S100A8、S100A9蛋白在急性肺損傷新生兒血清中的動態變化及意義

殷其改，郝　麗，楊海燕，苗　莉

(徐州醫學院附屬連云港第一人民醫院新生兒科，江蘇連云港 222000)

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S100A8、S100A9蛋白在急性肺損傷新生兒血清中的動態變化及意義

殷其改，郝麗，楊海燕，苗莉

(徐州醫學院附屬連云港第一人民醫院新生兒科，江蘇連云港 222000)

[摘要]目的探討S100A8、S100A9蛋白在急性肺損傷(ALI)新生兒血清中的動態變化。方法選擇該院2011年1月至2013年12月收治的ALI患兒30例(ALI組)、濕肺患兒30例(濕肺組)及同期產科出生的健康新生兒30例(對照組)，采取酶聯免疫吸附測定(ELISA)法分別檢測各組對象S100A8及S100A9蛋白的動態變化。結果ALI組在發病第1、3、7天血清S100A8、S100A9蛋白均明顯高于濕肺組及對照組，差異有統計學意義(P<0.01)，ALI組S100A8蛋白在發病第1天升高最為明顯[(187.29.±29.71) pg/mL]，S100A9蛋白在發病第3天升高最為明顯[(280.01±42.29 )pg/mL]，差異有統計學意義(P<0.01)，第7天時二者均有不同程度下降。濕肺組S100A8、S100A9蛋白較對照組升高，但差異無統計學意義(P>0.05)。結論S100A8、S100A9蛋白參與了新生兒ALI的發病，對新生兒ALI早期診斷、治療及預后有著一定的潛在臨床應用價值。

[關鍵詞]嬰兒，新生；急性肺損傷；S100A8蛋白；S100A9蛋白

新生兒急性肺損傷(acute lung injury,ALI)是新生兒疾病中常見的危重癥，嚴重影響著患兒的生存質量。急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS )是ALI的嚴重形式。Flori 等[1]曾統計兒童ALI的病死率為22%。有研究認為新生兒ARDS病死率與成人和兒童相似，為50%～60%[2]。由于ARDS是ALI連續病理過程中最嚴重的階段，所有ARDS均經歷ALI，而ALI并不一定發展成ARDS[3]。早期發現并及時有效的治療ALI可以阻斷其病情繼續向ARDS發展，從而降低ALI死亡率。目前針對ALI/ARDS的研究多為成人，對新生兒的ALI/ARDS研究甚少，本研究以ALI的新生兒為研究對象，采用酶聯免疫吸附測定(ELISA)法檢測患兒血清S100A8、S100A9蛋白的動態變化，探討其在新生兒ALI發病早期診斷中的意義。

1資料與方法

1.1一般資料選擇本院2011年1月至2013年12月收治的ALI患兒30例(ALI組)，其中男18例，女12例；胎齡37～42周，日齡1～5 d；體質量2.4～4.5 kg；敗血癥4例，擇期剖宮產患兒8例，重度窒息5例，新生兒缺氧缺血性腦病4例，休克4例，胎糞吸入綜合征3例，化膿性腦膜炎2例；30例患兒中，22例行機械通氣治療，19例治愈，7例好轉，4例放棄治療后死亡。新生兒ALI/ARDS診斷標準包括：(1)有發病的高危因素；(2)急性起病，呼吸頻數和(或)呼吸窘迫；(3)低氧血癥，動脈血氧分壓(PaO2)與吸入氧濃度(FiO2)比值，<200 mm Hg診斷為ARDS，< 300 mm Hg 診斷為ALI；(4)X線胸片顯示雙肺彌散浸潤性陰影伴肺水腫改變;(5)肺毛細血管楔壓(PCWP)≤18 mm Hg或臨床能除外心源性肺水腫。凡符合以上5項可診斷[4]。選擇同期在本院新生兒科住院的濕肺患兒30例(濕肺組)，其中男17例，女13例；胎齡37+4～42+3周，日齡1～3 d，出生體質量2.8～4.5 kg。濕肺診斷參照實用新生兒學[5]。選擇本院產科同期出生的健康足月兒30例作為對照組，其中男14例，女16例；胎齡37～41+6周，日齡1～4 d，3組對象的胎鈴、出生體質量及日齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1儀器及試劑S100A8、S100A9蛋白測試盒購自上海西塘生物科技有限公司，實驗嚴格按照試劑盒操作說明進行，由專業檢驗師進行檢驗。

1.2.2觀察指標及測定方法ALI組及濕肺組于入院后第1、3、7天抽取靜脈血2 mL，放于加有抗凝劑的塑料試管中，離心10 min 后，取上清液-20 ℃保留備用。采用ELISA法測定各組各個時間點的S100A8、S100A9蛋白的水平，對照組新生兒僅抽取生后第1天靜脈血測定以上2個指標的水平。

2結果

2.1各組對象S100A8蛋白水平的比較入院第1天ALI組S100A8蛋白較對照組及濕肺組明顯升高(P<0.01)，而在第3天逐漸下降，第7天下降明顯，但與濕肺組相比明顯升高(P<0.05)；濕肺組在第1天S100A8蛋白較對照組有升高，但差異無統計學意義(P>0.05)；濕肺組在3個時間點S100A8蛋白比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1　3組對象各時間點S100A8蛋白水平

a：P<0.01，與ALI組比較；-：此項無數據。

2.2各組對象S100A9蛋白水平的比較入院第1天ALI組S100A9蛋白水平較對照組及濕肺組明顯升高(P<0.05)；第3天ALI組S100A9蛋白達到高峰，且與第1天比較差異有統計學意義(P<0.05)；第7天ALI組S100A9蛋白逐漸下降，與第1、3天比較差異有統計學意義(P<0.05)；ALI組與濕肺組各個時間段S100A9蛋白水平比較，差異有統計學意義(P<0.01)，但濕肺組3個時間點S100A9蛋白表達水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)；濕肺組與對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表2　3組對象各時間點S100A9蛋白水平

a：P<0.01，與同組入院第1天比較；b：P<0.01，與同組入院第3天比較；c：P<0.01，與ALI組比較；-：此項無數據。

3討論

新生兒ALI/ARDS是由多種原因引起的肺部彌散性損害,以頑固性低氧血癥、呼吸窘迫、肺順應性下降和彌散性滲出為主要特征，ARDS是ALI的嚴重形式。肺部是全身最易受損的首位靶器官，ALI/ARDS易致嚴重低氧血癥,進而引起其他臟器功能不全,甚至多臟器功能衰竭。近年來，在新生兒重癥監護室(NICU)病房中ALI逐年增多，嚴重的危害著新生兒的健康。ALI病情危重，進展快，要取得肺組織做病理學診斷是不現實的，因此新生兒ALI/ARDS的合理診斷標準應充分考慮新生兒的特殊解剖生理及病理特點[6]，如何做到早期診斷、早期預防并及時干預，對降低患兒的死亡率、提高生存率有著重要的意義。

ALI/ARDS發病機制非常復雜，確切機制尚不完善明確，多數學者認為ALI/ARDS發生、發展的中心環節是多種損傷因素導致的瀑布式炎癥級聯反應，其發病機制與多種因素有關，細胞因子的過渡釋放、中性粒細胞(PMN)介導的氧中毒、機械通氣等均會造成肺損傷。因此ALI/ARDS不僅僅是單純意義上的肺部疾病，更重要的是多種炎癥細胞及其釋放的炎性介質和細胞因子間接介導的肺炎癥反應，也是全身系統炎癥疾病的肺部表現。

目前發現S100蛋白家族共有21個成員,其中與肺部疾病相關的主要有S100A8、S100A9、S100A12,S100蛋白在ALI發病中的作用機制可能與促進嗜PMN的遷移、細胞因子的相互作用、NF-κB、促進炎癥因子的表達等多種因素有關。有研究表明，S100A8和S100A9在介導氣道上皮炎癥、肺損傷、血栓、缺血性腦損傷等方面均有作用[7]，多項研究顯示S100A8、S100A9、S100A12這3種蛋白參與炎癥反應，尤其是S100A8蛋白[8]。體外研究顯示，S100A8能夠在特定條件下刺激炎癥細胞釋放炎癥蛋白和炎癥介質，直接參與炎癥疾病過程[9]。Chang等[10]通過對ARDS患者及健康者進行S100A8檢測發現，與健康者比較，ARDS患者的氣管肺泡灌洗液中S100A8的表達量明顯增加；Lorenz等[11]也證實，在成人ARDS患者的支氣管肺泡灌洗液中，S100A12、S100A8及S100A9的水平明顯升高，并提出S100蛋白可能參與了呼吸道的炎癥。在慢性肺病纖維化患者的血清中及肺部感染性疾病中有一種高表達的抗原蛋白，并證實其為S100A8/S100A9蛋白[12]。有學者提出，血清中S100A8及S100A9水平可作為肺部病變的標志物[13],由此可見S100A8及S100A9蛋白可能通過不同的機制參與了ALI的發病過程。

本研究發現，在新生兒ALI發病第1天，血清S100A8蛋白明顯升高，第3天時逐漸下降，第7天時明顯下降，濕肺組及對照組血清中S100A8蛋白無明顯升高，而ALI組S100A9蛋白在第3天升高較為明顯，第7天時下降，同樣在濕肺組雖有升高，但與對照組比較差異無統計學意義(P>0.05)，提示S100A8、S100A9在ALI的形成過程中不同時間的表達高峰不同，S100A8蛋白表達較早，提示此兩項指標可能在ALI發病過程中起著不同的作用。在ALI的發病機制及檢測指標尚不完善的情況下，通過檢測新生兒ALI血漿S100A8、S100A9蛋白水平，對臨床上早期干預具有重要的指導意義，為今后開展S100蛋白受體拮抗劑、治療ALI提供理論依據，但因本研究樣本數偏少，還需今后進行多中心、大樣本的臨床試驗進一步明確S100蛋白的臨床價值。

參考文獻

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Dynamic changes and clinical significance of serum S100A8 and S100A9 protein in newborns with acute lung injury

YinQigai,HaoLi,YangHaiyan,MiaoLi

(DepartmentofNeonatalogy,AffiliatedLianyungangMunicipalFirstPeople′sHospital,XuzhouMedicalCollege,Lianyungang,Jiangsu222000,China)

[Abstract]ObjectiveTo study the dynamic changes of serum S100A8 and S100A9 protein in newborns with acute lung injury(ALI).MethodsThirty newborns with ALI(ALI group) were enrolled in this study,30 newborns with wet lung(wet lung group) and 30 healthy newborns(control group) were selected.The changes of serum S100A8 and S100A9 protein levels were detected by the enzyme linked immunosorbent assay(ELISA).ResultsThe levels of serum S100A8 and S100A9 protein on 1,3,7 d after ALI onset in the ALI group were significantly higher than those in the wet lung group and the control group,the difference was statistically significant(P<0.01).The increase of serum S100A8 protein level in the ALI group was most significant on 1 d after onset[(187.29.±29.71)pg/mL],while which of serum S100A9 was most obvious on 3 d after onset[(280.01±42.29 )pg/mL],the differences were statistically significant (P<0.01),both were decreased to some extent on 7 d.The serum S100A8 and S100A9 protein levels in the wet lung group were higher than those in the control group without statistical difference (P>0.05)．ConclusionS100A8 and S100A9 protein are involved in the pathogenesis of ALI，which have certain potentially clinical application value in the early diagnosis,treatment and prognosis of ALI．

[Key words]infant,newborn；acute lung injury；S100A8 protein;S100A9 protein

作者簡介：殷其改(1973-)，副主任醫師，碩士研究生，主要從事新生兒腦損傷研究。

doi:論著·臨床研究10.3969/j.issn.1671-8348.2016.04.020

[中圖分類號]R722.12

[文獻標識碼]A

[文章編號]1671-8348(2016)04-0490-02

(收稿日期：2015-08-08修回日期：2015-10-16)