曲妥珠單抗對Her-2陽性乳腺癌患者腫瘤細胞增殖的影響

張　明，楊維艷，劉亞寧

（河北省任丘市人民醫院，河北滄州　062550）

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曲妥珠單抗對Her-2陽性乳腺癌患者腫瘤細胞增殖的影響

張明，楊維艷，劉亞寧

（河北省任丘市人民醫院，河北滄州062550）

摘要：目的探究曲妥珠單抗對人類表皮生長因子受體2（Her-2）陽性乳腺癌患者腫瘤細胞增殖的影響。方法選取2011年2月至2013年2月收治的100例早期乳腺癌女性患者，根據實時定量逆轉錄聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）將其分為Her-2陽性組和Her-2陰性組，各50例，比較兩組患者術前和化學治療后的外周血細胞角蛋白19（CK19）表達水平。再將50例Her-2陽性患者隨機均分為觀察組和對照組，各25例，觀察組于化學治療后繼續使用曲妥珠單抗進行治療，療程為3個月，比較兩組患者化學治療后3個月外周血CK19的表達水平。結果手術前Her-2陽性組CK19表達陽性50例（100.00%），Her-2陰性組CK19表達陽性16例（32.00%），差異有統計學意義（P＜0.05）；化學治療后，Her-2陽性患者CK19表達陽性41例（82.00%），Her-2陰性患者CK19表達陽性7例（14.00%），差異有統計學意義（P＜0.05）。觀察組曲妥珠單抗治療3個月后的CK19平均水平為（21.2±16.5）μg/L，對照組為（73.1±38.6）μg/L，差異有統計學意義（P＜0.05）。結論早期乳腺癌患者中，Her-2基因的表達與與外周血CK19的水平密切相關，于化學治療后應用曲妥珠單抗可明顯降低外周血CK19的表達水平。

關鍵詞：曲妥珠單抗；人類表皮生長因子受體2；乳腺癌；細胞增殖

對于早期乳腺癌患者，人類表皮生長因子受體2 （Her-2）基因的表達水平是影響其預后的重要因素，Her-2陽性患者5年生存率明顯低于Her-2陰性患者［1］。研究表明，Her-2基因的表達與外周血中上皮源性細胞特異性標志基因細胞角蛋白19（CK19）的水平相關，而后者是早期乳腺癌外周血循環腫瘤細胞（CTCs）的異常表達產物［2］。由于Her-2基因的表達與CTCs水平尚缺少大量實驗證據［3］，筆者選取我院100例早期乳腺癌患者，以CK19為標志物，比較患者Her-2表達與CTCs的關系，并探討化學治療（簡稱化療）后繼續使用曲妥珠單抗對外周血循環腫瘤細胞（CTCs）的影響，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取我院2011年2月至2013年2月收治的早期乳腺癌女性患者100例，納入標準［4］：所有患者知曉本次試驗并簽署相關知情同意書；經術前穿刺、組織病理證實為早期乳腺癌；行一側或雙側乳腺切除術并于術后行化療；無高血壓、糖尿病、心肝腎功能不全等嚴重內科疾病。根據實時定量逆轉錄聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）技術均分為Her-2陽性組和Her-2陰性組，各50例。Her-2陽性組患者年齡26～51歲，平均（44.5±3.8）歲；Her-2陰性組患者年齡26～52歲，平均（45.2±3.9）歲。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性，詳見表1。

表1　乳腺腫瘤患者一般資料比較［例（%），n=50］

1.2方法

化療方案［5］：環磷酰胺600 mg靜脈注射，甲氨蝶呤10 mg靜脈注射，5-氟尿嘧啶500 mg靜脈滴注，先注射甲氨蝶呤，6 h后注射環磷酰胺和5-氟尿嘧啶，每7～10 d給藥1次，每次用藥2～3次，停用2～3周，持續6個月。兩組患者于手術前、化療、療程結束后分別抽取靜脈血，提取并于-80℃保存RNA。將50例Her-2陽性患者隨機均分為觀察組和對照組，各25例，觀察組患者在化療結束后繼續給予曲妥珠單抗注射劑（商品名赫賽汀，上海羅氏制藥有限公司，國藥準字J20110020，規格為每瓶440 mg∶20 mL），1次/周，每次110 mg，靜脈滴注，療程為3個月。3個月后，以同樣方法收集患者的靜脈血標本，制備RNA。所有標本嚴格按照2700型PCR擴增儀（PE公司）說明書進行操作，使用TrizolRNA提取試劑盒（Promoga公司），CK19引物（上海生工公司合成）計算得到外周血CK19的相對濃度。

1.3統計學處理

采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據處理分析。計量資料以±s表示，采用t檢驗；計數資料以百分比表示，應用X2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

結果見表2和表3。

表2　Her-2陽性與陰性患者外周血CK19表達比較［例（%），n=50］

表3　曲妥珠單抗對Her-2陽性患者外周血CK19的影響（±s，μg/L，n=25）

表3　曲妥珠單抗對Her-2陽性患者外周血CK19的影響（±s，μg/L，n=25）

組別觀察組對照組t值　P治療前81.6±49.2 79.6±45.7 0.15 >0.05治療后21.2±16.5 73.1±38.6 6.20 ＜0.05

3　討論

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤，起源于乳腺腺上皮組織，發病率較高。由于乳腺本身并不是維持人體生命活動的重要器官，因此原位癌并不致命。但乳腺細胞喪失正常細胞的結構功能，細胞間松散，極易脫落發生轉移，一旦發生轉移將嚴重降低乳腺癌的預后，因此早發現、早治療是關鍵。乳腺癌細胞最常見的轉移方式為淋巴轉移和血行轉移［6-7］，在血液中發現腫瘤細胞是判斷其發生轉移的重要標志。

CK19是一種上皮特異性蛋白，在血液、骨髓和淋巴結等處不表達［8-9］，因此外周血中CK19升高對判斷腫瘤轉移具有重要意義。研究表明，Her-2基因與腫瘤細胞的增殖有密切關系，其高表達往往預示癌細胞有轉移，分化低且預后較差，但其對CK19的影響目前尚不明確［10］。對于乳腺癌的治療，以往為手術切除加術后化療，但傳統的化療方案對外周血CK19降低效果不佳且治療過程中的毒副反應較大［11］。

曲妥珠單抗是目前臨床公認的唯一用于乳腺癌靶向治療的藥物，通過附著于Her-2來阻止人體表皮生長因子的附著，促使Her-2蛋白被相關蛋白酶降解，從而阻斷癌細胞的增殖，提高Her-2陽性乳腺癌患者的無病生存期和總生存期［12］。曲妥珠單抗單獨應用有效率較低，可能是由于癌細胞造成的低pH環境有利于其逃避曲妥珠單抗與之結合，目前尚不十分明確，但傳統化療后應用曲妥珠單抗可明顯提高其有效率。美國國家癌癥綜合治療聯盟（NCCN）指南于2010年將曲妥珠單抗列為Her-2陽性乳腺癌患者的新型輔助治療方案。

本研究結果顯示，Her-2陽性的早期乳腺癌患者手術前和傳統化療后其外周血CK19表達陽性率均明顯高于Her-2陰性的患者，觀察組患者在應用曲妥珠單抗3個月后CK19水平明顯低于觀察組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，早期乳腺癌患者中，Her-2基因的表達可提高外周血中CK19的水平，降低乳腺癌的預后。于傳統化療后應用曲妥珠單抗可明顯加強對Her-2陽性患者癌細胞增殖的抑制作用，減少CTCs數量，降低外周血CK19水平，但是否可以縮減傳統化療的劑量和療程有待進一步探究。

參考文獻：

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中圖分類號：R969.4；R977.6

文獻標識碼：A

文章編號：1006-4931（2016）07-0017-02

收稿日期：（2015-07-23）