日立7170A生化儀交叉污染程序設(shè)置去除血清鎂檢測(cè)干擾

劉　瑾，謝雪蓓

(中國(guó)人民解放軍第一一八院檢驗(yàn)科,浙江溫州 325000)

·臨床研究·

日立7170A生化儀交叉污染程序設(shè)置去除血清鎂檢測(cè)干擾

劉瑾，謝雪蓓

(中國(guó)人民解放軍第一一八院檢驗(yàn)科,浙江溫州 325000)

目的血清鎂檢測(cè)時(shí)易受含鎂離子試劑污染，通過(guò)防交叉污染程序去除血清鎂檢測(cè)干擾。方法采用日立7170A型全自動(dòng)生化分析儀，以單獨(dú)測(cè)定血清鎂作為對(duì)照組，以已設(shè)置防交叉污染程序(A組)和未設(shè)置防交叉污染程序(B組)作為研究組。取新鮮混合血清在A、B兩組條件下與三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶及其同工酶同時(shí)檢測(cè)，觀察研究組與對(duì)照組之間的偏倚率。結(jié)果觀察A、B兩組條件下血清鎂測(cè)定結(jié)果與對(duì)照組單獨(dú)測(cè)定血清鎂結(jié)果的偏倚率，其中A組偏倚率為1.10%，B組偏倚率為54.95%。結(jié)論三酰甘油、肌酸激酶試劑含有鎂離子，與血清鎂同時(shí)測(cè)定時(shí)，由于試劑探針的殘留攜帶，出現(xiàn)交叉污染，干擾血清鎂檢測(cè)，出現(xiàn)假性升高。通過(guò)日立7170A型全自動(dòng)生化分析儀防交叉程序設(shè)置，增加試劑針沖洗次數(shù)，可有效避免干擾。

三酰甘油；堿性磷酸酶；肌酸激酶同工酶；血清鎂；交叉污染

現(xiàn)代生物化學(xué)檢驗(yàn)儀器自動(dòng)化普及，如何利用自動(dòng)化儀器性能保證檢驗(yàn)質(zhì)量是目前需要重視的問(wèn)題。在日常生物化學(xué)檢驗(yàn)過(guò)程中，試劑間的交叉污染現(xiàn)象引起檢測(cè)結(jié)果異常的事件頻頻發(fā)生，這是由于自動(dòng)化儀器結(jié)構(gòu)因素，或者反應(yīng)過(guò)程中因試劑或反應(yīng)液交叉污染引起其他項(xiàng)目的測(cè)定結(jié)果受到干擾。全自動(dòng)生化分析儀的試劑針需接觸試劑盤(pán)里的各種試劑，不同項(xiàng)目之間的測(cè)定是連續(xù)的，而試劑針在每個(gè)項(xiàng)目測(cè)定時(shí)試劑吸取前僅有一個(gè)短暫的水沖洗過(guò)程，且隨著儀器長(zhǎng)時(shí)間的使用，儀器性能改變，如存在試劑污染現(xiàn)象，將會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成極大影響[1]。筆者在工作中發(fā)現(xiàn)，一些血清鎂在自動(dòng)化儀器組合項(xiàng)目檢測(cè)時(shí)結(jié)果經(jīng)常偏高，但經(jīng)過(guò)單獨(dú)復(fù)查結(jié)果卻是正常的。本文通過(guò)設(shè)置日立7170A型全自動(dòng)生化分析儀防交叉污染功能，增加試劑探針沖洗次數(shù)，觀察是否能去除血清鎂在與三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶及其同工酶組合檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)的正干擾[2]。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源新鮮混合血清10份，均為本院檢驗(yàn)科接收標(biāo)本，排除脂血、溶血標(biāo)本。

1.2儀器與試劑日立7170A型全自動(dòng)生化分析儀。血清鎂檢測(cè)試劑購(gòu)自寧波賽克生物技術(shù)有限公司。三酰甘油檢測(cè)試劑購(gòu)自浙江伊利康生物技術(shù)有限公司，試劑成分包括三磷腺苷、甘油激酶、N-乙基-N(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽等。堿性磷酸酶購(gòu)自上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司，試劑成分包括醋酸鎂、硫酸鋅、N-羥乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)、硫酸鋅(AMP)等。肌酸激酶購(gòu)自上海科華生物工程股份有限公司，試劑成分包括醋酸鎂、5-磷酸二腺苷、6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)等。肌酸激酶同工酶購(gòu)自上海科華生物工程股份有限公司，試劑成分包括醋酸鎂、乙酰半胱氨酸等。

1.3程序設(shè)置(1)在日立7170A全自動(dòng)生化分析儀上打開(kāi)實(shí)用工作菜單中的交叉污染(Carry Over)界面；(2)用光標(biāo)在避免試劑針交叉污染條件一覽表中指定要實(shí)行的條件號(hào)碼；(3)選擇右側(cè)(Edit)鍵進(jìn)入編輯試劑針窗口；(4)設(shè)定可造成試劑交叉污染的試劑針號(hào)；(5)設(shè)定可造成影響的試驗(yàn)項(xiàng)目(Test)、試劑類(lèi)型(Type)；(6)設(shè)定可受到影響的試驗(yàn)項(xiàng)目(Test)、試劑類(lèi)型(Type)；(7)設(shè)定清洗劑的位置(Position)、容量(Volume)；(8)如三酰甘油、肌酸激酶對(duì)血清鎂的干擾，按上述步驟進(jìn)行防交叉污染設(shè)置，其工作界面顯示見(jiàn)表1。表1中述及清洗劑位置wash3即儀器清洗槽1D3，可用堿性清洗液作為防交叉污染清洗劑[3]。清洗劑容量一定要高于三酰甘油、肌酸激酶檢測(cè)R1試劑所設(shè)的量，如此試劑針才不會(huì)有試劑殘留，起到防交叉污染作用。

表1　試劑針交叉污染設(shè)置

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間數(shù)據(jù)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

對(duì)照組與A、B兩組血清鎂檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。將A組和B組血清鎂測(cè)定結(jié)果與對(duì)照組進(jìn)行比對(duì)分析。A組血清鎂結(jié)果與對(duì)照組接近，其偏倚率為1.10%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。B組血清鎂結(jié)果遠(yuǎn)高于對(duì)照組，其偏倚率為54.95%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在A組已設(shè)置防交叉污染程序條件下，有效避免了血清鎂與三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶及其同工酶同時(shí)測(cè)定時(shí)造成的交叉污染。

表2　血清鎂檢測(cè)結(jié)果

注：-表示無(wú)數(shù)據(jù)。

3討論

全自動(dòng)生化儀清洗系統(tǒng)的工作模式使一個(gè)項(xiàng)目會(huì)對(duì)緊隨其后的一個(gè)甚至幾個(gè)項(xiàng)目的測(cè)試帶來(lái)一定程度的試劑污染，并且隨著儀器的長(zhǎng)時(shí)間使用，儀器性能也會(huì)下降，試劑交叉污染的程度會(huì)有所加劇[4]。上述試驗(yàn)證明，三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶試劑中含有鎂離子，鎂離子是三酰甘油、肌酸激酶等試劑中不可缺少的組成成分[5]，與血清鎂同時(shí)測(cè)定出現(xiàn)正干擾。因?yàn)閮x器在正常程序情況下對(duì)試劑針無(wú)法完全沖洗干凈，所以三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、血清鎂同時(shí)測(cè)定會(huì)出現(xiàn)交叉污染，影響血清鎂檢測(cè)結(jié)果[6]。筆者通過(guò)相關(guān)資料查找，以及儀器操作指南中的相關(guān)說(shuō)明，有兩種方法可消除此干擾。一種是重新設(shè)定項(xiàng)目的位置，另一種是通過(guò)儀器防交叉污染程序設(shè)置消除干擾[7]。由于生化分析儀的項(xiàng)目設(shè)置是根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室的具體情況和試劑廠家提供的儀器參數(shù)決定的，重新編排項(xiàng)目位置可能對(duì)其他項(xiàng)目存在交叉污染，一般不建議重新設(shè)定[8]。本實(shí)驗(yàn)室血清鎂檢測(cè)是由于自動(dòng)生化分析儀試劑探針的殘留攜帶，造成檢測(cè)項(xiàng)目間的試劑交叉污染，影響血清鎂檢測(cè)結(jié)果[9]。所以本文采用日立7170A型全自動(dòng)生化分析儀自帶防交叉污染程序，增加試劑針沖洗次數(shù)，有效避免了血清鎂與三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶同時(shí)測(cè)定時(shí)出現(xiàn)的交叉污染。

生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展越來(lái)越快，項(xiàng)目種類(lèi)也越來(lái)越多，儀器的自動(dòng)化程度也越來(lái)越高。種類(lèi)繁多的項(xiàng)目也引起項(xiàng)目間因試劑成分和反應(yīng)液產(chǎn)生交叉污染。因此，在試驗(yàn)過(guò)程中，一定要了解項(xiàng)目試劑成分和反應(yīng)過(guò)程中所產(chǎn)生的物質(zhì)是否對(duì)其他項(xiàng)目有干擾，從而合理編排儀器程序避免交叉污染。

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2016-01-28修回日期：2016-03-18)

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.12.039

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1673-4130(2016)12-1691-02