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杜仲續斷藥對不同配比對SAMP6小鼠脂代謝的影響

2016-06-22 05:15:36段衛華于佳慧高秀梅
中國民族民間醫藥·上半月 2016年5期

段衛華 于佳慧 高秀梅

【摘要】目的:觀察中藥杜仲、續斷藥對配伍前后對于SAMP6小鼠脂代謝的影響。方法:采用快速老化SAMP6小鼠及其同源正常對照SAMR1為研究對象,應用杜仲續斷1∶[KG-*3/5]1配伍及單味藥進行治療12周,觀察血清和肝臟的總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等指標變化,并進行組間比較。結果:與模型組相比,杜仲續斷1∶[KG-*3/5]1配伍低劑量組能顯著降低血清低密度脂蛋白,升高血清高密度脂蛋白,顯著降低血清和肝組織的LDL-C水平,升高血清HDL-C水平,降低肝組織中HDL-C水平。結論:杜仲續斷藥對具有調節脂質代謝的作用。

【關鍵詞】杜仲;續斷;配伍;衰老;SAMP6小鼠;脂代謝

【中圖分類號】R285.5【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517(2016)09-0014-02

根據《中國人口老齡化發展趨勢預測研究報告》預測,到2020年我國老年人口將達到2.48億。隨著社會人口的老齡化,老年性骨質疏松癥、老年性學習記憶受損及AD等與衰老相關疾病發病率明顯增高,嚴重影響老年人的生活質量和健康水平。隨著增齡,血脂異常患病率增高[1],除氧化脂質除誘發動脈粥樣硬化外,較高的血清總膽固醇水平是老年人AD患病率增加的危險因子[2-3]。與此同時,伴高脂血癥的骨質疏松患者存在由氧化脂質誘導的骨PTH抵抗[4],骨形成減少。杜仲與續斷配伍是中醫臨床常用藥對,雖然對于單味藥研究較多,但對于二者配伍的研究報道較少。研究以快速老化SAMP6及其同源正常對照SAMR1小鼠為研究對象,觀察杜仲和續斷配伍前后對動物模型的血液和肝臟中脂代謝主要生化指標的影響,為中藥配伍理論和中醫臨床提供實驗依據。

1儀器與材料

1.1實驗動物6月齡清潔級雄性快速老化骨質疏松模型小鼠SAMP650只,正常同源對照小鼠SAMR110只,均購自天津中醫藥大學第一附屬醫院實驗動物中心SAM鼠繁育屏障系統,合格證號為實驗動物(飼)字0003499。

1.2藥品及其制備杜仲、續斷生藥購自安國市順全隆中藥材有限公司,由天津中醫藥大學中藥鑒定教研室馬琳教授鑒定。杜仲生藥、續斷生藥分別用70%乙醇10倍量回流提取2次,每次2h,合并提取液濃縮,真空干燥得杜仲、續斷提取物。按照上述提取方法,杜仲續斷按照生藥量1:1比例配伍,制備杜仲續斷配伍提取物。

1.3儀器VITALAB MTCRO半自動生化儀(荷蘭威圖公司)。

1.4試劑總膽固醇測定試劑盒(TC,批號:111271)、甘油三酯測定試劑盒(TG,批號:114951)、低密度脂蛋白-膽固醇測定試劑盒(LDL-C,批號:110421)、高密度脂蛋白-膽固醇測定試劑盒(HDL-C,批號:110431),以上試劑盒均由北京中生北控生物科技股份有限公司生產。

2方法

2.1分組及給藥正常老化對照SAMR1組10只,SAMP6小鼠按照體重隨機分為SAMP6組、配伍高劑量組、配伍低劑量組、杜仲組、續斷組5組,每組10只。SAMR1組和SAMP6組分別灌服蒸餾水;配伍高劑量組:灌服配伍提取物(每日杜仲、續斷各用3g生藥/kg);配伍低劑量組:灌服配伍提取物(每日杜仲、續斷各用1.5g生藥/kg);杜仲組和續斷組:分別灌胃杜仲、續斷提取物(每日用藥劑量均為3g生藥/kg)。各組每日灌胃1次,連續給藥12周。實驗期間自由飲水攝食。每周稱量1次體重,根據體重變化調整給藥量。

2.2標本采集與處理

2.2.1血清脂質檢測用藥治療第12周末,所有小鼠禁食不禁水8h,末次灌胃給藥lh后,乙醚吸入麻醉,摘眼球取血,分離血清,按照試劑盒要求檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C。

2.2.2肝臟脂質檢測取血后迅速取出肝臟,勻漿,離心取上清液,按照試劑盒要求檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C。

2.3統計學分析采用SPSS17.0統計軟件分析實驗數據,用均數±標準差(x±s)表示,采用單因素方差分析(One-WayANOVA),方差齊采用LSD法,方差不齊采用Dunnett′s T3法比較,進行組間兩兩比較,P<0.05表示差異有統計學意義。

3結果

3.1杜仲續斷藥對不同配比對SAMP6小鼠血清脂質的影響SAMP6組小鼠血清LDL-C水平顯著高于SAMR1組(P<0.05)。灌胃給藥12周,配伍低劑量組和杜仲組小鼠血清LDL-C水平顯著低于SAMP6組(P<0.05),配伍低劑量組小鼠血清HDL-C水平顯著高于SAMP6組,配伍低劑量組的HDL-C/TC有升高趨勢。見表1。

3.2杜仲續斷藥對不同配比對SAMP6小鼠肝組織脂質的影響SAMP6組肝組織LDL-C,HDL-C,HDL-C/TC均顯著高于SAMR1組(P<0.01,P<0.05)。經治療12周后,配伍低劑量組肝組織TG顯著低于SAMP6組(P<0.01),配伍低劑量組和杜仲組肝組織LDL-C顯著低于SAMP6組(P<0.05,P<0.01),配伍高、低劑量組和杜仲組肝組織HDL-C顯著低于SAMP6組(P<0.01,P<0.05),配伍高劑量組和配伍低劑量組肝組織HDL-C/TC顯著低于SAMP6組(P<0.01,P<0.05)。見表2。

4討論

中醫并無高脂血癥的病名,認為其病因病機與痰濁、瘀血等有關,肝脾腎虛衰,致痰瘀內生,以臟虛為本,特別是腎虛,痰濁瘀血內阻為標,屬本虛標實之證[5]。《景岳全書》云:“腎主水,水泛亦為痰。故痰之化無不在脾,痰之本無不在腎”。臨床治療高脂血癥杜仲、續斷為常用補腎中藥,均具有補肝腎,強筋骨,安胎等功效。藥理研究表明,杜仲和續斷均具有抗骨質疏松、神經保護、調節血脂、抗衰老等多種藥理作用[6-8]。SAMP6小鼠為快速自發老年性骨質疏松模型,且血糖、甘油三酯、胰島素水平、瘦素水平、肝脂質水平均高于同齡SAMR1和AKR/J小鼠,并具肥胖癥和高脂血癥[9]。

研究發現,與SAMR1組相比,SAMP6小鼠血清LDL-C顯著升高,肝組織LDL-C、HDL-C、HDL-C/TC顯著升高。經給藥治療后,配伍低劑量組和杜仲組小鼠血清LDL-C水平顯著低于SAMP6組。配伍低劑量組小鼠血清HDL-C水平顯著高于SAMP6組,HDL-C/TC有升高趨勢。配伍低劑量組肝組織TG和LDL-C、杜仲組肝組織LDL-C均顯著低于SAMP6組,配伍高、低劑量組和杜仲組肝組織中HDL-C水平顯著低于SAMP6組。研究結果表明,杜仲續斷配伍后能顯著降低血清和肝組織的LDL-C水平,升高血清HDL-C水平,降低肝組織中HDL-C水平,提示杜仲續斷配伍使用可調節血脂水平,具有提高機體轉運和清除膽固醇的能力,調節脂質代謝的作用。

參考文獻

[1]劉麗君,賀佩祥,羅湘杭,等.健康成年男性血脂隨年齡的變化規律及血脂異常的分布特征[J].中國當代醫藥,2010,17(2):9-11.

[2]Reiman EM,Chen K,Langbaum JB,et al.Higher serum total cholesterol levels in late middle age are associated with glucose hypometabolism in brain regions affected by Alzheimer's disease and normal aging[J]. Neuroimage,2010,49(1):169-76.

[3]Caselli RJ, Chen K, Lee W, et al.Correlating cerebral hypometabolism with future memory decline in subsequent converters to amnestic pre-mild cognitive impairment[J]. Arch Neurol, 2008,65(9):1231-6.

[4]Sage AP, Lu J, Atti E, et al.Hyperlipidemia induces resistance to PTH bone anabolism in mice via oxidized lipids[J]. J Bone Miner Res,2011,26(6):1197-206.

[5]賈麗麗,陳方紅,李艷婷,等.中醫藥治療高脂血癥的臨床研究進展[J].湖南中醫雜志,2014,30(11):180-181.

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[7]Park.Sun Ae,Choi.Myung-Sook Kim,Myung-Joo.Jung,et al.Hypoglycemic and hypolipidemic action of Du-zhong (Eucommia ulmoides Oliver) leaves water extract in C57BL/KsJ-db/db mice. [J].Journal of Ethnopharmacology,2006, 107(3):412-417.

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[9]Niimi K, Takahashi E, Itakura C. Adiposity-Related Biochemical Phenotype in Senescence -Accelerated Mouse Prone 6 (SAMP6) [J] . Comparative Medicine,2009, 59(5):431-436.

(收稿日期:2016.03.17)

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