醫院冷鏈系統中胸腺五肽注射液及0.9%氯化鈉輸液的溫度穩定性考察

李　翔，劉皈陽，王　芳，陳　飛，黎春彤

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醫院冷鏈系統中胸腺五肽注射液及0.9%氯化鈉輸液的溫度穩定性考察

李翔，劉皈陽*，王芳，陳飛，黎春彤

解放軍總醫院第一附屬醫院藥劑藥理科，北京 100048

[摘要]目的考察胸腺五肽注射液及其0.9%氯化鈉輸液在醫院冷鏈系統中的穩定性。方法根據醫院入庫、藥房儲存、院內運輸和分發，以及病區配制和使用各環節中可能存在的溫度影響，將胸腺五肽注射液和0.9%氯化鈉輸液分別放置于不同溫度環境中，在不同時間取樣，用HPLC法測定其含量變化。結果兩個規格兩個廠家的胸腺五肽注射液在15、30 ℃下儲存，含量略有下降，但含量下降趨勢不顯著。在60 ℃儲存7 d含量分別下降至94.0%、95.4%，下降程度較大。胸腺五肽輸液在院內使用常溫下(20、25、30、35 ℃)、48 h內胸腺五肽含量RSD均<2%，表明其穩定性良好。結論胸腺五肽注射液及其0.9%氯化鈉輸液在醫院內運輸和病區使用環境下，含量穩定，安全隱患較小。但在極端高溫環境下其下降趨勢明顯，藥師及醫護人員需謹慎用藥。

[關鍵詞]胸腺五肽；注射液；溫度穩定性；HPLC

0引言

胸腺五肽是從胸腺生成素中提取的含有5個氨基酸殘基的小分子肽，位于胸腺生成素Ⅱ的第32～36位氨基酸片段，是其有效部位，藥理實驗和臨床應用均顯示其與胸腺生成素Ⅱ具有相同的生理功能和藥效[1]。臨床上胸腺五肽作為免疫調節劑，能夠雙向調節免疫功能失衡，增強免疫力，用于治療惡性腫瘤、慢性肝炎、自身免疫功能紊亂性疾病等[2-3]。

與很多肽類制劑一樣，胸腺五肽在水溶液中的穩定性差，注射液需要在2～8 ℃下冷藏儲存，需要冷鏈物流運輸。在冷鏈物流中溫度的控制成為制約其藥品質量的關鍵因素。醫院冷鏈系統作為整個冷鏈物流的終端，往往成為冷鏈體系的薄弱環節。本研究前期對本院的冷鏈管理現狀及可行的管理措施進行了研究和探討，發現在醫院藥品調配和使用過程中，不可避免地會發生超過貯藏溫度的情況，在此情況下，藥品能否繼續使用成為許多醫護人員和臨床藥師面臨的難題，亟需對其在醫院冷鏈系統中的溫度穩定性進行研究[4-5]。

目前，對胸腺五肽制劑本身的穩定性研究已有報道，但沒有針對醫院冷鏈系統中胸腺五肽注射液及其輸液的溫度穩定性的報道[6-7]。因此，本試驗根據醫院冷鏈系統的現狀，模擬了2個規格和廠家的胸腺五肽注射液的院內運輸，在不同時間段取樣，考察其溫度穩定性；并根據其用法用量選擇其中1 mg∶1 mL規格制劑，考察其0.9%氯化鈉輸液在院內運輸和病區儲存的多個不同溫度環境、不同時間段取樣，考察其溫度穩定性。

1儀器與試藥

Agilent 1200型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)，Mettler AE240電子天平(瑞士梅特勒公司)，立鶴牌302型電熱恒溫干燥箱(山東濰坊醫藥集團股份有限公司)。胸腺五肽對照品(50 mg/支，批號：140728-201405，中國食品藥品檢定研究院)；胸腺五肽注射液1 mL∶1 mg(海南中和藥業有限公司，批號：20131009)，胸腺五肽注射液1 mL∶10 mg(北京世橋生物制藥有限公司，批號：140527)；甲醇為色譜純，磷酸二氫鉀和氫氧化鈉為分析純，水為重蒸餾水。

2方法與結果

2.1實驗方案

2.1.1胸腺五肽注射液溫度穩定性考察取2個規格(A:1 mL∶1 mg,B:1 mL∶10 mg)的胸腺五肽注射液制劑各3批，每個批號平行分為3份樣品，每份8支，分別置于15、30、60 ℃的恒溫干燥箱中儲存，分別于0、1、2、3、4、5、6、7 d取出樣品，置于4 ℃冰箱中待測。

2.1.2胸腺五肽注射液A 0.9%氯化鈉輸液溫度穩定性考察取3批胸腺五肽注射液A進行試驗，每個批號平行配制5份輸液樣品，每份樣品由1支樣品用0.9%生理鹽水稀釋，終體積控制在250 mL。分別置于5、20、25、30、35 ℃溫度條件下，并在配制后0、1、2、3、4、6、8、12、18、24、36、48 h分別取樣，置于4 ℃冰箱中待測。

2.2色譜條件色譜柱：Agilent SB-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：磷酸鹽緩沖液(pH 7.0)-甲醇(88∶12)；檢測波長：275 nm；流速：1.0 mL/min；進樣量：5 μL；運行時間：10 min。理論板數胸腺五肽峰計算不低于3 000。

2.3對照品溶液的制備精密稱取胸腺五肽對照品10.8 mg，用流動相定量稀釋，制成質量濃度為108 μg/mL的對照品儲備液。精密量取胸腺五肽對照品儲備液5 mL，置25 mL量瓶中，用流動相定容，即得濃度為21.6 μg/mL的胸腺五肽對照品溶液。

2.4供試品溶液的制備

2.4.1胸腺五肽注射液A供試品溶液取胸腺五肽注射液A樣品1支，用流動相定量稀釋200倍，搖勻，即得。

2.4.2胸腺五肽注射液B供試品溶液取胸腺五肽注射液B樣品1支，用流動相定量稀釋1 000倍，搖勻，即得。

2.5方法學驗證

2.5.1專屬性試驗取胸腺五肽對照品溶液、胸腺五肽注射液A供試品溶液和空白溶液，按照“2.2”項下色譜條件，分別進樣，記錄色譜圖。未見明顯測定干擾，理論板數不低于6 000。結果見圖1。

2.5.2線性關系考察精密吸取胸腺五肽對照品溶液0.5、1.0、2.5、5.0、7.5 mL，置于10 mL容量瓶中，加甲醇定容，搖勻，即得系列對照品溶液。

圖1　對照品和供試品溶液的HPLC圖

將系列對照品溶液依次進樣，以胸腺五肽濃度(g/mL)為橫坐標(X)、峰面積為縱坐標(Y)繪制標準曲線，得回歸方程：Y=5.940 X+0.214(r=0.999 9，n=6)。結果表明，胸腺五肽在1.08～21.6 μg/mL范圍內與峰面積呈良好的線性關系。

2.5.3精密度試驗精密吸取胸腺五肽對照品溶液，按“2.2”項下色譜條件，連續進樣6次，測定峰面積。結果胸腺五肽峰面積的RSD為0.18%(n=6)，表明儀器的精密度良好。

2.5.4穩定性試驗取胸腺五肽注射液A樣品，按“2.4.1”項下方法分別制備供試品溶液，按“2.2”項下色譜條件，分別在0、2、4、8、16、24 h各進樣1次，測定峰面積。結果胸腺五肽注射液(1 mL∶1 mg)中胸腺五肽峰面積的RSD為0.98%(n=6)，表明供試品溶液在24 h內穩定性良好。

2.5.5重復性試驗取胸腺五肽注射液A樣品，按“2.4.1”項下方法分別制備6份供試品溶液，按“2.2”項下色譜條件，分別進樣測定。結果顯示胸腺五肽注射液A中胸腺五肽的平均含量為1.001 mg/mL，RSD為0.78%(n=6)，表明方法的重復性良好。

2.5.6回收率試驗取已知含量的胸腺五肽對照品(95.5%)，按照處方比例配制80%、100%、120%的模擬樣品進行HPLC測定，計算回收率，確定胸腺五肽HPLC測定的準確度。結果顯示，平均回收率(n=9)為100.4%，RSD為0.90%。見表1。

2.5.7溫度穩定性樣品含量測定按照“2.1”項下方案，分別處理樣品并定時收集溫度穩定性考察樣品。取2種規格的胸腺五肽注射液樣品，分別按照“2.4.1”和“2.4.2”項下方法稀釋處理樣品，即得供試品溶液。胸腺五肽注射液供試品溶液與胸腺五肽注射液A 0.9%氯化鈉輸液樣品，按照“2.2”項下色譜條件，進樣分析，記錄峰面積，計算胸腺五肽含量，分析其含量在不同溫度條件下隨時間的變化趨勢。

表1　回收率試驗結果(n=9)

2.5.8胸腺五肽注射液溫度穩定性考察結果以不同時間3批胸腺五肽注射液中胸腺五肽的平均含量(c，mg/mL)為縱坐標、時間(t，d)為橫坐標作圖，結果見圖2。由圖2可見，兩個規格兩個廠家的胸腺五肽注射液在3個不同溫度下儲存，含量均有下降的趨勢，但下降均未達到90%。其中胸腺五肽注射液A在60 ℃儲存7 d，含量下降至94.0%，下降程度最大；胸腺五肽注射液B在60 ℃下儲存7 d,含量下降0.478 9 mg，含量下降最多。

圖2　胸腺五肽注射液溫度穩定性考察結果(n=3)

2.5.9胸腺五肽注射液A 0.9%氯化鈉輸液溫度穩定性考察將按照“2.1”項下方案實施的3批胸腺五肽注射液A配制成0.9%氯化鈉輸液，按規定時間采集樣品，HPLC法測定胸腺五肽含量(mg/mL)，計算3批樣品的平均含量(mg/mL)，考察不同溫度下，48 h內平均含量的RSD。結果顯示，RSD均<2%，表明胸腺五肽輸液在院內使用常溫下(20～35 ℃)、48 h內穩定性良好。結果見表2。

表2　胸腺五肽注射液A 0.9%氯化鈉輸液

3討論

目前全國醫院冷鏈系統在各個醫院的差別較大，冷鏈儲存設施和投入水平參差不齊[8-9]。醫院作為藥品冷鏈系統的終端，往往成為影響冷藏藥品安全的薄弱環節。筆者結合本院的實際情況，分別模擬了胸腺五肽注射劑在院內運輸和病區使用的情況。同時選用了兩個不同廠家、不同規格的樣品，每個品種選擇3個不同批次，計算3批的平均含量作為最終考察指標，數據具有代表性。

胸腺五肽注射液在進入醫院后，需入庫驗收、藥房擺藥和調劑發放的過程，該過程中溫度控制波動大，經歷時間較長，因此本試驗設置了15、30、60 ℃溫度環境，時間周期確定為7 d。而其輸液在配制后需在病區儲存、護士調配和患者使用，病區溫度波動較小，經歷時間較短，配制后24 h內使用，因此本試驗設置了20、25、30、35 ℃，考察時間確定為48 h。本試驗中胸腺五肽注射劑在3個不同溫度下儲存，含量均有下降的趨勢，但均未下降至初始濃度的90%。在15、30 ℃環境中其含量基本不受影響，由此說明在醫院環境(15～30 ℃)中，院內運輸少于7 d時，胸腺五肽注射液中胸腺五肽的含量變化不大，溫度對其質量影響較小，安全隱患很小，可在臨床繼續使用。而在極端高溫(60 ℃)條件下，其下降趨勢較明顯，在儲存第3天開始明顯下降，第7天含量下降至初始濃度的95%，提示藥師和醫護人員需謹慎使用。

胸腺五肽輸液在院內使用常溫下(20、25、30、35 ℃)、48 h內胸腺五肽含量RSD均<2%，表明其穩定性良好。由此提示，胸腺五肽輸液配制后可在病區短時儲存，建議儲存時間控制在24 h內，病區護士在請領藥品時需控制請領時間，不宜過早；在安排輸液順序時，需在有條件的情況下優先安排冷鏈藥品。

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Temperature stability of thymopentin injection and 0.9% sodium chloride intravenous infusion in hospital cold-chain system

LI Xiang,LIU Gui-yang*,WANG Fang,CHEN Fei,LI Chun-tong

(Department of Pharmacy,First Affiliated Hospital of PLA General Hospital,Beijing 100048,China)

[Abstract]ObjectiveTo evaluate the temperature stability of thymopentin injection and 0.9% sodium chloride intravenous infusion in hospital cold-chain system.MethodsAccording to the temperature condition in hospital cold-chain system(entering-storage-distribution-preparation-using),thymopentin injection and 0.9% sodium chloride intravenous infusion were stored at different temperatures.Samples were collected periodically during the storage.The contents of thymopentin in these samples were determined by HPLC to evaluate the stability.ResultsThe contents of thymopentin in thymopentin injections declined slightly during the storage at 15 and 30 ℃.Contents of samples stored at 60 ℃ for 7 days was declined to 95.4% and 94.0% for two norms (1 mL∶1 mg and 1 mL∶10 mg)under 60 ℃ respectively.The temperature stability of thymopentin 0.9% sodium chloride intravenous infusion stored at 20 ℃,25 ℃,30 ℃ and 35 ℃ within 48 h was good,with RSD <2%.ConclusionThe thymopentin injection and 0.9% sodium chloride intravenous infusion shows good temperature stability in hospital cold-chain system and can be used safely.However,the content declining of samples stored at high temperature needs be paid more attention.

Key words：Thymopentin;Injection;Temperature stability;HPLC

收稿日期：2015-10-08

基金項目：解放軍總醫院臨床科研扶持基金(2014FC-GLCX-1001)

*通信作者

DOI:10.14053/j.cnki.ppcr.201606028