3D-CRT聯合DC-CIK細胞治療高原地區復發性小細胞肺癌的療效觀察

梁　宏，宋　康，南　征

(1.青海大學醫學院基礎醫學部，西寧 810000；2.青海省人民醫院糖尿病科，西寧 810000；3.青海省第五人民醫院腫瘤放療科，西寧 810000)

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3D-CRT聯合DC-CIK細胞治療高原地區復發性小細胞肺癌的療效觀察

梁宏1，宋康2，南征3

(1.青海大學醫學院基礎醫學部，西寧 810000；2.青海省人民醫院糖尿病科，西寧 810000；3.青海省第五人民醫院腫瘤放療科，西寧 810000)

目的探討三維適型放療(3D-CRT)聯合樹突狀細胞-細胞因子誘導的殺傷細胞(DC-CIK)回輸治療高原地區復發性小細胞肺癌(SCLC)的臨床療效，以及對血管內皮生長因子(VEGF)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)的影響。方法選取2012年5月至2014年4月青海省第五人民醫院腫瘤放療科收治的復發性SCLC患者85例，按隨機數字表法分為對照組(41例)與觀察組(44例)，分別給予單純3D-CRT治療，3D-CRT聯合DC-CIK細胞治療，比較兩組的療效、不良反應發生率、治療前后VEGF及NSE水平，并觀察治療前后兩組各項肝、腎功能指標變化。結果觀察組的有效率(65.9%)及疾病控制率(79.5%)均高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。兩組治療4、8周后,血清VEGF、NSE水平及疼痛評分均下降，差異均有統計學意義(P<0.05)；治療8周后，觀察組VEGF、NSE水平及疼痛評分均低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。兩組各項不良反應發生率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。兩組治療前及治療后各項肝、腎功能指標水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。結論3D-CRT聯合DC-CIK細胞生物治療高原地區復發性SCLC的療效更明顯，且對放(化)療不良反應及肝、腎功能無明顯影響。

小細胞肺癌；三維適形放療；樹突狀細胞；細胞因子誘導的殺傷細胞

目前，全球肺癌的新發病例每年超過120萬，其中75%～80%為非小細胞癌，而小細胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)所占百分比從20%～25%下降至目前的15%左右。SCLC由于其生物學特征、臨床表現及治療方法的不同而被單獨列出，按照美國國家綜合癌癥網絡(National Comprehensive Cancer Network，NCCN)的SCLC臨床指南，SCLC一線化療采用依托泊苷聯合順鉑(EP)方案，有效率達60%～70%，但大多數患者會出現復發或轉移，且復發后大多耐藥[1]。目前，二線治療藥物眾多，療效低，尚無統一的治療方案。此外，復發性SCLC的臨床療效仍不盡人意，且各種治療的不良反應是人們關注的焦點。同時，近年來研究顯示，血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)與肺癌的預后及轉歸關系密切[2-3]，但單一腫瘤標志物的測定對肺癌的診斷及預后仍有不少局限性。研究提示，肺癌的發生、發展與免疫失衡密切相關，免疫生物治療作為一種新的治療手段近年來備受關注[4-6]。細胞因子誘導的殺傷細胞(cytokine-induced killer cells，CIK)具有強大的體外增殖能力、高殺傷活性及低不良反應等特征。因此，本研究通過對85例復發SCLC患者的放療和CIK細胞回輸治療結果進行分析，觀察客觀緩解率、主要不良反應及療效，分析不同治療模式對預后的影響，從而為臨床選擇標準治療方案提供依據。此外，本研究探討了SCLC中VEGF及神經元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)表達與腫瘤治療的相關性，為腫瘤的靶向治療研究提供依據。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2012年5月至2014年4月青海省第五人民醫院腫瘤放療科收治的SCLC患者85例，所有患者均長期(≥20年)居住于高原地區(海拔高度大于或等于2 700 m)，均經病理學或細胞學檢查證實為SCLC，既往均接受EP方案化療，均未接受局部放療及生物治療，復發時影像學CT均提示可見復發病灶，且經胸部、腹部CT及全身骨掃描證實無遠處轉移，預計生存期大于或等于5個月，Karnofsky體力狀況評分(KPS)大于或等于80分，治療前無明顯肝、腎功能損傷，白細胞計數大于3.5×109/L，血小板計數大于90×109/L。本研究方案獲醫院倫理委員會批準,受試者均簽署書面知情同意書。將納入的所有患者按隨機數字表法分為對照組(41例)與觀察組(44例)。兩組治療前性別、年齡、病程、疼痛評分、腫瘤體積等一般資料，以及復發部位及TNM分期比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

1.2方法

1.2.1治療方法對照組給予三維適形放療(three dimensional conformal radiation therapy，3D-CRT)，具體如下：3D-CRT采用熱塑膜固定體位，CT模擬掃描定位，3D-CRT計劃系統進行圖像數字化傳輸、三維重建，勾畫大體腫瘤靶區(gross tumor volume，GTV)包括原發病灶及轉移淋巴結，將GTV均勻外擴6～8 mm為臨床靶區(clinic tumor volume，CTV)，CTV外擴5 mm左右為計劃靶區(planning target volume，PTV)。照射野包括原發灶、轉移淋巴結及相應淋巴引流區的亞臨床灶。觀察組：細胞采集與CIK培養均由青海省第五人民醫院細胞生物治療中心完成；在3D-CRT治療的同時，同步給予樹突狀細胞-細胞因子誘導的殺傷細胞(DC-CIK)細胞回輸，患者均接受4個療程的細胞回輸，每個療程間隔14 d，DC-CIK細胞回輸前30 min給予鹽酸異丙嗪25 mg肌內注射，回輸過程如有不適，及時對癥處理。兩組患者治療期間每周至少復查血象1次，根據白細胞下降程度決定是否使用重組人粒細胞集落刺激因子，根據血小板下降程度決定是否使用重組人白細胞介素-11，并定期監測肝、腎功能及電解質等。治療完成后通過復查胸部X線片、胸部CT、磁共振成像(MRI)或核素骨掃描等判斷效果。

1.2.2血清標本的采集禁食12 h，晨起空腹抽取肘靜脈血5 mL，立即加入預冷的乙二胺四乙酸(EDTA)促凝管，靜置2 h，3 000 r/min離心10 min分離血清，置于-80 ℃冰箱待檢。

1.2.3VEGF的檢測采用酶聯免疫吸附試驗檢測VEGF水平，試劑盒由廣東深圳新博盛生物科技有限公司提供。按試劑盒說明書進行操作，用采用德國Bio-Rad Model550酶標儀進行測定，檢測波長為450 nm。在標準坐標紙上手工繪制標準曲線，以標準品濃度為橫坐標，吸光度值(A值)作縱坐標,以平滑線連接各標準品的坐標點，通過標本450 nm處的吸光度值(A450值)在標準曲線上查出VEGF濃度。

1.2.4其他相關指標的檢測(1)NSE、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉移酶(GGT)、堿性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)等均采用德國羅氏Cobas 8000型全自動生化分析儀(501或者601模塊)進行檢測。(2)血常規監測：白細胞、紅細胞及血小板計數，均采用日本Sysmex XT-2000i全自動全血分析儀。

1.2.5療效評價按2011年WHO實體瘤療效評價標準分為：完全緩解(CR)，腫瘤病灶完全消失，并維持不少于28 d；部分緩解(PR)，腫瘤病灶的最大直徑及其最大垂直橫徑的乘積縮小大于或等于50%，并維持不少于28 d；穩定(SD)，腫瘤病灶體積減少小于50%或增大小于25%，無新病灶出現，并維持不少于28 d；進展(PD)，腫瘤病灶體積增加大于或等于25%或新病灶出現。有效率(RR)=(CR+PR)/患者總例數×100%，疾病控制率(DCR)=(CR+PR+SD)/患者總例數×100%。

2　結　果

2.1兩組治療前后VEGF水平比較兩組資料經過重復測量的方差分析發現，治療4、8周后兩組患者VEGF及NSE水平均下降，差異均有統計學意義(P<0.05)。治療4周后兩組患者VEGF及NSE水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；治療8周后，觀察組患者VEGF及NSE水平均低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表1　兩組治療前一般資料比較

表2　兩組患者治療前后VEGF及NSE水平比較

*：P<0.05，與同組治療前比較；#：P<0.05，與同組治療4周后比較；△：P<0.05，與對照組治療8周后比較。

2.2兩組治療前后疼痛評分比較兩組資料經過重復測量的方差分析發現，與治療前比較，治療4、8周后兩組患者疼痛評分均下降，差異均有統計學意義(P<0.05)。治療4周后兩組患者疼痛評分比較，差異無統計學意義(P>0.05)；治療8周后，觀察組患者疼痛評分低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3　兩組治療前后疼痛評分比較±s，分)

*：P<0.05，與同組治療前比較；#：P<0.05，與同組治療4周后比較；△：P<0.05，與對照組治療8周后比較。

2.3兩組治療后RR及DCR比較觀察組RR及DCR均高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

2.4兩組治療后不良反應發生率比較兩組各種不良反應的發生率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表5。

2.5兩組治療前后各項肝、腎功能指標水平比較兩組治療前及治療后各項肝、腎功能指標水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表6。

表4　兩組患者臨床療效比較

*：P<0.05，與對照組比較。

表5　兩組治療后不良反應發生率比較[n(%)]

表6　兩組治療前后各項肝、腎功能指標水平比較±s)

3　討　論

SCLC作為肺癌的一種未分化癌，其惡性程度較高、生物學行為惡劣、預后較差，容易復發和轉移[7]，因此治療SCLC成為一個棘手問題，尤以復發性SCLC的治療最為突出。國內外關于SCLC二線治療的研究報道更是眾說紛紜。目前，有關SCLC二線治療的研究多數以單一用藥或聯合化療為主，但治療效果不是很滿意。20世紀有研究報道，紫杉醇、伊立替康等藥物對SCLC的治療有效率不超過30%[8-9]。

隨著分子生物學的發展和人類基因組學的重大突破，人們已注意到腫瘤機體某些基因功能的異常是影響其生物學活性的根本因素。國內研究表明，VEGF作為一種高度特異和高效的血管調控因子已被公認與腫瘤的發生、發展息息相關；國外亦有文獻報道，VEGF高表達提示患者預后較差[10]。同時，NSE是神經源性細胞分泌的一種蛋白酶，血清NSE水平已作為SCLC的腫瘤標記物之一被人們所研究。有研究報道，血清NSE水平升高對肺癌的診斷、療效評價和預后判斷等方面也有重要作用[11-12]。此外，NSE在預測SCLC復發方面一直都是很好的指標，Pinson等[13]報道,復發患者血清NSE水平由復發前的6.5 ng/mL升高到復發后的51.9 ng/mL。

目前，3D-CRT技術已被廣泛應用于腫瘤的臨床治療，為SCLC的治療提供了新思路。但國內外學者大多認為，仍宜采用聯合化療。Simon等[14]認為，對SCLC的治療應以化療聯合放療為主，但治愈率僅20%左右，而且僅針對局限性SCLC，對復發性肺癌更是意見不一，甚至束手無策。本研究以長期(≥20年)居住于高原地區(海拔高度大于或等于2 700 m)的復發性SCLC患者為研究對象，觀察組采用3D-CRT聯合DC-CIK細胞生物治療，其有效率(65.9%)及疾病控制率(79.5%)均高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，且觀察組患者治療后疼痛評分下降比對照組更明顯。本研究還發現，觀察組患者治療4、8周后，血清VEGF、NSE水平均下降(P<0.05)。說明觀察組的治療模式不僅在臨床癥狀改善上取得明顯效果，而且在分子水平也發揮了作用，比單純3D-CRT更具有說服力。此外，觀察組發生放射性肺炎5例、放射性食管炎3例、骨髓抑制23例、心臟損傷1例，兩組各項不良反應發生率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。通過監測兩組患者治療前及治療后4、8周各項肝、腎功能指標發現，兩組治療前及治療后各項肝、腎功能指標水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。

綜上所述，筆者推測在高原地區3D-CRT聯合DC-CIK細胞生物治療復發性SCLC的療效更優，且對放化療的不良反應無明顯影響，具有一定的研究價值和臨床意義。

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Observation on effect of 3D-CRT combined with DC-CIK cell in treatment of recurrent smell cell carcinoma in high altitude regions

LiangHong1，SongKang2，NanZheng3

(1.DepartmentofBasicMedicine,MedicalCollegeofQinghaiUniversity,Xining,Qinghai810000,China；2.DepartmentofDiabetes,QinghaiProvincialPeople′sHospital,Xining,Qinghai810000,China；3.DepartmentofTumorRadiotherapy,QinghaiProvincialFifthPeople′sHospital,Xining,Qinghai810000,China)

ObjectiveTo investigate the effect of 3-dimensonal conformal radiotherapy(3D-CRT) combined with dendritic cell-cytokine induced kill (DC-CIK) cell in the treatment of recurrent small cell lung carcinoma(SCLC) in high altitude regions,and its influence on VEGF and NSE.MethodsEighty-five patients with recurrent SCLC in the tumor radiotherapy department of the Qinghai Provincial Fifth People′ s Hospital from May 2012 to April 2014 were selected and divided into the control group(41 cases) and observation group(44 cases) according to the random number table.The two groups were respectively treated by 3D-CRT treatment and 3D-CRT combined with DC-CIK treatment cell.The curative effect,incidence rate of adverse reactions,levels of VEGF and NSE,changes of liver and renal function indexes in the two groups were compared before and after treatment.ResultsThe effective rate and sickness control rate of the observation group were 65.9% and 79.5% respectively,which were higher than those in the control group,and the differences were statistically significant(P<0.05).The levels of serum EGF and NSE,and pain score at 4,8 weeks after treatment were decreased,the differences were statistically significant(P<0.05).The levels of VEGF and NSE,and pain score at 8 weeks after treatment in the observation group were lower than those in the control group,the differences were statistically significant(P<0.05).The incidence rate of adverse reactions in the two groups had no statistically significant differences after treatment(P>0.05).The levels of liver and renal function indexes had no statistically significant differences between before and after treatment(P>0.05).Conclusion3D-CRT combined with DC-CIK cell in the treatment of recurrent SCLC in high altitude regions has more obvious curative effect,moreover has no obvious influence on radiotherapeutic adverse reactions,and liver and renal functions.

smell cell carcinoma；3-d conformal radiotherapy；dendritic cell；cytokine induced kill cell

梁宏(1982-)，講師，碩士，主要從事腫瘤臨床及基礎應用研究。

論著·臨床研究10.3969/j.issn.1671-8348.2016.19.019

R734.2

A

1671-8348(2016)19-2652-03

2016-01-24

2016-04-08)