殼寡糖對脂多糖誘導豬空腸上皮細胞氧化損傷的作用

肖定福　鐘　佳　劉進輝　李文平*

(1.湖南農業大學動物科學技術學院，長沙410128；2.湖南農業大學動物醫學院，長沙410128)

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*同等貢獻作者

殼寡糖對脂多糖誘導豬空腸上皮細胞氧化損傷的作用

肖定福1鐘佳2*劉進輝2李文平2**

(1.湖南農業大學動物科學技術學院，長沙410128；2.湖南農業大學動物醫學院，長沙410128)

摘要：本試驗旨在通過脂多糖(LPS)誘導豬空腸上皮細胞(IPEC-J2)來建立氧化應激模型，探討殼寡糖(COS)的抗氧化作用效果。采用噻唑藍(MTT)法檢測LPS和COS對IPEC-J2作用12、24、48 h后細胞增殖活性的變化；選擇適宜濃度LPS(1.0 μg/mL)和COS(200 μg/mL)作用于IPEC-J2，分為對照組、LPS組、COS組、LPS+COS組。采用Western Blot法檢測核因子E2相關因子2(Nrf2)、血紅素氧合酶-1(HO-1)蛋白的表達；試劑盒檢測超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)的含量。結果表明： 1.0 μg/mL的LPS對IPEC-J2作用24 h，細胞增殖的抑制率為41.6%，為造模的最適濃度和作用時間；COS在一定濃度范圍內對IPEC-J2有增殖作用，其濃度為200 μg/mL時效果最佳，作用時間為24 h時，細胞增殖率達到126.3%。LPS+COS組較對照組的SOD、CAT活性和MDA含量差異不顯著(P>0.05)，Nrf2和HO-1蛋白相對表達量顯著升高(P<0.05)；LPS+COS組較LPS組的Nrf2蛋白相對表達量顯著升高(P<0.05)，HO-1有升高趨勢，但差異不顯著(P>0.05)，SOD、CAT活性顯著升高(P<0.05)，MDA含量顯著降低(P<0.05)。由此可見，LPS誘導IPEC-J2氧化應激，而COS可進一步促進Nrf2和HO-1蛋白的高表達，并提高抗氧化酶的活性，降低氧化產物含量，從而增強細胞對氧化應激的抵抗力，起到保護作用。

關鍵詞：殼寡糖；脂多糖；豬空腸上皮細胞；氧化應激；抗氧化作用

氧化應激是機體自由基生成增加或(和)清除能力降低，導致機體氧化和抗氧化兩者失衡，自由基大量累積造成機體損傷[1]。腸道黏膜是宿主防御病原微生物的第1道防線，而腸上皮細胞是腸道黏膜屏障的重要組成部分，腸上皮細胞的損傷是腸功能障礙的重要病理基礎。在多種生理、病理、飲食或環境不當等情況下，腸上皮細胞都能產生嚴重的氧化應激，過多的自由基的累積可導致腸上皮細胞受損，從而發生腸功能障礙[2]。殼……