抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體在類風濕關節炎診斷中的應用價值

夏秋風，張　慧，鄒曉月，張龍峰

(江蘇大學附屬醫院檢驗科，江蘇鎮江 212001)

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抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體在類風濕關節炎診斷中的應用價值

夏秋風，張慧，鄒曉月，張龍峰

(江蘇大學附屬醫院檢驗科，江蘇鎮江 212001)

摘要:目的了解抗突變型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗體在類風濕關節炎(RA)診斷中的意義，并比較抗MCV抗體與類風濕因子(RF)、紅細胞沉降率(ESR)、抗環瓜氨酸多肽(CCP)抗體的相關性。方法對90例RA患者(RA組)、56例非RA患者(非RA組)和85例健康體檢人員(對照組)，應用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清中的抗MCV抗體，同時檢測87例RA患者類風濕因子(RF)、ESR、CCP抗體指標，用統計學方法分析抗MCV抗體的診斷價值。結果抗MCV抗體對RA診斷的敏感性為78%，特異性為69%，陽性預測值為73%，陰性預測值為76%。抗MCV抗體的平均濃度依次為(459±441)U/mL(RA組)、(42±136)U/mL(非RA組)、(46±152)U/mL(對照組)，RA組的平均抗體濃度較高。RA組活動期[(600±420)U/mL]比慢性期[(70±202)U/mL]抗MCV抗體的平均濃度顯著增高?？筂CV抗體與抗CCP抗體(r=0.602,P=0.000)的相關性較與RF(r=0.237,P<0.05)的相關性強，與ESR無相關性(P=0.53)。結論抗MCV抗體在RA中具有較高的敏感性和特異性，與抗CCP抗體、RF有正相關性，聯合抗CCP抗體、RF檢測可提高RA的診斷效率。動態監測抗MCV抗體的濃度可用于判斷RA的病情活動程度。

關鍵詞:類風濕關節炎；突變型瓜氨酸波形蛋白；類風濕因子；紅細胞沉降率；環瓜氨酸多肽；抗體

類風濕關節炎(RA)是一種高發的致畸性自身免疫性疾病。早期診斷并及時治療可以減少骨關節破壞并改善預后。近年來有多種針對RA的自身抗體已用于臨床檢測。類風濕因子(RF)和抗環瓜氨酸肽(CCP)抗體等是輔助診斷RA的常用檢測指標。有報道顯示抗CCP抗體較RF的敏感性差，但特異性高，單獨檢測某個指標，容易引起RA的漏診[1-2]。目前多個血清學檢測指標聯合檢測更能提高RA的診斷效率，尋找RA免疫學診斷的新檢測指標已成為研究熱點?？雇蛔冃凸习彼岵ㄐ蔚鞍?MCV)是新興的輔助診斷RA的免疫學檢測指標之一?？筂CV抗體因抗原MCV系天然蛋白來源和具多個潛在抗原決定簇結構特點比抗CCP抗體具有更高的特異性和敏感性[3]。

本研究應用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測抗MCV抗體，分析其在RA診斷中是否比抗CCP抗體或RF具有更高的敏感性和特異性，并比較它與RF、抗CCP抗體、紅細胞沉降率(ESR)的相關關系，為RA的早期診斷及判斷疾病活動程度提供有價值的幫助。

1資料與方法

1.1一般資料選取2014年3月至2015年12月到本院就診的RA患者90例作為測試組,年齡26～78歲，平均(60±11)歲，其中RA活動期66例，慢性期24例，均符合1987年美國風濕病協會(ARA)的診斷標準。56例非RA組(其他自身免疫性疾病，主要為強直性脊柱炎、結締組織病、系統性紅斑狼瘡、干燥綜合征和皮肌炎)作為自身免疫性疾病比較組，年齡15～77歲，平均(51±14)歲。85例健康體檢人員(排除自身免疫性疾病)的血清作為對照組，年齡21～91歲，平均(61±15)歲。RA組和對照組年齡差異無統計學意義(t=-1.028，P=0.306)，男女性別分布均勻，排除年齡、性別因素干擾。

1.2方法(1)抗CCP抗體測定采用ELISA法，試劑由德國歐蒙公司提供，嚴格按試劑盒說明書進行操作。本實驗中抗CCP抗體濃度超過800 U/mL，均按800 U/mL計算。陽性判斷標準：抗CCP抗體>25 U/mL。(2)RF定量測定采用美國貝克曼庫爾特公司Immage特種蛋白分析儀，試劑為專用試劑。陽性判斷標準：RF>20 U/mL。(3)抗MCV抗體測定采用ELISA法，檢測試劑盒購自德國Orgentee公司，嚴格按照說明書進行操作。Orgentec公司所推薦的20 U/mL為正常值界限，所能測定的濃度范圍為0～1 000 U/mL。本實驗中抗MCV抗體濃度超過1 000 U/mL，均按1 000 U/mL計算。陽性判斷標準：抗MCV抗體>20 U/mL。(4)紅細胞沉降率(ESR)測試采用魏氏法。陽性判斷標準：ESR>20 mm/h。

2結果

2.1抗MCV抗體含量比較，RA組比非RA組和對照組均顯著增高，差異有統計學意義(P<0.05)，而后兩組間差異無統計學意義(P=0.998)；RA患者活動期比慢性期抗MCV抗體水平顯著增高，差異有統計學意義(P<0.05)?？筂CV抗體陽性率比較，RA組比非RA組和對照組均高，差異有統計學意義(P<0.05)，而后兩組陽性率差異無統計學意義(P=0.798)；RA患者活動期比慢性期陽性率顯著增高，差異有統計學意義(P<0.05)。抗MCV抗體對RA診斷的敏感性為78%，特異性為69%，陽性預測值為73%，陰性預測值為76%,見表1。

表1　　抗MCV抗體對RA診斷的敏感性和特異性

注：與RA組比較，*P<0.05；與RA組活動期比較，**P<0.05。

2.2RA組抗MCV抗體與抗CCP抗體、RF及ESR的相關系數(r)分別為0.602、0.237、0.069，P分別為0.000、0.029、0.530，抗MCV抗體與抗CCP抗體、RF呈正相關，與ESR無相關性。

3討論

有研究報道，抗CCP抗體陰性的RA患者血清中可檢測出抗MCV抗體[4-5]。因此，在對RA的診斷中有必要聯合檢測多個免疫學指標。本研究以抗MCV抗體>20 U/mL為陽性判斷標準，得出抗MCV抗體對RA診斷的敏感性為78%，特異性為69%，這與國外曾報道的抗MCV抗體在RA患者的敏感性(48.4%～85.0%)和特異性(80.0%～97.0%)稍有差別。趙華明等[6]指出提高抗MCV抗體的陽性閾值，可提高其診斷RA的特異性，相應降低敏感性，但目前并沒有一個統一的陽性閾值可作為RA的臨床診斷依據。同樣，抗MCV抗體需聯合其他自身抗體如抗CCP抗體、RF、抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗體(AKA)、抗聚角蛋白微絲蛋白抗體(AFA)等進行檢測，可進一步提高對RA早期診斷的特異性，也避免單一抗MCV抗體檢測引起的RA漏診。

比較抗MCV抗體濃度時發現，RA組的平均抗體濃度比非RA組和對照組均高，后兩組差異無統計學意義，提示抗MCV抗體在非RA的其他自身免疫性疾病患者中或很少表達，進一步說明抗MCV抗體在RA的診斷中有較好的特異性。RA組活動期比慢性期的抗MCV抗體的平均濃度顯著增高，提示抗MCV抗體的濃度變化與RA的活動程度有正相關關系，這與Derganowa等[7]報道的抗MCV抗體與疾病活動性相關(r=0.404)一致，而與趙華明等[6]報道的有所差別。

衡量RA病情活動的實驗室指標包括ESR、CRP、抗CCP抗體和RF等。有報道指出抗CCP抗體和RF的滴度[8-9]及ESR[10]均與RA的病情活動程度呈正相關?？笴CP抗體較RF的特異性高[1]，RF增高可見于其他一些自身免疫性疾病。動態監測ESR可用于評估RA的病情活動程度，但沒有特異性。因此這3個指標的特異性順序為：抗CCP抗體>RF>ESR。用偏相關分析比較抗MCV抗體與這3個指標的相關關系，得出相關性順序為：抗CCP抗體>RF，抗MCV抗體與ESR無相關性，這正好與上述3個指標的特異性順序相一致，進一步驗證了抗MCV抗體對RA的診斷具有高特異性，而聯合抗CCP抗體、RA及ESR能提高RA診斷和判別病情活動程度的特異性。在本研究中RA組存在個別抗MCV抗體低滴度乃至陰性，而抗CCP抗體、RF滴度很高的RA患者，這可能與個體的抗MCV抗體基因表達差異有關。

綜上所述，抗MCV抗體對RA臨床診斷具有較高的敏感性和特異性，與抗CCP抗體、RF聯合檢測可進一步提高對RA診斷的特異性。本實驗以抗MCV抗體>20 U/mL作為診斷RA的陽性閾值時，雖然有較高的敏感性，但特異性相對較差，為了確定一個合適的抗MCV抗體陽性閾值，還需要做大規模的臨床研究。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.042

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)14-2001-03

(收稿日期：2016-01-12修回日期：2016-03-19)