建立尿液流水線尿沉渣分析儀檢查結(jié)果復(fù)檢規(guī)則的探討

梁紅英,關(guān)植芝,楊麗紅,劉永東

(廣東省開平市中醫(yī)院檢驗(yàn)科　529300)

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·臨床研究·

建立尿液流水線尿沉渣分析儀檢查結(jié)果復(fù)檢規(guī)則的探討

梁紅英,關(guān)植芝,楊麗紅,劉永東

(廣東省開平市中醫(yī)院檢驗(yàn)科529300)

摘要:目的通過對(duì)尿液干化學(xué)、有形成分檢查和顯微鏡鏡檢結(jié)果的綜合分析，探討尿液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、小圓上皮細(xì)胞及管型檢查結(jié)果之間的差異，制訂合理的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則。方法隨機(jī)選取1 380例患者新鮮中段尿液標(biāo)本，分別用Sysmex UF-500i尿沉渣分析儀、不離心顯微鏡鏡檢進(jìn)行有形成分分析、用US-200尿干化學(xué)分析儀進(jìn)行尿液干化學(xué)分析，并對(duì)紅細(xì)胞，白細(xì)胞、小圓上皮細(xì)胞及管型的檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1 380份標(biāo)本復(fù)檢率為42.7%，以管型復(fù)檢為主，小圓上皮細(xì)胞次之，紅細(xì)胞復(fù)檢率最低。結(jié)論UF-500i尿沉渣分析儀復(fù)檢率較高，只能作為一種篩查工具。實(shí)驗(yàn)室有必要建立適當(dāng)?shù)娘@微鏡復(fù)檢規(guī)則，以保證尿液常規(guī)檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性。

關(guān)鍵詞:UF-500i尿沉渣分析儀;不離心顯微鏡鏡檢;復(fù)檢規(guī)則

尿液成分分析包括尿液干化學(xué)分析和尿液沉渣分析，其反映機(jī)體的代謝情況，不僅有助于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷和病情監(jiān)測(cè)，對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)和消化系統(tǒng)疾病的診斷及輔助診斷也有重要的臨床價(jià)值。隨著尿液干化學(xué)分析和尿沉渣分析儀的普及，尿液檢查自動(dòng)化的程度和監(jiān)測(cè)速度也不斷提高。尿液檢查流水線的使用大大提高檢測(cè)速度，但是尿液干化學(xué)分析儀和尿沉渣分析儀的測(cè)試體系存在差異:干化學(xué)反應(yīng)存在反應(yīng)的局限性和或干擾因素；Sysmex UF-500i尿沉渣分析儀基于熒光染色的原理使尿液中有形成分染色后量化的細(xì)胞表面及內(nèi)部的信息，通過光的強(qiáng)度參數(shù)，分析和量化各個(gè)有形成分。但是實(shí)際上尿液有形成分形態(tài)、大小多變導(dǎo)致光強(qiáng)互相交叉，從而造成有形成分檢查結(jié)果的假陰、陽(yáng)性比較高。因此，兩種檢測(cè)系統(tǒng)的檢查項(xiàng)目存在假陰、陽(yáng)性[1]，需要以顯微鏡鏡檢為判斷標(biāo)準(zhǔn)，通過顯微鏡鏡檢進(jìn)一步確定。為了提高尿液分析的檢驗(yàn)質(zhì)量，規(guī)范操作流程，提高工作效率，建立合理的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則是必要的。

1材料與方法

1.1材料與儀器US-200尿干化學(xué)分析儀及配套試紙條、質(zhì)控品；Sysmex UF-500i尿沉渣分析儀及配套試劑、原裝配套高、底值質(zhì)控品、普通光學(xué)顯微鏡。

1.2標(biāo)本來源收集2014年5月至2015年2月本院門診或各區(qū)病房的新鮮中段尿標(biāo)本1 380份。其中1 000份用于建立復(fù)檢規(guī)則，380份用于規(guī)則驗(yàn)證。

1.3方法隨機(jī)留取標(biāo)本，專人負(fù)責(zé)標(biāo)本處理，并于2 h內(nèi)完成檢測(cè)，結(jié)果以顯微鏡鏡檢為準(zhǔn)。

1.3.1尿液干化學(xué)、尿沉渣鏡檢、尿沉渣分析的陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)以顯微鏡檢查結(jié)果作為臨床評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，分別對(duì)尿干化學(xué)分析儀和尿沉渣分析儀進(jìn)行比較。尿沉渣鏡檢：未離心尿液非染色檢驗(yàn)法檢驗(yàn)參考標(biāo)準(zhǔn)為紅細(xì)胞(RBC)、管型(CAST)、小圓上皮細(xì)胞(SRC)均為(0至偶見)/HP,白細(xì)胞(WBC)(0～3)/HP。尿干化學(xué)的RBC、WBC、蛋白質(zhì)(PRO)≥1+為陽(yáng)性，<1+為陰性； UF-500i尿沉渣分析儀參考值(由Sysmex公司提供)：RBC男(0～17)/HP、女(0～27)/HP， WBC男(0～16)/HP、女(0～36)/HP，CAST(0～3)/μL，小圓上皮細(xì)胞(0～3)/HP。4項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果超過此范圍為陽(yáng)性。互相組合建立初步復(fù)檢規(guī)則。

1.3.2復(fù)檢規(guī)則的驗(yàn)證選取陽(yáng)性或潛在陽(yáng)性的標(biāo)本380份進(jìn)行3種方法的檢測(cè)，以顯微鏡檢查的結(jié)果為準(zhǔn)，評(píng)估該復(fù)檢規(guī)則的真假陽(yáng)性率和真假陰性率及復(fù)檢率。以評(píng)價(jià)此復(fù)檢規(guī)則是否可行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件做統(tǒng)計(jì)分析。

2結(jié)果

2.1尿液自動(dòng)化分析的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則UF-500i尿沉渣分析儀和US-200尿干化學(xué)分析儀的檢測(cè)結(jié)果，與顯微鏡鏡檢結(jié)果相比較，如果均為陰性或均為陽(yáng)性而且陽(yáng)性量級(jí)相當(dāng)時(shí)，結(jié)果的相符性很好，不需要復(fù)檢；下面情況需要復(fù)檢，見表1。

表1　尿液自動(dòng)化分析的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則

注：-表示無該項(xiàng)結(jié)果。

2.2復(fù)檢規(guī)則驗(yàn)證的結(jié)果評(píng)估該復(fù)檢規(guī)則的真假陽(yáng)性率和真假陰性率及復(fù)檢率見表2。UF-500i檢測(cè)尿液有形成分RBC、WBC、CAST、SRC的假陽(yáng)性率各為7.5%、13.1%、38.1%、29.4%,假陰性率各為0%、0%、7.1%、5.2%。復(fù)檢率42.7%。4個(gè)檢測(cè)參數(shù)總的假陰性率1.3%(5/380)，滿足復(fù)檢評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)假陰性率小于5%的要求，且出現(xiàn)假陰性的5例病例里沒有嚴(yán)重的、活動(dòng)性的腎臟疾病。

表2　UF-500i、US-200與顯微鏡檢查尿液各參數(shù)的結(jié)果分析(n)

注：-表示無該項(xiàng)結(jié)果。

3討論

對(duì)尿液顯微鏡檢測(cè)是最早使用的、公認(rèn)的尿液有形成分的檢測(cè)方法，而尿液檢查流水線的使用大大提高了檢測(cè)的速度與效率[2]。由于尿液有形成分的復(fù)雜性、不穩(wěn)定性，尿液沉渣檢查原理的局限性；尿液干反應(yīng)的干擾因素的影響，使尿液的沉渣和干化學(xué)的結(jié)果不匹配，可信性降低，必須要進(jìn)行尿液沉渣顯微鏡復(fù)檢。為了使UF-500尿沉渣分析儀得到合理應(yīng)用，提高工作效率，并能對(duì)異常結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化復(fù)檢，最大可能地避免假性的結(jié)果，確定尿液有形成分顯微鏡復(fù)檢規(guī)則是有必要的。

尿液沉渣檢查或干化學(xué)檢查都存在反應(yīng)的指向性和局限性：尿干化學(xué)反應(yīng)里的LEU反應(yīng)是與中性粒細(xì)胞反應(yīng)，葡萄糖尿或高比重尿會(huì)降低檢驗(yàn)結(jié)果；尿潛血反應(yīng)對(duì)血紅蛋白和肌紅蛋白敏感，高比重尿會(huì)降低靈敏度，同時(shí)分泌物污染也會(huì)造成假陽(yáng)性。尿蛋白質(zhì)反應(yīng)對(duì)多種蛋白質(zhì)呈陽(yáng)性反應(yīng)，對(duì)清蛋白最靈敏，但對(duì)于高度緩沖的堿性尿有可能假陽(yáng)性；尿液沉渣檢查通過流式細(xì)胞技術(shù)(FCM)獲得細(xì)胞前散射光及前向熒光的強(qiáng)度參數(shù)，從而分析尿液中的有形成分。但儀器設(shè)定的光強(qiáng)度及其在散射圖中的分布區(qū)域是固定的，因此會(huì)造成各成分互相交叉，出現(xiàn)假陰陽(yáng)性。

本研究對(duì)380例陽(yáng)性或潛在陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行規(guī)則驗(yàn)證，經(jīng)分析得出結(jié)論。(1)UF-500i尿沉渣分析與US-200尿干化學(xué)分析結(jié)果相匹配的項(xiàng)目均為陰性或均為陽(yáng)性且量級(jí)相當(dāng)時(shí)，不需要復(fù)檢；(2)UF-500i沉渣分析儀的RBC、WBC假陰性率很低(表2)，當(dāng)UF-500i測(cè)得此兩項(xiàng)為陰性，而干化學(xué)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，需要鏡檢復(fù)檢鑒別：RBC方面可能尿液中存在過類氧化物酶的物質(zhì)，與血紅蛋白一樣具有相同的氧化色原的作用，從而造成潛血試驗(yàn)假陽(yáng)性；WBC方面可能是中性粒細(xì)胞破碎引起。(3)UF-500i沉渣分析儀的RBC、WBC為陽(yáng)性，而干化學(xué)結(jié)果為陰性時(shí)，必須復(fù)檢鑒定：RBC方面因素一般是尿液中存在大小形狀與RBC相近的結(jié)晶、細(xì)菌團(tuán)或真菌，如草酸鈣結(jié)晶或非定型結(jié)晶；WBC方面因素一般是尿液中的WBC以淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞為主，也有可能存在體積較小的SRC。(4)尿液SRC增加，常見于腎小管損壞或尿酸代謝障礙，UF-500i沉渣檢查SRC假陽(yáng)性率較高，僅次于CAST(表2)，SRC陽(yáng)性時(shí)需要復(fù)檢：引起假陽(yáng)性的因素多見于聚集的WBC、RBC、SRC。(5)UF-500i沉渣檢查CAST/P.C陽(yáng)性，不管干化學(xué)檢查的PRO結(jié)果如何，都要復(fù)檢。在尿液的有形成分檢查里，CAST假陽(yáng)性率最高，為38.1%，造成CAST假陽(yáng)性的因素有很多： 大量RBC、WBC或細(xì)菌成串通過檢測(cè)孔時(shí)，易被誤判； 大量上皮細(xì)胞翻折扭曲通過檢測(cè)孔時(shí)，易被誤判多，見于女性患者； 某些結(jié)晶堆積類似于CAST[3]；(6)黏液絲易被誤判為透明CAST，當(dāng)黏液絲大量存在時(shí)，其電阻強(qiáng)度和透明CAST接近而導(dǎo)致假陽(yáng)性[4]，因此，黏液絲陽(yáng)性且且沉渣與干化學(xué)結(jié)果不匹配時(shí)，檢測(cè)結(jié)果不可靠，必須復(fù)檢[5-6]；(7)當(dāng)非定型結(jié)晶、細(xì)菌黏附在黏液絲或纖維等類CAST物時(shí)，易被誤判為CAST/P.C。同時(shí)，由于尿沉渣分析儀不能區(qū)分CAST的種類，凡是提示CAST陽(yáng)性的標(biāo)本，都必須顯微鏡鏡檢以明確CAST的類型。

有的尿沉渣分析儀，例如IQ200 ELITE尿液顯微鏡鏡檢系統(tǒng)，采用影像分析術(shù)和自動(dòng)粒子識(shí)別系統(tǒng)原理，儀器將未離心尿液標(biāo)本，先用CCD數(shù)字?jǐn)z像機(jī)自動(dòng)捕獲500幅照片，然后進(jìn)行數(shù)字化圖形分析，與儀器儲(chǔ)存的26 000幅圖像的診斷粒子識(shí)別軟件進(jìn)行比較，最后定量報(bào)告尿液12種有形成分的數(shù)量。這種原理得到的結(jié)果，也存在一定的偏差，需要檢驗(yàn)人員在成像系統(tǒng)里翻查標(biāo)本的細(xì)胞圖像，以確定有形成分的正確歸類。

由此可見，通過建立合理的尿液有形成分分析流水線的復(fù)檢規(guī)則，可以在充分發(fā)揮尿液檢查自動(dòng)化分析優(yōu)勢(shì)的同時(shí)，又能指導(dǎo)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化，提高檢驗(yàn)質(zhì)量。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.13.039

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)13-1842-02

(收稿日期：2016-03-01修回日期：2016-05-10)