甲胎蛋白異質(zhì)體比率在原發(fā)性肝癌鑒別診斷中的應用

趙曉玲，王晶晶，趙巧玉，黃梁鑌

(重慶南桐礦業(yè)有限責任公司總醫(yī)院檢驗科， 重慶 400802)

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·論著·

甲胎蛋白異質(zhì)體比率在原發(fā)性肝癌鑒別診斷中的應用

趙曉玲，王晶晶，趙巧玉，黃梁鑌

(重慶南桐礦業(yè)有限責任公司總醫(yī)院檢驗科， 重慶 400802)

摘要:目的探討甲胎蛋白異質(zhì)體比率(AFP-L3%)在乙型肝炎感染原發(fā)性肝癌和良性肝病鑒別診斷中的應用。方法慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染108例，其中原發(fā)性肝癌50例、肝硬化42例、慢性肝炎16例。運用化學發(fā)光法檢測甲胎蛋白(AFP)及AFP-L3水平，計算AFP-L3%。結(jié)果以AFP≥400 ng/mL作為原發(fā)性肝癌診斷閾值時，靈敏度及特異度分別為36%、84%；以AFP-L3%≥10%作為原發(fā)性肝癌診斷閾值時，靈敏度及特異度分別為62%、83%。結(jié)論AFP-L3%更能區(qū)分原發(fā)性肝癌和良性肝病。臨床上可結(jié)合AFP-L3%作為鑒別診斷HBV感染原發(fā)性肝癌和良性肝病的指標。

關鍵詞:甲胎蛋白；原發(fā)性肝癌；良性肝病；鑒別診斷

慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是原發(fā)性肝癌的重要原因。甲胎蛋白(AFP)是當前診斷原發(fā)性肝癌常用的血清標志物，但患者在HBV感染的慢性活動肝炎階段以及肝硬化階段也可存在AFP升高的現(xiàn)象[1]。這導致與原發(fā)性肝癌早期鑒別診斷帶來了一定的困難。近年來，研究發(fā)現(xiàn)AFP存在多種異質(zhì)體[2]，其中小扁豆凝集素親和型甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)僅由肝癌細胞分泌產(chǎn)生，2005年美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)用于原發(fā)性肝癌臨床預警[3]。本研究主要通過檢測HBV感染原發(fā)性肝癌、良性肝病中的AFP-L3水平，并通過公式計算AFP-L3占AFP的百分比即甲胎蛋白異質(zhì)體比率，以探討AFP-L3%在HBV感染相關原發(fā)性肝癌早期診斷中的價值。

1資料與方法

1.1一般資料2014年1～10月本院門診及住院常規(guī)檢測AFP陽性(≥20 ng/mL)的患者108 例，其中原發(fā)性肝癌組50例，男44例，女6例，年齡29～78歲；肝硬化組42例，男28例，女14例，年齡25～80歲；慢性肝炎組16例，男9例，女7例，年齡19～57歲。診斷標準：原發(fā)性肝癌診斷以CT、MRI、肝動脈造影等影像學診斷為標準，符合中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會修訂本的《原發(fā)性肝癌診斷規(guī)范(2011版)》 ；肝硬化診斷以血清清蛋白小于35 g/L，影像學提示肝硬化和門脈高壓為標準；慢性乙型肝炎診斷以乙型肝炎表面抗原陽性持續(xù)6個月以上，影像學未見肝硬化、肝內(nèi)占位性改變及門脈高壓者為標準。

1.2儀器與試劑AFP和AFP-L3檢測儀器為雅培ISR2000全自動電化學發(fā)光免疫分析儀，AFP試劑由雅培公司提供；AFP-L3試劑由北京熱景生物技術有限公司提供；雅培C16000全自動生化分析儀檢測肝功能；乙型肝炎兩對半定量檢測采用時間分辨法，儀器及配套質(zhì)控品、試劑均為上海新波。以上所有檢測項目均按標準操作程序進行，且保證室內(nèi)質(zhì)控在控。

1.3方法AFP-L3%測定采用親和吸附原理，取1份目標血清 A，A經(jīng)稀釋處理、去除保護液、清洗、洗脫等親和吸附離心處理后再用雅培ISR2000測定離心管外的AFP-L3。同時上機測定目標血清 B 的AFP水平。計算AFP-L3%。計算公式：AFP-L3%=AFP-L3×2.5/AFP×100%。AFP-L3%≥10%為陽性。

2結(jié)果

2.1各組AFP、AFP-L3%檢測結(jié)果原發(fā)性肝癌組AFP和AFP-L3%水平顯著高于其余兩組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2AFP在原發(fā)性肝癌診斷中的評價為進一步評價本研究中AFP在原發(fā)性肝癌診斷中的價值，按照AFP檢測值，分為大于或等于400 ng/mL和小于400 ng/mL，按照是否為原發(fā)性肝癌分為原發(fā)性肝癌組和非原發(fā)性肝癌組(如肝硬化、慢性肝炎)，見表2。若以AFP≥400 ng/mL作為原發(fā)性肝癌的診斷標準，則AFP在診斷原發(fā)性肝癌中的靈敏度為36%，特異度為84%。AFP診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線下面積為0.646，該檢驗方法有效,見圖1。

表1　各組的AFP和AFP-L3%檢測結(jié)果比較

表2　AFP診斷試驗評價(n)

圖1　AFP診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線

2.3AFP-L3%在原發(fā)性肝癌診斷中的評價為評價本研究中AFP-L3%在原發(fā)性肝癌診斷中的價值，按照AFP-L3%檢測值，分為大于或等于10%和小于10%，按照是否為原發(fā)性肝癌分為原發(fā)性肝癌組和非原發(fā)性肝癌組，診斷實驗評價見表3。以AFP-L3%≥10%作為原發(fā)性肝癌的診斷標準，則AFP-L3%在診斷原發(fā)性肝癌中的靈敏度為62%，特異度為83%。AFP-L3%診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線下面積為0.706，該檢驗方法同樣有效，見圖2。

圖2　AFP-L3%診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線

組別nAFP-L3≥10%AFP-L3<10%原發(fā)性肝癌組503119非原發(fā)性肝癌組581048

3討論

目前AFP仍是臨床原發(fā)性肝癌診斷的主要評估指標，但在慢性肝炎或肝硬化患者中AFP也有不同程度的升高，這導致AFP鑒別診斷早期原發(fā)性肝癌上特異度及敏感度受到影響。因此，臨床上將原發(fā)性肝癌的AFP診斷閾值提高到400 ng/mL[4]，但在提高特異性的同時，卻使其靈敏度降低，會導致一些原發(fā)性肝癌漏診。目前臨床主要通過腹部超聲檢查和血清AFP的檢測進行肝癌的早期篩查。研究顯示血清AFP對肝癌的陽性預測值是32%，腹部超聲的陽性預測值54%；可見“超聲+AFP”的臨床肝癌早期篩查方法對原發(fā)性肝癌的并不能真正實現(xiàn)早期預測。研究發(fā)現(xiàn)[5-6]，通過檢測AFP-L3能夠在慢性乙型肝炎患者和肝硬化等高危人群中發(fā)現(xiàn)直徑小于2 cm的肝癌，AFP-L3比影像學可以提前9～12個月發(fā)現(xiàn)肝癌的存在。取AFP-L3%的檢測臨界值為10%診斷肝細胞肝癌，其準確度可達94%[7]。

本研究以影像學診斷明確的原發(fā)性肝癌為研究對象，符合我國目前診斷原發(fā)性肝癌的常規(guī)策略。一般而言，肝細胞肝癌占原發(fā)性肝癌的比例可達90%左右，多數(shù)原發(fā)性肝癌在手術前不能明確病理診斷。此外，我國原發(fā)性肝癌患者中約60%～90%有HBV感染的基礎。因此，有必要在HBV感染人群中對AFP-L3%和AFP在診斷原發(fā)性肝癌中的價值進行評估。本組研究對象在性別分布、年齡分布及臨床特征均符合原發(fā)性肝癌、慢性肝炎及肝硬化的臨床特點。

各組間AFP和AFP-L3%水平比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，可見，單純依據(jù)AFP水平并不能區(qū)分原發(fā)性肝癌組與肝硬化組，這提示AFP-L3%更適合作為原發(fā)性肝癌的篩選指標，與其他研究報道一致[8-9]。

本研究中，AFP-L3%診斷原發(fā)性肝癌的在保持特異度的同時，靈敏度大大提高。研究者進一步通過ROC曲線對AFP和AFP-L3%在診斷原發(fā)性肝癌中的價值進行了評估。從曲線下面積看，二者均具有一定的診斷價值，AFP-L3%的診斷價值優(yōu)于AFP。賈志凌等[10]在肝癌人群中的研究發(fā)現(xiàn)，AFP-L3的診斷靈敏度是75%，特異度達到92%。本研究的靈敏度和特異度稍低于上述研究，可能與不同研究對象的選擇有關。

總之，AFP-L3%可較好地鑒別診斷原發(fā)性肝癌、HBV慢性感染者及肝硬化患者，且具有較高的靈敏度和特異度，可作為原發(fā)性肝癌的篩查及早期診斷指標。

參考文獻

[1]聶榮慧，劉元元．腫瘤標志物AFP、CA125、CA199和CEA檢測在肝炎、肝硬化患者診斷和治療中的應用[J]．吉林大學學報:醫(yī)學版，2012，38(1)：119-122．

[2]Hu BG,Liu LP,Chen GG,et al.Therapeutic efficacy of improved α-fetoprotein promoter-mediated tBid delivered by folate-PEI600-cyclodextrin nanopolymer vector in hepatocellular carcinoma[J].Exp Cell Res,2014,324(2):183-191.

[3]FoodUS,DrugAdministration.Guidancefor

industry and FDA staff class Ⅱ special controls guidance document:AFP-L3% immunological test systems[EB/OL].(2005-10-04) http://www.fda.gov.

[4]吳在德，吳肇漢．外科學[M]．7版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：518-522．

[5]賈紅蓮，黃彩云，宋君利，等．血清AFP-L3、GP73檢測聯(lián)合CT掃描在肝細胞癌診斷中的價值[J]．現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2015，23(1)：101-103．

[6]黃彩云，韓素桂，張景華，等．甲胎蛋白異質(zhì)體/甲胎蛋白檢測聯(lián)合CT掃描在原發(fā)性肝癌診斷中的價值[J]．腫瘤防治研究，2014，41(2)：163-165．

[7]Toyoda H,Kumada T,Tada T,et al.Changes in highly sensitive alpha-fetoprotein for the prediction of the outcome in patients with hepatocellular carcinoma after hepatectomy[J].Cancer Med,2014,3(3):643-651.

[8]徐飛，牛文彥．甲胎蛋白和甲胎蛋白異質(zhì)體診斷原發(fā)性肝癌的價值[J]．天津醫(yī)科大學學報，2014，20(6)：475-476．

[9]楊收平，李海英，張麗．血清可溶性人類白細胞抗原G和甲胎蛋白、甲胎蛋白異質(zhì)體聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的診斷價值[J]．臨床薈萃，2014，29(8)：888-891．

[10]賈志凌，王莉，劉暢，等．甲胎蛋白異質(zhì)體對肝癌診斷的臨床意義[J]．中國腫瘤，2010，19(10)：686-688．

The application of lentil lectin-reactive alpha-fetoprotein ratio in the differential diagnosis of primary liver cancer

ZhaoXiaoling,WangJingjing,ZhaoQiaoyu,HuangLiangbin

(DepartmentofClinicalLaboratory，ChongqingNantongMiningCo.,LTDGeneralHospital，Chongqing400802,China)

Abstract:ObjectiveTo explore the application of lentil lectin-reactive alpha-fetoprotein ratio (AFP-L3%) applied in the differential diagnosis between hepatitis B infection of primary liver cancer and benign liver disease.MethodsWe included 108 cases of chronic HBV infection,including 50 cases of primary liver cancer,42 cases of cirrhosis,16 cases of chronic hepatitis.Chemiluminescence detection was used to detect alpha-fetoprotein (AFP) and AFP-L3 content,AFP-L3 and the ratio of AFP (AFP-L3%) was calculated.ResultsAFP≥400 ng/mL as primary liver cancer diagnostic threshold,the sensitivity and specificity were 36%,84%，when used AFP-L3%≥10% as primary liver cancer diagnostic threshold,the sensitivity and specificity were 62%,83%.ConclusionAFP-L3% is a better clinical indicator to distinguish between primary liver cancer and benign liver disease.AFP-L3% can be used as a clinical indicator to differential diagnosis between HBV infection of primary liver cancer and benign liver disease.

Key words:alpha-fetoprotein;primary liver cancer;benign liver disease;differential diagnosis

(收稿日期：2016-02-13)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.030

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)09-1228-03

作者簡介：趙曉玲，女，主管技師，主要從事常規(guī)化學與免疫專業(yè)研究。