潰瘍性結腸炎患兒血清炎癥因子及氧化應激水平變化及意義

朱　娟，劉志峰

(1. 南京大學醫學院附屬鼓樓醫院集團宿遷市人民醫院，江蘇 宿遷 223800；2. 南京醫科大學附屬南京兒童醫院,江蘇 南京 210008)

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潰瘍性結腸炎患兒血清炎癥因子及氧化應激水平變化及意義

朱娟1，劉志峰2

(1. 南京大學醫學院附屬鼓樓醫院集團宿遷市人民醫院，江蘇 宿遷 223800；2. 南京醫科大學附屬南京兒童醫院,江蘇 南京 210008)

[摘要]目的探討潰瘍性結腸炎患兒血清降鈣素原(PCT)、C反應蛋白(CRP)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)變化及其臨床意義。方法檢測61例潰瘍性結腸患兒(結腸炎組)、30例慢性感染性腹瀉病患兒(慢性腹瀉組)和30例健康兒童(對照組)血清 PCT、CRP、TNF-α、NO和SOD水平。結果結腸炎組血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平均明顯高于其他2組(P均<0.05)，SOD水平均明顯低于其他2組(P均<0.05)，其中PCT、CRP和 TNF-α水平慢性腹瀉組高于對照組(P均<0.05)；重度和活動期潰瘍性結腸炎患兒血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平均明顯高于輕中度和緩解期潰瘍性結腸炎患兒(P均<0.05)，SOD水平則明顯低于輕中度和緩解期潰瘍性結腸炎患兒(P均<0.05)。結論血清PCT、CRP、TNF-α、NO 、SOD水平可能成為評價潰瘍性結腸炎病情活動及嚴重程度的輔助指標，其中NO 、SOD水平有助于潰瘍性結腸炎和慢性感染性腹瀉的鑒別診斷。

[關鍵詞]潰瘍性結腸炎；感染性腹瀉；兒童；炎癥反應；氧化應激

潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種發病機制尚未明確的慢性非特異性腸道炎癥，腹瀉、腹痛以及黏液膿血便是成年潰瘍性結腸炎患者最主要的臨床表現[1-2]，而兒童潰瘍性結腸炎臨床癥狀不典型，容易誤診和漏診。潰瘍性結腸炎嚴重影響患兒的生長發育， 15%～25% 成人慢性潰瘍性結腸炎患者是在兒童時期起病, 并且這部分患者容易發生癌變[3]， 因此兒童潰瘍性結腸炎的早期診斷和早期治療成為臨床研究的熱點問題之一。早期準確的診斷是治療潰瘍性結腸炎的關鍵步驟，目前內鏡、腸黏膜組織病理活檢是診斷潰瘍性結腸炎的準確方法，但是創傷較大，限制了其在兒科中的應用。本研究擬通過檢測潰瘍性結腸炎及慢性感染性腹瀉患兒血清炎癥因子及氧化應激指標水平，以期為臨床診斷和判斷患兒病情提供參考依據，現將結果報道如下。

1臨床資料

1.1一般資料選擇2012年1月—2015年7月在宿遷市人民醫院兒科及消化科就診的61例潰瘍性結腸炎患兒為結腸炎組，患兒均經小兒纖維結腸鏡及病理活檢確診，診斷標準符合2007年中華醫學會消化病學會炎癥性腸病協作組制定的診斷標準[4]。其中男36例，女25 例；年齡5～15 (9.96±3.13) 歲；結腸鏡下表現根據改良的Baron評分標準[5]判定為輕中度38例，重度23例；根據UCAI評分標準[6]分為活動期36例，緩解期25例。選擇同期兒科就診、符合兒童慢性感染性腹瀉病診斷標準[7]的慢性感染性腹瀉病患兒30例作為慢性腹瀉組，其中男17例，女13例；年齡5～16(9.85±4.27)歲。2組均排除伴有嚴重的并發癥如腸梗阻、腸穿孔等患兒；伴有呼吸系統、循環系統等其他器官嚴重疾患者；病例資料不完整，診斷不明確者。另選擇同期進行健康體檢的30例兒童作為對照組，男16例，女14例；年齡5～16(9.22±4.89)歲。3組性別、年齡比較差異均無統計學意義(P均>0.05)，具有臨床可比性。

1.2方法所有研究對象家長簽署知情同意書后，經醫院倫理委員會批準開始研究。采集受檢者靜脈血，檢測血清降鈣素原(PCT)、C反應蛋白(CRP)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)水平，其中PCT采用半定量固相免疫測定法檢測，試劑盒由德國柏林BRAHMS Diagnostica公司生產；血清CRP使用美國Beckman CX-V型全自動生化儀、免疫散射比濁法檢測；TNF-α采用ELISA法檢測，試劑盒購自上海基免實業有限公司；NO、SOD采用ELISA法進行檢驗，試劑盒由上海研生生化試劑有限公司提供。

2結果

2.13組血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平比較結腸炎組血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平均高于其他2組(P均<0.05)，SOD水平均明顯低于其他2組(P均<0.05)，慢性腹瀉組血清PCT、CRP和 TNF-α水平明顯高于對照組(P均<0.05)。見表1。

2.2不同程度潰瘍性結腸炎患兒血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平比較輕中度潰瘍性結腸炎患兒血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平均明顯低于重度潰瘍性結腸炎患兒(P均<0.05)，SOD水平則明顯高于重度潰瘍結腸炎患兒(P均<0.05)。見表2。

表1　3組血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平比較

注：①與結腸炎組比較，P<0.05；②與對照組比較，P<0.05。

表2　不同程度潰瘍性結腸炎患兒血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平比較

2.3不同分期潰瘍性結腸炎患兒血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平比較活動期潰瘍性結腸炎患兒血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平均明顯高于緩解期潰瘍性結腸炎患兒(P均<0.05)，SOD水平則明顯低于緩解期潰瘍性結腸炎患兒(P均<0.05)。見表3。

3討論

表3　不同分期潰瘍性結腸炎患兒血清PCT、CRP、TNF-α和NO水平比較

潰瘍性結腸炎是兒童期最主要的慢性胃腸道疾病之一，在歐美等西方發達國家,兒童潰瘍性結腸炎發病率為(13～32)/10萬[3，8],目前國內兒童潰瘍性結腸炎的發病率尚不清楚，近年由于環境變化及診療技術的不斷改善，臨床工作中確診為兒童潰瘍性結腸炎的數量呈現明顯增加的趨勢，兒童正處于生長發育期，因此營養不良在潰瘍性結腸炎患兒中較為常見，患兒常表現為體質量明顯下降和生長發育延遲[9],因此對于兒童潰瘍性結腸炎的早期診斷和早期治療具有重要的臨床價值。但兒童潰瘍性結腸炎并無特異性癥狀，容易誤診為慢性感染性腹瀉，明確診斷常需要進行腸鏡以及活檢，但是結腸鏡檢查對患兒身體有一定的損傷，并且檢查前需要對患兒使用鎮靜藥物，難以在臨床上對患兒進行篩查，而血清標本獲得較為容易并且對機體創傷性小,因此對于潰瘍性結腸炎的血清指標的研究一直是臨床研究的重點。

潰瘍性結腸炎的具體發病機制目前尚未完全明確，近年越來越多的研究認為炎癥反應可能在本病的發生過程中發揮主要作用[10-11]，臨床常規檢查中白細胞以及中性粒細胞計數均會明顯升高，但這兩種炎性指標由于靈敏度和特異性均較低，難以與其他腸道炎性疾病進行區分，并且難以反映潰瘍性結腸炎活動狀態。PCT是由甲狀腺濾泡分泌的糖蛋白，在感染等情況下PCT水平明顯升高；CRP是人體肝臟合成的急性時相蛋白，在機體發生炎癥后其濃度明顯升高；TNF-α主要由活化的單核/巨噬細胞分泌產生，具有促進中性粒細胞吞噬，誘導肝細胞急性期蛋白合成，促進細胞增殖和分化的功能，是一種重要的炎癥因子，并且其還可促進IFN-γ改變腸上皮細胞的正常形態結構，導致腸道黏膜通透性增加，從而誘導結腸上皮細胞壞死和凋亡，促進潰瘍性結腸炎的發生[12]。本研究結果顯示，結腸炎組血清PCT、CRP、TNF-α水平均明顯高于其他2組，且慢性腹瀉組高于對照組；重度和活動期潰瘍性結腸炎患兒血清PCT、CRP、TNF-α水平均明顯高于輕中度和緩解期潰瘍性結腸炎患兒。說明血清PCT、CRP和TNF-α水平對于潰瘍性結腸炎患兒的病情有一定的預測價值，但是慢性感染性腹瀉患兒的上述指標同樣升高，因此炎癥指標在潰瘍性結腸炎的鑒別診斷中需要進一步研究，以確定判斷潰瘍性結腸炎和慢性感染性腹瀉相關指標的最佳截斷值。

氧化應激是指身體遭受有害刺激后，導致活性氧產生不斷增加，活性氧自由基的含量超出機體清除能力，打破機體氧化系統和抗氧化系統的平衡，從而導致機體組織的損傷，其在潰瘍性結腸炎的發病中可能發揮著誘導和加重的作用。NO 是一種常見的氧自由基，Potoka等[13]研究發現NO 能通過影響機體多種免疫活性物質分泌和釋放,激活和放大炎癥及免疫反應, 形成一種瀑布效應，從而導致機體組織的損傷。劉成義等[14]研究發現NO與潰瘍性結腸炎的嚴重程度分級具有正相關性。劉迪群等[15]研究發現潰瘍性結腸炎患者結腸黏膜NO水平明顯增高，NO水平可作為反映潰瘍性結腸炎患者病變程度及判斷預后的一個客觀指標。SOD是一種清除自由基金屬離子的蛋白質,其主要功能是催化超氧陰離子自由基歧化為過氧化氫和氧，從而對抗機體的氧化作用，機體中SOD的活性升高可以減輕組織細胞過氧化性損傷[16]。劉建生等[17]研究發現潰瘍性結腸炎患者血、腸黏膜中NO明顯升高而SOD明顯減少，認為NO和SOD可能是潰瘍性結腸炎發生和發展的重要因素之一。但是以往的研究多集中在成年潰瘍性結腸炎患者中，對于兒童潰瘍性結腸炎氧化應激指標的研究較為罕見。本研究結果顯示，重度和活動期患兒血清NO水平均明顯高于輕中度及緩解期患兒，SOD水平則明顯低于輕中度及緩解期患兒，并且慢性感染性腹瀉患兒水平升高不明顯。提示NO和SOD不但對潰瘍性結腸炎患兒的病情有一定的預測價值，而且對潰瘍性結腸炎和慢性感染性腹瀉的鑒別診斷同樣有廣泛的應用前景。

[參考文獻]

[1]Jairath V,Khanna R,Zou GY,et al. Development of interim patient-reported outcome measures for the assessment of ulcerative colitisdisease activity in clinical trials[J]. Aliment Pharmacol Ther，2015，42(10):1200-1210

[2]Müllertz A,Fatouros DG,Vertzoni M,et al. Unravelling the ultrastructure of ascending colon fluids from patients with ulcerative colitis by cryogenic transmission electron microscopy[J]. J Pharm Pharmacol，2013，65(10):1482-1427

[3]Cuffari C. Inflammatory bowel disease in children:a pediatrician’s perspective[J]. Minerva Pediatr,2006,58(2):139-157

[4]中華醫學會消化病學會炎癥性腸病協作組． 對我國炎癥性腸病診斷治療規范的共識意見[J]． 中華消化雜志，2007，27(8)：545

[5]王海浪，王巧民，宋繼中. 潰瘍性結腸炎住院患者臨床病情評估與治療分析[J]. 安徽醫藥，2012,16(6):780-782

[6]何雁，伏建峰，王嵐. 潰瘍性結腸炎血清中IL-6和IL-8水平分析[J]. 西北國防醫學雜志,2014,35(3):265-266

[7]胡亞美，江載芳，諸福棠，等. 實用兒科學[M]. 7版. 北京：人民衛生出版社，2002:1289-1290

[8]Ravikumara M,Sandhu BK. Epidemiology of inflammatory bowel d-iseases in childhood[J]. Indian J Pediatr,2006,73(8):717-721

[9]孫梅，滕旭，郭靜． 兒童炎癥性腸病的病因及發病機制[J]. 中華兒科雜志，2011，49(4):266-269

[10] 趙曼，高峰. 潰瘍性結腸炎發病機制研究進展[J]． 現代生物醫學進展，2010，10(16):3160-3165

[11] 梁皓天，宋靜榮． TNF-α、IL-6、IL-8水平與潰瘍性結腸炎相關性研究[J]. 中國現代藥物應用，2010，4(21):92

[12] 張超賢,秦詠梅. 潰瘍性結腸炎患者血清腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-8水平變化及其臨床意義[J]. 西安交通大學學報：醫學版，2009,30(5):646-647

[13] Potoka DA,Nadler EP,Upperman JS,et al. Role of nitric oxide and peroxynitrite in gut barrier failure[J]. World J Surg,2002,26(7):806-811

[14] 劉成義，杜美燕. 潰瘍性結腸炎患者中血小板計數與一氧化氮的相關性及其臨床意義[J]. 中國實用醫藥，2010,5(36):55-57

[15] 劉迪群,吳成秋,石巍,等. 潰瘍性結腸炎患者腫瘤壞死因子、白細胞介素8及黏膜一氧化氮合酶、一氧化氮的變化[J]. 臨床薈萃，2006，21(2):114-115

[16]ShchuplovaEA,StadnikovAA,FadeevSB.Roleofbiologicalchar-acteristicsofstaphylococcusepidermidisinintr-aerythrocyticinvasionandinmodulationoferythrocytecatalaseandsuperoxidedismutaseactivitiesinexperimentalgeneralizedinfection[J].BullExpBiolMed，2015，159(1):70-72

[17] 劉建生，田怡，張曉紅，等. 潰瘍性結腸炎與一氧化氮和氧自由基關系及丹參治療作用研究[J]. 中國醫師雜志,2006，8(8):1040-1042

The changes and its significance of serum inflammatory factor and oxidative stress levels in children with ulcerative colitis

ZHU Juan1, LIU Zhifeng2

(Suqian People’s Hospital of Nanjing Drum-Tower Hospital Group, Suqian 223800, Jiangsu, China; 2.Nanjing Children's Hospital Affiliated to Nanjing Medical University, Nanjing 210008, Jiangsu, China)

Abstract:Objective It is to study the clinical value of serum (PCT), C-reactive protein (CRP), tumor necrosis factor-α(TNF-α), nitric oxide (NO) and superoxide dismutase (SOD) in child patients with ulcerative colitis. Methods The levels of PCT, CRP, TNF-α, NO and SOD were detected in 61 children with ulcerative colitis (ulcerative colitis group), 30 children of chronic infectious diarrhea(chronic diarrhea group) and 30 healthy children (control group). Results The levels of NO, TNF-α, CRP and PCT in the ulcerative colitis group were higher while the level of SOD was lower than that in the other two groups, and the levels of PCT, CRP and TNF-α in the chronic diarrhea group were higher than that in control group, the differences were all significant (P<0.05). The levels of NO, TNF-α, CRP and PCT were significantly lower while the level of SOD was lower in the mild and moderate ulcerative colitis group than that in severe ulcerative colitis group, the differences were all significant (P<0.05). The levels of NO, TNF-α, CRP and PCT were higher while the level of SOD was lower in the active ulcerative colitis group than that in moderate ulcerative colitis groupthe differences were all significant (P<0.05). Conclusion Serum levels of PCT, CRP, TNF-α, NO and SOD may be potential marker in the evaluation of ulcerative colitis severity and activity, NO, SOD levels are helpful in differentiating ulcerative colitis and chronic infectious diarrhea.

Key words:ulcerative colitis; infectious diarrhea; children; inflammatory reaction; oxidative stress

[收稿日期]2015-12-03

[中圖分類號]R574.62

[文獻標識碼]A

[文章編號]1008-8849(2016)14-1492-04

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.14.004

[作者簡介]朱娟，女，副主任醫師，從事兒科臨床工作。[通信作者]劉志峰，E-mail：liu8917@163.com