新疆維吾爾族自身免疫性肝病患者自身抗體譜的研究分析*

羅德梅，趙建梅，張朝霞

(新疆醫科大學第一附屬醫院醫學檢驗中心，烏魯木齊 830011)

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新疆維吾爾族自身免疫性肝病患者自身抗體譜的研究分析*

羅德梅，趙建梅，張朝霞△

(新疆醫科大學第一附屬醫院醫學檢驗中心，烏魯木齊 830011)

目的分析新疆維吾爾族不同類型自身免疫性肝病患者的自身抗體陽性率及其診斷意義。方法選取2012年10月至2014年10月該院門診和住院的維吾爾族自身免疫性肝病患者51例，其中自身免疫性肝炎(AIH)20例(AIH組)，原發性膽汁性肝硬化(PBC)31例(PBC組)，采用間接免疫熒光法、免疫印跡法檢測其血清生化指標和自身抗體，并進行比較分析。結果兩組各項生化指標水平均明顯增高，其中兩組丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉肽酶(γ-GT)、堿性磷酸酶(ALP)及免疫球蛋白M(IgM)水平比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。AIH組患者抗核抗體(ANA)、抗平滑肌抗體(SMA)、抗肝腎微粒體-1(LKM-1)抗體、抗肝細胞溶質抗原1型(LC-1)抗體、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗體及抗線粒體抗體(AMA)陽性率分別為65.0%、40.0%、10.0%、5.0%、10.0%、5.0%；PBC組患者ANA、AMA及其M2亞型(AMA-M2)的陽性率分別為61.3%、100.0%和96.8%。結論新疆地區維吾爾族自身免疫性肝病患者的自身抗體譜具有一定的特征，自身抗體譜的檢測對自身免疫性肝病診斷、分型及鑒別診斷具有重要的意義。

自身免疫性肝炎；原發性膽汁性肝硬化；自身抗體；維吾爾族

自身免疫性肝病是一類病因和發病機制尚不明確，由免疫介導的自身免疫反應過度造成的慢性肝膽組織損傷，主要包括自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)，原發性膽汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis， PBC)，原發性硬化性膽管炎(primary sclerosing cholangitis，PSC)等。自身免疫性肝病的發生機制、病理變化、臨床表現、自身抗體各有其特點，因此診斷需綜合臨床、組織學、血清生化、自身抗體及遺傳特征，并排除病毒性肝炎[1]。筆者回顧性分析了新疆地區51例維吾爾族自身免疫性肝病患者的生化指標和自身抗體檢測結果，以探討新疆維吾爾族自身免疫性肝病患者自身抗體的陽性率、特征和意義。

1　資料與方法

1.1一般資料2012年10月至2014年10月本院門診和住院的維吾爾族自身免疫性肝病患者51例，其中AIH患者20例(AIH組)，男3例、女17例，平均年齡(41.0±26.3)歲，參照文獻[2]將AIH患者分為AIH-Ⅰ型15例、AIH-Ⅱ型3例和AIH-Ⅲ型2例；PBC患者31例(PBC組)，男4例、女27例，平均年齡(48.0±10.2)歲。所有患者各項病毒感染指標均為陰性，并排除藥物、酒精性、遺傳代謝性肝病。AIH診斷符合美國肝臟病學會2011年修訂的AIH診斷標準[3]，AIH的分型依據自身抗體，PBC診斷符合美國肝臟病學會診斷標準[4]。

1.2方法

1.2.1血清生化指標檢測采用美國Backman LX20全自動生化儀及配套試劑，Immage免疫速率散射比濁儀及配套試劑測定免疫球蛋白(Ig)，包括IgG、IgA、IgM。

1.2.2自身抗體檢測采用間接免疫熒光法分別檢測抗核抗體(ANA)、抗線粒體抗體(AMA)、抗平滑肌抗體(SMA)；采用免疫印跡法檢抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)、抗肝腎微粒體-1(LKM-1)抗體、抗肝細胞溶質抗原1型(LC-1)抗體及抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗體。檢測試劑盒均由德國

表1　兩組生化及Ig指標水平比較±s)

表2　兩組血清學自身抗體陽性率[n(%)]

歐蒙公司生產，嚴格按試劑盒說明書操作。

2　結　果

2.1兩組生化及Ig指標比較各項生化及Ig指標水平在AIH組和PBC組患者中均明顯升高；兩組丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉肽酶(γ-GT)、堿性磷酸酶(ALP)及IgM水平比較，差異均有統計學意義(P<0.05)；而兩組天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、總膽紅素(T-Bil)、IgG及IgA水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2兩組血清學自身抗體陽性率AIH組與PBC組患者ANA陽性率分別為65.0%、61.3%，SMA陽性率分別為40.0%、0.0%，抗LKM-1抗體陽性率分別為10.0%、0，抗LC-1抗體陽性率分別為5.0%、0，抗SLA/LP抗體陽性率分別為10.0%、0，AMA陽性率分別為5.0%、100.0%，AMA-M2陽性率分別為0、96.8%。見表2。

3　討　論

自身免疫性肝病以往認為多見于歐美白種人，中國人群患病率較低。中國人中慢性肝病發病率較高，但以病毒性肝炎為主。近年來研究表明，一部分肝功能異常的非病毒性肝炎患者可能是自身免疫性肝病[5]。隨著自身抗體檢測在實驗室的普及，以及臨床醫生對該類疾病認識的逐步提高，該病發病率呈上升趨勢，一方面可能是由于實際發病人數增加，另一方面是由于對該類疾病的認識和診斷技術提高。

AIH的發病機制尚未完全明確，目前認為主要是遺傳易感性，以及環境誘發導致天然免疫耐受被破壞，誘導產生以T淋巴細胞介導為主的針對肝臟抗原的免疫反應，造成肝臟組織的破壞及慢性炎癥的形成[6]。AIH可發生于兒童和各年齡階段的成年人，尤以女性多見。本研究女性患者多于男性，除Ⅱ型患者以兒童多見外，發病年齡集中在50～60歲。AIH起病較為隱匿，常無明顯癥狀，多在查體或生化檢查時發現血清轉氨酶升高[7]。本研究結果顯示：AIH患者ALT和AST均明顯升高，提示肝臟組織細胞受損較重，ALT、γ-GT、ALP及IgM在AIH組與PBC組間比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，與文獻[6]報道的結果一致。

自身抗體檢測對自身免疫性肝病的診斷和分型具有重要意義。依據血清自身抗體的不同，AIH分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。ANA和(或)SMA抗體陽性是診斷Ⅰ型AIH的特征指標。有研究報道，ANA和SMA抗體水平不足以提示疾病的發展和預后，高滴度(1∶160)的ANA和SMA抗體同時出現對AIH的診斷率達100%，表明ANA和SMA均不參與AIH的發病機制，其對疾病的診斷價值大于預后[8]。單一的自身抗體陽性對診斷AIH具有局限性，需綜合其他的臨床指標。本研究中Ⅰ型占AIH患者的75%(15/20)，ANA和SMA抗體的陽性率分別為65.0%和40.0%，與文獻[9]報道的結果相似。Ⅱ型AIH標志性抗體為抗LC-1和(或)抗LKM-1抗體。有研究報道，抗LC-1抗體可作為唯一自身抗體存在，也可與抗LKM-1同時存在于AIH中，對AIH診斷具有特異性[10]。抗LC-1抗體陽性的AIH有明顯的肝細胞炎癥，病變也相對較重，其抗體滴度與AST水平平行，是判斷疾病活動性的敏感指標，對疾病的早期治療有很大的幫助，因此在AIH的臨床治療中應對其進行密切觀察。本研究中3例Ⅱ型AIH患者均為維吾爾族兒童，符合Ⅱ型AIH多見于兒童(2～14歲)的特征，且在歐洲國家相對常見。本研究中LKM-1、抗LC-1抗體陽性率分別為10.0%和5.0%，與H?ner Zu Siederdissen 等[11]報道一致，考慮是否和本地區人群的遺傳易感基因或致病因素及環境誘發因素有關，有待積累更多的病例進一步研究。抗LKM抗體有3種亞型，其中抗LKM-1抗體的靶抗原被證實為細胞色素P4502D6，因其與丙型肝炎病毒(HCV)基因序列有部分同源性，故少數丙型肝炎患者血清中也可出現抗LKM-1抗體。提示臨床對于丙型肝炎標志物和自身抗體同時陽性的患者，在確定臨床治療方案時需謹慎[12]。Ⅲ型AIH的標志性抗體是抗SLA/LP抗體，該抗體是近年來備受關注的AIH靶抗原之一[13]，其可能與AIH 的發病機制有關[2]。本研究中1例抗SLA/LP抗體陽性患者均診斷為Ⅲ型AIH，抗SLA/LP抗體陽性率為10.0%，低于國內相關報道的20%～40%，是否存在種群差異有待進一步研究。抗SLA/LP抗體對AIH具有很高的特異性，幾乎僅見于AIH，并且在病毒性肝炎患者中表現為陰性，因此具有確診意義。由此可見，在ANA、SMA、抗LC-1抗體及抗LKM- l抗體檢測均為陰性或低滴度的肝病患者中進行抗SLA/LP抗體檢測，可以減少漏診及誤診，使不典型的AIH患者得到及時有效的治療，此外抗SLA/LP抗體陽性與AIH病情嚴重程度也存在一定聯系。

PBC是以肝內小管進行性、非化膿性、破壞性炎癥為特征的慢性膽汁淤積性疾病，為典型的自身免疫性疾病，主要發生于中年女性，男女比例為1∶9。高滴度(1∶40)AMA是PBC的特征血清學標記物，其靶抗原位于線粒體內膜，主要抗體為IgG。根據抗原在線粒體內膜或外膜上的位置與對胰蛋白酶的敏感性和電泳特性，可將AMA分為9個亞型(M1～M9)，其中M2亞型只在肝臟的膽管上皮表達，在肝細胞上無表達，對PBC的診斷特異度高。本研究中PBC患者AMA陽性率為100.0%，AMA-M2陽性率為96.8%，與文獻[14]報道一致。雖然AMA對PBC具有高度特異性，但其分型和效價并不與PBC的嚴重程度及病情發展相關。PSC以男性多見，是一種自身免疫性疾病導致的膽道狹窄和炎癥，確診需依賴內鏡膽管造影術(ERC)，PSC患者患膽管癌的風險為7%～13%，臨床應重視ERC細胞學標本的檢測[15]。

綜上所述，肝臟自身抗體檢測在疾病的診斷中占據不可或缺的地位，本研究中維吾爾族自身免疫性肝病患者的自身抗體陽性率、陽性類別與國內相關報道存在差異，呈現一定的民族特征性。因此，對肝功能異常的非病毒性肝炎患者，尤其是維吾爾族肝功能異常的患兒，進行自身抗體檢測對輔助診斷自身免疫性肝病及其分型、鑒別診斷都具有重要意義。目前，尚不清楚自身抗體是否參與自身免疫性肝病的發病，部分自身抗體的滴度與疾病嚴重程度相關，如抗SLA/LP抗體、抗LC-1抗體等，提示自身抗體的存在可能直接與肝臟損傷相關[2]。AIH患者尤其維吾爾族患者自身抗體的出現是否與疾病分期、疾病活動狀況及預后判斷有關，還有待進一步研究。總之，提高自身抗體檢測的重視度尤其維吾爾族AIH患者的自身抗體檢測，加強對AIH的認識并以此形成清晰的診斷思路，對此類疾病的診斷和治療都有著重要的意義。

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Analysis on autoantibodies spectrum of Uygur patients with autoimmune liver disease in Xinjiang*

LuoDemei，ZhaoJianmei，ZhangZhaoxia△

(MedicalLaboratoryCenter,FirstAffiliatedHospital,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi,Xinjiang830011,China)

ObjectiveTo analyze the positive rate of autoantibodies in Xinjiang Uygur patients with different types of autoimmune liver disease and its diagnostic value.MethodsFifty-one Uygur outpatients and inpatients with of autoimmune liver disease in our hospital from October 2012 to October 2014 were selected,including 20 cases of autoimmune hepatitis(AIH,AIH group) and 31 cases of primary biliary cirrhosis(PBC,PBC group).The indirect immunofluorescence and Western blotting were used to detect the serum biochemical indexes and autoantobodies,and the comparative analysis was performed.ResultsThe levels of various biochemical indexes in the two groups were increased,in which ALT,γ-GT,ALP and IgM levels had statistical difference between the two groups(P<0.05).The positive rates of ANA,SMA,LKM-1 antibody,LC-1 antibody,SDLA/LP antibody and AMA in the AIH group were 65.0%,40.0%,10.0%,5.0%,10.0% and 5.0% respectively;the positive rates of ANA,AMA and M2 subtype(AMA-M2) in the PBC group were 61.3%,100.0% and 96.8% respectively.ConclusionThe autoantibodies spectrum in Xinjiang Uygur patients with autoimmune liver diseases has certain characteristics.The autoantibodies spectrum detection has an important significance for the diagnosis,classification and differential diagnosis of autoimmune liver diseases.

autoimmune hepatitis；primary biliary cirrhosis；autoantibody；the Uygur people

論著·臨床研究10.3969/j.issn.1671-8348.2016.19.010

新疆維吾爾自治區自然科學基金項目(2014211C047)。作者簡介：羅德梅(1971-)，副主任檢驗師，本科，主要從事自身免疫性疾病和自身抗體研究。△

，E-mail：285715300@qq.com。

R575

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1671-8348(2016)19-2623-03

2016-01-10

2016-03-22)