高效液相色譜法測定小兒復方麻黃堿桔梗糖漿中鹽酸麻黃堿含量

陸仕華，李丹鳳，黃興振

（1.廣西壯族自治區食品藥品審評查驗中心，廣西南寧　530029；2.廣西壯族自治區食品藥品檢驗所，廣西南寧　530021；3.廣西醫科大學藥學院，廣西南寧　530021）

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高效液相色譜法測定小兒復方麻黃堿桔梗糖漿中鹽酸麻黃堿含量

陸仕華1，李丹鳳2，黃興振3

（1.廣西壯族自治區食品藥品審評查驗中心，廣西南寧530029；2.廣西壯族自治區食品藥品檢驗所，廣西南寧530021；3.廣西醫科大學藥學院，廣西南寧530021）

摘要：目的建立測定小兒復方麻黃堿桔梗糖漿中鹽酸麻黃堿含量的高效液相色譜（HPLC）法。方法色譜柱采用Inertsil ODS-3 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相為乙腈-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（10∶90），流速1.0 mL/min，檢測波長205 nm，柱溫30℃，進樣量20 μL。結果鹽酸麻黃堿質量濃度在5.715 0～57.150 0 μg/mL范圍內與峰面積呈良好線性關系（r=0.999 8），平均加樣回收率為100.08%，RSD為0.76%（n=9）。結論該法簡便準確、靈敏度高、結果可靠，重復性好，可作為小兒復方麻黃堿桔梗糖漿的質量控制方法。

關鍵詞：高效液相色譜法；小兒復方麻黃堿桔梗糖漿；鹽酸麻黃堿；含量測定

小兒復方麻黃堿桔梗糖漿是由鹽酸麻黃堿、桔梗、氯化銨、枸櫞酸鈉、枸櫞酸、薄荷腦、苯甲酸、茴香水、乙醇、蔗糖與水制成的糖漿劑，主要用于小兒感冒、支氣管炎引起的咳嗽、多痰等［1］。原質量標準采用紫外分光光度法對含量進行測定，準確度不夠高，專屬性不夠強［2-3］。為更好、更精確地控制藥品質量，筆者采用高效液相色譜（HPLC）法測定方中鹽酸麻黃堿的含量。現報道如下。

1　儀器與試藥

Waters 2695-2998型高效液相色譜儀（DAD檢測器，Empower色譜工作站）；XD205DU型電子天平（瑞士梅特勒公司）。鹽酸麻黃堿對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為171241-201007，供含量測定用）；小兒復方麻黃堿桔梗糖漿（廠家A，批號為40901，40902，40903）；乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2　方法與結果

2.1色譜條件及系統適用性試驗［4-5］

圖1　高效液相色譜圖

色譜柱：Inertsil ODS-3 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；檢測波長：205 nm；流動相：乙腈-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（10∶90）；流速：1.0 mL/min；進樣量：20 μL；柱溫：30℃。在上述色譜條件分別測定供試品溶液、對照品溶液、陰性對照品溶液，色譜見圖1。對照品溶液與供試品溶液色譜中鹽酸麻黃堿的保留時間基本一致，陰性對照品溶液色譜在相應位置無相應峰出現，與其他組分分離完全，按鹽酸麻黃堿峰計算理論板數應不低于3 000。

2.2溶液制備

稱取鹽酸麻黃堿對照品10 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸溶液適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每1 mL中含鹽酸麻黃堿0.1 mg的對照品貯備液。精密量取對照品貯備液5 mL，置25 mL容量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，制成1 mL中含鹽酸麻黃堿20 μg的對照品溶液。精密量取樣品2.5 mL，置100 mL容量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，得供試品溶液。將桔梗粉碎成粗粉，加常水煎煮2次，第1次2 h，第2次1 h，合并煎液，趁熱加入苯甲酸溶解，靜置24 h，濾取上清液，加蔗糖400 g制成糖漿；另取氯化銨15 g、枸櫞酸2 g、枸櫞酸鈉15 g加水溶解后，加入糖漿中，再將薄荷腦0.15 g溶于乙醇、氯仿混合液中，與茴香水4 mL混合后，緩緩加入上述糖漿中，隨加隨攪拌，最后加適量超純水使成1 000 mL，攪勻，濾過，分裝，即得陰性對照品溶液。

2.3方法學考察

線性關系與定量限考察：精密量取對照品貯備液0.5，1.0，2.0，4.0，5.0 mL，分別置10 mL容量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，制成不同質量濃度的對照品溶液，按2.1項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。以峰面積（A）對其質量濃度（C）作線性回歸，得回歸方程A=42 186 C-52 818（r=0.999 9）。結果表明，鹽酸麻黃堿質量濃度在5.715 0～57.150 0 μg/mL范圍內與峰面積線性關系良好。以信噪比為10計算，得出鹽酸麻黃堿定量限為15.33 ng/mL。

精密度試驗：取同一對照品溶液20 μL注入液相色譜儀，連續進樣6次，記錄色譜圖。結果鹽酸麻黃堿峰面積的RSD為0.59%（n=6），表儀器明精密度較好。

重復性試驗：取同批樣品（批號為140901）6份，依法制成供試品溶液，進樣20 μL，分別測定每份樣品的含量。結果鹽酸麻黃堿的平均含量為0.83 g/L，RSD為0.42%（n=6），表明方法的重復性較好。

穩定性試驗：取同一供試品（批號為140901）溶液，依法分別于0，1，2，4，6，8，10 h時進樣20 μL測定。結果鹽酸麻黃堿的峰面積RSD為0.65%（n=7），表明供試品溶液在10 h內穩定。

加樣回收試驗：取已知含量的同批樣品（批號140901），按20 μg/mL質量濃度1/2的80%，100%，120%共3個梯度分別加入對照品貯備液8.0，10.0，12.0 mL，每個質量濃度平行配制3份，加0.1 mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，進樣20 μL測定，計算回收率。結果見表1。

表1　鹽酸麻黃堿加樣回收試驗結果（n=9）

2.4樣品含量測定

取3批樣品，按2.2項下方法制成供試品溶液，按2.1項下色譜條件進樣測定，以外標法通過峰面積計算含量。結果批號為140901，140902，140903的3批樣品中鹽酸麻黃堿的含量分別為0.83，0.81，0.82 g/L。

3　討論

目前，小兒復方麻黃堿桔梗糖漿中鹽酸麻黃堿的含量測定主要是采用分光光度法中的紫外吸收系數測定法進行測定［6-7］。因復方制劑成分非常復雜，文獻［8］報道，紫外吸收系數測定法測定時會有吸收系數和供試品溶液吸光度引起的不確定度，后者有吸收度測定重復性的不確定度，其中包括吸收度測定結果的不確定度和由證書給出吸收度重復性的不確定度，故吸光度引起的不確定度占主導，與所使用的紫外分光光度計有關。筆者采用HPLC法測定小兒復方麻黃堿桔梗糖漿中鹽酸麻黃堿的含量，避免了因吸光度引起的不確定度，提高了檢驗的專屬性。

對鹽酸麻黃堿對照品溶液進行紫外全波段掃描，發現205 nm波長處的吸收強度最大，為近紫外光區，故選擇檢測波長為205 nm。

根據文獻［9-11］報道，本試驗中對流動相進行了比較篩選，首先考察了乙腈-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（5∶95），峰形對稱性不好，分離度一般。在此基礎上調整流動相比例為乙腈-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（10∶90），結果顯示，雜質峰和色譜峰分離度良好，色譜峰對稱，基線平穩，不用進行復雜的梯度洗脫進行分離。

參考文獻：

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［2］國家藥典委員會.關于勘誤“小兒復方麻黃堿桔梗糖漿”藥品標準中有關內容的函［J］.中國藥品標準，2006，7（6）：9.

［3］張曉燕，孫雪.高效液相色譜法測定復方桔梗麻黃堿糖漿中鹽酸麻黃堿的含量［J］.中國藥業，2014，23（18）：56-57.

［4］許勇，毛丹，陸繼偉，等.復方桔梗麻黃堿糖漿（Ⅱ）的質量標準研究［J］.齊魯藥事，2012，31（10）：574-576.

［5］毛丹，許勇，陸繼偉，等.復方桔梗麻黃堿糖漿質量標準研究［J］.中成藥，2012，34（18）：1 518-1 522.

［6］WS-10001-（HD-1474）-2003，化學藥品地方標準上升國家標準（第十五冊）［S］.

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［8］騰南雁，劉向紅，桑彤.紫外吸收系數法測定小兒氨酚黃那敏顆粒含量的不確定度評定［J］.中國藥師，2011，14（3）：426-428.

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［10］馬玉，肖禾，焦小珂，等.小兒解表止咳口服液中鹽酸麻黃堿含量測定［J］.中國藥業，2014，23（6）：37-38.

［11］馮國.HPLC法測定復方愈酚麻黃糖漿中四種成分的含量［J］.中國藥事，2014，5（28）：474-478.

Content Determination of Ephedrine Hydrochloride in Child Compound Ephedrine Jiegeng Syrup by HPLC

Lu Shihua1，Li Danfeng2Huang Xingzhen1
（1.Guagnxi Food and Drug Evaiuation & Inspection Center，Nanning，Guangxi，China 530029；2.Guangxi Zhuang Autonomous Region Institute for Food and Drug Control，Nanning，Guangxi，China 530021；3.Pharmaceutical College Guangxi Medical University，Nanning，Guangxi，China 530021）

Abstract：Objective To establish an HPLC method for the determination of ephedrine hydrochloride in Child Compound Ephedrine Jiegeng Syrup.Methods The HPLC method was adopted on the Inertsil ODS-3 C18column（250 mm×4.6 mm，5 μm）with acetonitrile 0.1%phosphoric acid solution（containing 0.1%triethylamine）（10∶90）as the mobile phase.The flow rate was 1.0 mL/min and the column temperature was 30℃.The wavelength was 205 nm.Results The sample size of ephedrine hydrochloride in the range of 5.715 0-57.150 0 μg/mL showed the good linear relationship with the peak area（r=0.999 8），The average recovery rate was 100.08%（RSD=0.76%，n=9）.Conclusion This method is simple and rapid with good reproducibility，and can be used as one of the quality control standard for Child Compound Ephedrine Jiegeng Syrup.

Key words：HPLC；Child Compound Ephedrine Jiegeng Syrup；ephedrine hydrochloride；content determination

中圖分類號：R284.1；R286.0

文獻標識碼：A

文章編號：1006-4931（2016）05-0056-03

作者簡介：陸仕華，男，碩士研究生，藥師，主要從事藥物新制劑研究工作，（電子信箱）lushihua2318@163.com；黃興振，男，碩士研究生，藥師，主要從事藥物新制劑研究工作，本文通訊作者，（電子信箱）huangxingzhen@163.com。

收稿日期：（2015-07-13）