兒童EB病毒感染的EB病毒相關血清學特征研究

張雪梅

(解放軍一七四醫院 兒科,福建 廈門361000)

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兒童EB病毒感染的EB病毒相關血清學特征研究

張雪梅

(解放軍一七四醫院 兒科,福建 廈門361000)

EB病毒感染呈全球性分布，以兒童及青少年居多，其中以傳染性單核細胞增多癥(IM)多見，具有自限性，部分患者可發展為EBV相關性噬血性淋巴組織增生(EBV-HLH)，病情兇險致死率高達30%-40%[1]。目前實驗室EB病毒血清學特異性抗體檢測主要包括針對EBV衣殼抗原(VCA-IgM、VCA-IgG)、抗EBV核抗原(NA-IgG)以及EBV早期抗原(EA-IgG)，我們回顧性分析我院2013年1月至2014年11月間我院87例EB抗體檢測陽性兒童臨床資料，旨在探討兒童EB病毒感染不同血清學模式臨床表現以及病毒復制情況的差異，為兒童EB病毒感染的防治提供研究資料。

1對象與方法

1.1研究對象

選擇2013年1月至2014年11月我院兒科88例EB抗體檢測陽性兒童為研究對象，其中男59例，女29例，年齡1-9歲，平均5.3±3.2歲。根據EB四種抗體的檢測情況分為原發感染組(抗 VCA-Ig M +，抗NA-Ig G-，抗 VCA-Ig G、EA-Ig G +或-)30例，亞急性感染組31例(抗 VCA-Ig M、VCA-Ig G、NA-Ig G +，抗EA-Ig G +或-)，既往感染組(僅抗 VCA-Ig G 或抗NA-Ig G +，其余-)27例。研究對象的選擇注意排除免疫性及腫瘤性疾病患兒。

1.2方法

清晨空腹抽取非抗凝血及EDTA抗凝血，非抗凝血離心分離血清分別進行EB病毒抗體譜的檢測，血生化檢測：谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH))以及EB病毒DNA載量檢測，EB病毒抗體譜的檢測采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測，試劑由德國歐蒙提供，EB病毒DNA載量檢測采用熒光定量PCR檢測，血生化檢測采用寧波美康生物有限公司產品，全自動生化分析儀為HITACHI7600。EB病毒DNA載量檢測全自動基因擴增儀為ABI7500，試劑由達安生物有限公司提供。取EDTA抗凝血離心后白細胞層，DNA病毒載量的計算采用對數值比較。所有實驗室檢測均嚴格按試劑操作說明書操作，當日室內質量控制保證結果的有效性。

1.3統計學分析

所有研究數據統計學處理采用統計學軟件SPSS19.0進行分析處理，構成比較采用卡方檢驗，多組均值比較采用方差分析，組間兩兩比較采用SNK法，以P<0.05有統計學意義。

2結果

2.1原發感染組與亞急性感染組臨床癥狀差異

兩組患者肝脾腫大發生率原發感染組高于亞急性感染組，差異有統計學意義(P<0.05)，發熱、皮疹、咽峽炎、淋巴結腫大的發生率，兩組無統計學差異(P>0.05)，見表1。

表1　原發感染組與亞急性感染組臨床癥狀差異(n)

2.2三組不同血清學模式EB感染患者病毒DNA載量、血生化指標比較

三組患者DNA病毒載量、ALT、AST、LDH平均濃度經方差分析均有統計學差異(P<0.05)，組間兩兩比較經SNK法分析也均存在統計學差異(P<0.05)，三組DNA病毒載量、ALT、AST、LDH異常率經卡方檢驗分析，組間兩兩比較也均存在統計學差異(P<0.05)， 見表2。

表2　三組不同血清學模式EB感染患者病毒DNA載量、血生化平均濃度及異常指標比較

2.3三組研究對象EBDNA病毒載量與血生化指標相關性分析

三組研究對象EBDNA病毒載量與血生化指標ALT、AST以及LDH經pearson相關性分析均呈正相關，相關系數分別為0.69、0.61、073，以LDH較高。見表3。

表3　三組研究對象EBDNA病毒載量與血生化指標相關性分析

3討論

EBV屬于皰疹病毒嗜淋巴細胞 DNA 病毒對人類普遍易感，尤其兒童，研究顯示[2]：我國3-5歲兒童EBV抗體陽性率高達80.7%，病癥輕重不一，初次感染以傳染性單核細胞增多癥多見，部分患兒預后不良進展為EBV相關的噬血性淋巴組織增生，持續高熱，肝脾腫大，多系可出現病理損傷，病死率居高不下。

EB病毒感染目前臨床主流的檢測方法為EB病毒抗體譜以及EB病毒DNA載量檢測，根據EB抗體譜檢測不同EB病毒感染可分為原發性感染、亞急性感染以及潛伏感染。原發性感染產生特異性體液、細胞免疫反應，VCA-IgM為EB病毒新近感染的標志性抗體，產生于感染4-7天，3-4周后滴度可逐漸降低直至消失，再次感染VCA-IgM不出現升高[3]，EA-IgG則出現在感染的急性期，部分潛伏感染病毒重新激活EA-IgG可呈現陽性結果。這兩種抗體與EB抗體譜的其他抗體不同，均不具備累積效應[4]。VCA-IgG、NA-IgG則對既往感染的意義較大[5]。發熱、咽峽炎、頸部淋巴結腫大為EB病毒感染三聯征[6]，我們的研究數據顯示，在原發感染以及亞急性感染臨床癥狀比較中肝臟腫大、脾腫大發生率原發感染組高于亞急性感染組，差異有統計學意義。在原發性感染中患兒肝脾腫大較為常見，這與病毒進入B淋巴細胞增殖并導致B淋巴細胞表面抗原改變所引起的強烈細胞免疫有關[7]。

EB抗體譜反映機體的免疫狀態[8]，DNA病毒載量可較為準確的反映機體病毒的復制情況[9]，但在研究數據中顯示各組DNA病毒載量的陽性率均低于相應組別抗體譜的陽性率，EB病毒多為潛伏感染，病毒潛伏于淋巴細胞以及復層上皮，尤其無癥狀攜帶者，受感染細胞在循環池中數量較少[10]，陽性率低于抗體譜陽性率，而抗體譜涵蓋病程相對較長也是抗體譜陽性率較高的原因之一，數據顯示：三組中EB病毒DNA平均病毒載量以及陽性率均存在統計學差異，原發感染組、亞急性感染組以及既往感染組依次降低，在血清中DNA病毒載量僅在復制活躍時檢出機率較大，急性感染期(約在病毒感染前幾個月)DNA病毒陽性機率較大，病毒載量較高，研究中原發感染組病毒載量多在3次方，而在亞臨床以及既往感染僅能檢出低病毒載量EBDNA，有研究顯示：在IM中EBDNA病毒載量與病情的嚴重程度相關[11]，高病毒載量患者提示機體的免疫損傷，無法控制病毒的復制。在我們的研究中：三組中ALT、AST、LDH平均血清濃度以及異常率均存在統計學差異原發感染組、亞急性感染組以及既往感染組依次降低，與EBDNA病毒載量呈正相關。

參考文獻：

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[8]姜昌麗，龔軍麗，李云，等.淋巴瘤患者血漿和PBMC EBV定量測定的對比研究[J]．現代檢驗醫學雜志， 2012，27(1)：97.

[9]Xing Y，Song H M，Wei M，et a1．Clinical significance of variations in levels of Epstein-Barr Virus(EBV)antigen andadaptive immune response during chronic active EBV infection inchildren [J].J Immunotoxicol，2013，10(4)：387.

[10]皇甫春榮，付紅敏．EB病毒相關性噬血細胞綜合征的臨床特征及外周血淋巴細胞亞群的變化[J]．中國小兒急救醫學，2010，17(4)：330.

[11]Germi R，Lupo J，Semenova T，et a1．Comparison of commercial extraction systenls and PCR assays for quantification of Epstein-Barr virus DNA load in whole blood[J]．J Clin Microbiol，2012，50(4)：1384.

文章編號：1007-4287(2016)07-1136-02

(收稿日期：2015-04-15)