高效液相色譜法測定復方咪康唑洗劑中硝酸咪康唑含量

楊　瑾，莫國棟，曾維國，林　麗

（廣東省中山市第二人民醫院，廣東中山　528447）

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高效液相色譜法測定復方咪康唑洗劑中硝酸咪康唑含量

楊瑾，莫國棟，曾維國，林麗

（廣東省中山市第二人民醫院，廣東中山528447）

摘要：目的建立測定復方咪康唑洗劑中硝酸咪康唑含量的高效液相色譜法。方法色譜柱為Eclipse XDB C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相為甲醇-0.5%乙酸銨溶液（20∶80），流速為1.0 mL/min，檢測波長為235 nm，柱溫為30℃。結果硝酸咪康唑質量濃度在0～2.106 0 g/L范圍內與峰面積呈良好的線性關系（r=0.999 3），平均回收率為98.98%，RSD=1.91%（n=9）。結論該法簡便快速、準確、重復性好，可用于該制劑中硝酸咪康唑的含量測定。

關鍵詞：高效液相色譜法；復方咪康唑洗劑；硝酸咪康唑；含量測定

復方咪康唑洗劑為我院皮膚科臨床應用多年的自制制劑。其主要有效成分硝酸咪康唑屬于咪唑類抗真菌藥物，對真菌、念珠菌、酵母菌及藻類等具有抑制和殺滅作用，同時對革蘭陽性球菌和桿菌也有較強的抗菌作用［1-4］。其具有廣譜、高效、安全的特點，常以霜劑、乳膏劑、搽劑等外用劑型廣泛應用于臨床，用于治療多種真菌感染引起的手、足、體股癬等的皮膚病［5-7］。復方咪康唑洗劑的原質量標準僅有性狀和鑒別等控制項目，而無含量測定項。為進一步控制該制劑質量，確保其療效，筆者采用高效液相色譜（HPLC）法測定制劑中硝酸咪康唑的含量。現報道如下。

1　儀器與試藥

1.1儀器

安捷倫1260型高效液相色譜儀（安捷倫科技＜中國>有限公司）；十萬分之一電子天平（上海精密科學儀器有限公司）；超聲機（天津奧特賽恩斯儀器有限公司），移液槍（賽默飛世爾上海儀器有限公司）。

1.2試藥

甲醇為色譜純，乙酸銨為分析純，水為超純水；硝酸咪康唑對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為100213-200705，含量為99.7%）；復方咪康唑洗劑（中山市第二人民醫院自制，批號分別為20150125，20150126，20150127）。

2　方法與結果

2.1色譜條件

色譜柱：Eclipse XDB-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.5%乙酸銨（20∶80）；流速：1.0 mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：235 nm。

2.2溶液制備

供試品溶液：取樣品，用力振搖后，用移液槍快速精密移取本品0.5 mL，置10 mL容量瓶中，用適量甲醇稀釋，超聲處理5 min，取出放置室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

陰性對照品溶液：按處方制備不含硝酸咪康唑的陰性樣品，精密量取，按供試品溶液制備方法制備，即得。

對照品溶液：取硝酸咪康唑對照品65 mg，精密稱定，置25 mL容量瓶中，加流動相溶解并定容至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。取對照品貯備液適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含1 mg硝酸咪康唑的溶液，即得。

2.3方法學考察

陰性干擾試驗：取2.2項下3種溶液進樣測定，記錄色譜圖。在此色譜條件下，供試品中其他成分對硝酸咪康唑的測定無干擾，色譜圖見圖1。

線性關系考察：精密量取對照品貯備液1，2，3，4，3，4 mL，置10，10，10，10，5，5 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為系列對照品溶液，按擬訂色譜條件，分別進樣10 μL，記錄色譜圖。以對照品溶液的質量濃度（X，g/L）為橫坐標、峰面積（Y）為縱坐標繪制標準曲線，得硝酸咪康唑的回歸方程Y=3.863 4×102X + 11.599 4，r=0.999 3（n=6）。結果表明，硝酸咪康唑質量濃度在0～2.106 0 g/L范圍與峰面積線性關系良好。

圖1　高效液相色譜圖

精密度試驗：取同一硝酸咪康唑對照品溶液，按擬訂色譜條件，連續測定6次。結果峰面積的RSD為0.08%（n=6），表明儀器精密度良好。

重復性試驗：取同一批樣品（批號為20150126），依法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件連續測定6次。結果的RSD為1.04%（n=6），表明方法重復性好。

穩定性試驗：取樣品（批號為20150126），依法制備供試品溶液，于0，2，4，6，12，24 h時進行測定。結果的RSD為1.14%（n=6），表明供試品溶液在24 h內穩定性良好。

加樣回收試驗：精密稱取不含硝酸咪康唑的陰性樣品9份，取硝酸咪康唑對照品，按80%，100%，120%水平加樣，平行測定3次，按供試品溶液制備方法制備溶液，依法測定，計算回收率。結果見表1。

表1　硝酸咪康唑回收試驗結果（n=9）

2.4樣品含量測定

取本品3批，依法測定，按外標法計算含量。結果3批樣品的硝酸咪康唑標示百分含量分別為98.65%，98.24%，97.59%，符合標準要求（硝酸咪康唑含量應為標示量的90.0%～110.0%）。

3　討論

3.1檢測波長選擇

參考2010年版《中國藥典（二部）》硝酸咪康唑搽劑含量測定項下的檢測波長［8］，并將硝酸咪康唑對照品溶液用甲醇稀釋至適宜質量濃度，以流動相為空白，采用紫外分光光度計于200～500 nm波長掃描，其最大吸收波長為235 nm，故檢測波長為235 nm。

3.2流動相選擇

參考文獻［9-12］，考察了甲醇、乙腈、水、磷酸等試劑的不同比例作為流動相，但峰形及分離度效果均不理想，最終確定了以甲醇、0.5%乙酸銨為基礎的流動相系統。結果以甲醇-0.5%乙酸銨（20∶80）為流動相時，硝酸咪康唑的峰形對稱，分離度符合要求，各峰之間無干擾。

3.3樣品前處理

復方咪康唑洗劑為混懸劑，含有較多的氧化鋅、升華硫不溶性成分，對主藥硝酸咪康唑具吸附作用，影響制劑取樣均勻性及含量測定準確性［13］。考察同一批號的復方咪康唑洗劑，分別經5 min，10 min，15 min超聲處理制備的樣品，5 min超聲處理測得的硝酸咪康唑含量較低，10 min與15 min超聲處理的供試品溶液中硝酸咪康唑含量相近，最終確定采用10 min超聲處理。

參考文獻：

［1］吳月萍.高效液相色譜法測定硝酸咪康唑乳膏的含量［J］.海峽藥學，2013，25（10）：81-83.

［2］靖會，楊靜，邊軍昌.HPLC法測定硝酸咪康唑脂質體的藥物含量及包封率［J］.應用化工，2011，40（1）：161-163.

［3］林躍紅，李惠民，張曉民，等.硝酸咪康唑溶液對白色念珠菌的體外抗菌作用研究［J］.實用臨床醫藥雜志，2008，12（4）：46-48.

［4］張青葉.香蓮栓聯合咪康唑栓治療陰道念珠菌感染38例［J］.中國藥業，2014，23（20）：105-106.

［5］羅宏麗，肖順林，馮碧.HPLC測定復方地米水楊酸酊中硝酸咪康唑的含量［J］.中國現代應用藥學，2011，28（8）：765-767.

［6］張瑩.硝酸咪康唑栓治療外陰道念珠菌病的臨床療效［J］.中國醫藥指南，2012，10（12）：113-114.

［7］賴東梅，張丹霞，陳惠英，等.咪康唑莫米松皮膚成膜凝膠皮膚用藥安全性試驗［J］.中國藥業，2013，22（24）：22-23.

［8］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：953.

［9］盧勁濤.HPLC法測定硝酸咪康唑乳膏的含量［J］.中國藥師，2010，13（5）：691-692.

［10］王一淞，楊松濤，呂佳，等.高效液相色譜法測定硝酸咪康唑栓的含量［J］.實用藥物與臨床，2013，16（9）：833-835.

［11］唐永紅，宋愿智，李秋菲.HPLC法測定硝酸咪康唑栓中硝酸咪康唑的含量［J］.西北藥學雜志，2012，27（5）：433-435.

［12］賈旭玲，施芬，王帥，等.復方硝酸咪康唑乳膏中硝酸咪康唑的含量測定［J］.中國藥業，2007，16（10）：37.

［13］倪曉霞，黃藝蓉，黃元成，等.HPLC法測定復方咪康唑散中硝酸咪康唑含量［J］.中國藥師，2013，16（1）：82-84.

Content Determination of Miconazole Nitrate in Compound Miconazole Nitrate Lotion by HPLC

Yang Jin，Mo Guodong，Zeng Weiguo，Lin Li
（Zhongshan Second People′s Hospital，Zhongshan，Guangdong，China 528447）

Abstract：Objective To establish an HPLC method to determine miconazole nitrate in compound miconazole nitrate lotion.Methods The analysis was carried out at 30℃on a Eclipse C18column（250 mm×4.6 mm，5 μm）.The mobile phase consisted of methanol-0.5%ammonium acetate solution（20∶80）with the flow rate of 1.0 mL/min.The detection wavelength was 235 nm.The column temperature was 30℃.Results The calibration curve of miconazole nitrate was linear over the range of 0-2.106 0 g/L（r=0.999 3）.The average recovery was 98.98%（RSD=1.91%，n=9）.Conclusion This method is simple，accurate，reproducible and applicable for the content determination of miconazole nitrate in Compound Miconazole Nitrate Lotion.

Key words：HPLC；compound miconazole nitrate lotion；miconazole nitrate；content determination

中圖分類號：R927.2；R986.0

文獻標識碼：A

文章編號：1006-4931（2016）07-0046-03

作者簡介：楊瑾（1981-），女，碩士研究生，副主任藥師，研究方向為藥物制劑，（電子信箱）yangjin1209@163.com。

收稿日期：（2015-12-02；修回日期：2016-01-17）