(older than 60 years old, 40 cases). All patients were received 2HRZE/4HR anti-tuberculosis treatment.In three different time points[before the treatmen(T0)/1 months after the treatment(T1)/6 months after the treatment(T6)], the changes of the chlinical symptoms/sputum smeat/the chest X-ray images and T lymphocyte subpopulations of venous blood were analyzed. The dynamic changes of immune status in 2 groups were compared and analyzed. ResultsIn the perid of T1, the clinical manifestations, sptutum smear negative conversion rate and image performanses of group A were better than those of group B. In the period of T6, the difference of effective rates between two groups had no statistical significance. There were significant differences in the interaction between the groups, the time point and the time between groups for T cells(P<0.05). For Th cells, The difference between groups and time points was statistically significant(P<0.05), but there was no significant difference in the interaction between group and time(P>0.05). For Ts cells, there were statistically significant differences between the groups(P<0.05), but there was no significant difference in the interaction between time and group time between the two groups(P>0.05). For Th/Ts ratio, there were statistically significant differences between the groups(P<0.05), but there was no significant difference in the interaction between time and group time between the two groups(P>0.05). ConclusionT immune function in elderly patients with secondary pulmonary tuberculosis was lower than that in young patients, and it has a direct impact on the treatment of elderly patients with pulmonary tuberculosis.

tuberculosis, pulmonary; T lymphocyte subpopulations; cellular components; radiography

2016-03-25；

2016-05-05

河北省醫學科學研究重點課題(20160492)

劉會(1982-)，男，河北保定人，河北省胸

。E-mail：64440878@qq.com

R521

A

1007-3205(2016)08-0889-04

科醫院主治醫師，醫學碩士，從事結核疾病診治研究。