系統性紅斑狼瘡患者血清維生素D水平與維生素D抗體及自身抗體關系的研究

邢桂芝，王志敏，石哲群，佟勝全，房　成，褚金龍

(1.唐山市工人醫院 檢驗科，河北 唐山063000；2.河北大學附屬醫院 風濕免疫科；3.唐山市康復醫療中心)

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系統性紅斑狼瘡患者血清維生素D水平與維生素D抗體及自身抗體關系的研究

邢桂芝1，王志敏2*，石哲群3，佟勝全3，房成1，褚金龍1

(1.唐山市工人醫院 檢驗科，河北 唐山063000；2.河北大學附屬醫院 風濕免疫科；3.唐山市康復醫療中心)

摘要：目的觀察系統性紅斑狼瘡(SLE)患者血清25羥基維生素D3(25-OH-D3)水平與疾病活動度的相關性，研究其與維生素D抗體(VD-Ab)及自身抗體的關系，并探討其臨床意義。方法收集資料完整的90例SLE患者及60例健康志愿者的血清標本。應用化學發光法測定血清25-OH-D3水平，酶聯免疫(ELISA)法測定血清VD-Ab水平，免疫斑點法測定自身抗體。采用SPSS 13.0軟件進行數據分析。結果病例組血清25-OH-D3水平為10.29±5.74 ng/ml，對照組血清25-OH-D3水平為13.72±5.39ng/ml，兩組比較，差異有統計學意義，P<0.05。病例組血清VD-Ab水平為792.2±450.7 nmol/L，對照組為705.3±280.2 nmol/L，差異無統計學意義，P>0.05。SLE患者血清25-OH-D3水平與VD-Ab水平無明顯相關性(r=-0.120，P>0.05)，與SLEDAI呈負相關(r=-0.417，P<0.01)。SLE患者抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗心磷脂抗體陽性組血清25-OH-D3水平低于陰性組，P<0.05。抗nRNP抗體、抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗Ro52抗體、抗SSB抗體、抗核小體抗體、抗核糖體P蛋白抗體陽性組與陰性組血清25-OH-D3水平比較差異無統計學意義，P>0.05。結論SLE患者血清25-OH-D3水平低下，與疾病活動度負相關。SLE患者血清維生素D水平降低與VD-Ab無關，可能與抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗心磷脂抗體有關，維生素D在SLE發病中起重要作用。

關鍵詞：系統性紅斑狼瘡；25-羥-維生素D3；維生素D抗體；自身抗體

(ChinJLabDiagn,2016,20:0592)

系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種多臟器功能損害的自身免疫性疾病，以血清中出現多種自身抗體為特征。研究發現，維生素D與SLE疾病活動相關，它可能是一種免疫調節劑[1-2]。維生素D參與T淋巴細胞、樹突狀細胞、單核-巨噬細胞、B細胞等的增殖與分化，以及抑制細胞因子、抗體的產生[3]。維生素D的缺乏可能與維生素D抗體(VD-Ab)有關[4]，然而，該結論尚有爭議。本文旨在觀察SLE患者體內25羥基維生素D3(25-OH-D3)及VD-Ab的水平及兩者的相關性，研究25-OH-D3水平與自身抗體的關系，并探討維生素D在SLE發病中的可能作用。

1資料與方法

1.1臨床資料收集2013年11月-2015年3月在唐山市工人醫院風濕免疫科住院，資料完整的SLE患者為病例組。SLE患者共90例，其中女79例，男11例，年齡(37±13)歲；入選患者具備以下條件：(1)均符合1997年ACR制定的SLE分類標準或2009年ACR修訂的SLE診斷標準。(2)初發或未服用過鈣劑、維生素D及維生素D類似物。(3)未合并其他自身免疫性疾病及甲狀腺功能亢進等影響體內維生素D代謝的疾病。以60例健康志愿者為對照組，其中女53例，男7例，年齡(35±10)歲。病例組和對照組的年齡及性別比較，差異無統計學意義，P>0.05。

1.2實驗方法研究對象均于次日晨起留取空腹靜脈血3 ml，靜止30 min后以3 000 r/min離心5 min，再取上清液-80℃保存。25-OH-D3水平由北京大學第三醫院化驗室采用化學發光法檢測。使用北京誠林生物科技有限公司進口分裝的人維生素D抗體ELISA試劑盒(批號LOT201410)測定VD-Ab水平，操作嚴格按照試劑盒使用說明書。自身抗體由唐山工人醫院應用免疫斑點法測定。

2結果

2.1病例組和對照組血清25-OH-D3及VD-Ab水平的比較見表1。

表1　兩組血清25-OH-D3及VD-Ab水平的比較

注：與對照組比較，*P<0.05

2.2SLE患者血清25-OH-D3水平與VD-Ab水平無明顯相關，r=-0.120，P>0.05。

2.3SLE患者血清25-OH-D3水平與疾病活動度的相關性根據SLE疾病活動性指數積分表(systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI)對SLE患者進行評分，SLE患者血清25-OH-D3水平與SLEDAI呈負相關，相關系數r=-0.417，P<0.01。

2.4SLE患者血清25-OH-D3水平與自身抗體的關系根據自身抗體陰性或陽性分為兩組，分別比較兩組間血清25-OH-D3水平，抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體、抗心磷脂抗體陽性組與陰性組25-OH-D3水平比較差異有統計學意義，P<0.05；抗nRNP抗體、抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗Ro52抗體、抗SSB抗體、抗核小體抗體、抗核糖體P蛋白抗體陽性組與陰性組25-OH-D3水平比較差異無統計學意義，P>0.05(表2)。

表2SLE患者血清25-OH-D3水平與自身抗體的關系

自身抗體結果n25-OH-D3(ng/ml)t/zP抗dsDNA抗體+388.3±4.2-3.4120.003-5211.7±5.8抗nRNP抗體+289.0(5.8-13.0)-0.2350.814-629.2(5.2-13.6)

3討論

流行病學調查顯示，維生素D的缺乏與許多慢性病，如自身免疫性疾病、癌癥、心血管疾病、糖尿病、感染性疾病等，有著密切的關系[3]。近年，越來越多的研究發現，SLE患者體內的維生素D水平出現明顯下降[4-5]。多項研究發現，SLE患者維生素D水平與SLE疾病活動度呈負相關。Ritterhouse LL等[6]提出，25-OH-D3與系統性紅斑狼瘡臨床活動、抗C1q抗體、抗dsDNA抗體相關。Munoz L E等[7]提出，SLE患者血清25-OH-D3水平與舒張壓、空腹血糖、膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、BMI、蛋白尿和補體C3相關。本研究通過對比發現，SLE患者血清25-OH-D3水平低于健康對照組，且維生素D水平與SLEDAI明顯負相關，與國內外研究相一致。本實驗將維生素D水平不足定義為25-OH-D3<20 ng/mL，健康對照組血清25-OH-D3水平也明顯低于參考值，這表明維生素D的缺乏可能是個普遍性問題。本研究納入SLE患者基本為初發，且未服用過鈣劑或維生素D類似物等影響體內維生素D代謝的藥物，SLE患者維生素D水平降低，考慮其可能與SLE發病相關，維生素D可能有免疫調節作用。SLE患者體內維生素D水平降低，除與年齡、種族、陽光暴露、使用防曬霜、吸煙、某些藥物、皮膚色素沉著、飲食攝入和遺傳等相關外，有學者提出維生素D降低可能與SLE患者體內產生VD-Ab有關，尤其是抗磷脂抗體綜合征患者體內存在 VD-Ab[8]，而本研究并未發現SLE患者血清VD-Ab水平高于健康對照組，也未發現25-OH-D3與VD-Ab的相關性，與Ganley I G 等[9]研究結果相一致，SLE患者維生素D水平降低可能與VD-Ab無關，而與環境、免疫等多種因素相關。

維生素D缺乏可能與SLE患者的免疫異常相關，因此，有學者猜測，維生素D缺乏參與自身抗體的產生[10]。在此之前，已經通過體外研究證實，維生素D阻止B細胞分化，抑制B細胞抗體及自身抗體的產生[11]。也有報道認為，維生素D缺乏與凋亡細胞的清除機制相關，從而導致ANA過多的產生[12]。本研究將自身抗體陰性與陽性進行分組，發現抗dsDNA陽性組血清25-OH-D3水平低于抗dsDNA陰性組，與CC Mok等[13]人研究相一致。此外，本研究發現，抗組蛋白抗體、抗心磷脂抗體陽性組血清25-OH-D3水平均低于陰性組。抗組蛋白抗體與SLE疾病活動程度相關，且對狼瘡腎臟疾病的特異性高于抗dsDNA抗體[14-15]，這間接反應維生素D水平降低可能與狼瘡腎炎相關。抗心磷脂抗體陽性組維生素D降低，可能由該抗體消耗維生素D有關。然而，本研究并未發現抗nRNP抗體、抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗Ro52抗體、抗SSB抗體、抗核小體抗體、抗核糖體P蛋白抗體陽性組與陰性組25-OH-D3水平的差異，有待于進一步的研究。

在狼瘡動物模型中，補充維生素D可以抑制疾病活動。近年來，越來越多的文獻提示SLE患者補充維生素D的重要性，它可能對SLE起到預防和治療的作用，維生素D可能成為SLE等自身免疫性疾病的背景用藥。然而，補充維生素D是否可以緩解SLE疾病活動度，以及SLE患者如何補充維生素D，仍需要大規模的研究證實。

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Study of Relationships between 25-Hydroxyvitamin D3 and both Vitamin D Antibodies and Autoantibodies in Systemic Lupus Erythematosus

XINGGui-zhi,WANGZhi-min,SHIZhe-qun,etal.

(TangshanWorker′sHospital,Tangshan063000,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the associations of Serum 25-hydroxyvitamin D3 (25-OH-D3) levels with disease activity inPatients with systemic lupus erythematosus (SLE),study the relationships between 25-OH-D3 and both vitamin D-antibody (VD-Ab) and autoantibodies,and investigate their clinical significance.MethodsTo collect serum samples of 90 cases of SLE patients whose data complete and 60 cases of healthy volunteers.Applicating chemiluminescence to determinate the level of serum 25-OH-D3,the Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) method was employed to detect the level of serum VD-Ab,applicating immune spot to determinate autoantibodies.Data analysis is done with SPSS 13.0 statistical software.ResultsThe average level of serum 25-OH-D3 of patient group was 10.29±5.74 ng/ml,and control group was 13.72±5.39 ng/ml,compare it between them,showed P<0.05,the difference was statistically significant.The serum VD-Ab level in patient group was 792.2±450.7 nmol/L,and the level in control group was 705.3±280.2 nmol/L,it not reach statistical significance,P>0.05.There was no significant relationships between the level of serum 25-OH-D3 and the level of serum VD-Ab(r=-0.120，P>0.05),a negative correlation was found between the levels of 25-OH-D3 and SLEDAI(r=-0.417，P<0.01).The level of serum 25-OH-D3 in SLE patients with anti dsDNA,anti-histone,anticardiolipin antibody positive group was lower than that of the negative group,P<0.05.There was no significant difference between the level of serum 25-OH-D3 of anti-nRNP antibody,anti-Sm antibody,anti-SSA antibody,anti-Ro52 antibody,anti-SSB antibody,anti nucleosome antibody,anti-Ribp antibody positive group and that of the negative group,P>0.05.ConclusionThe level of serum vitamin D in SLE patient is low,and it is negatively correlated with disease activity.The low level of serum 25-OH-D3 is not correlated with anti-vitamin D antibody,it may correlated with anti dsDNA antibody,anti-histone antibody and anticardiolipin antibody,vitamin D is important in the pathogenesis of SLE．

Key words:Systemic lupus erythematosus;25-Hydroxyvitamin D3;Vitamin D-Antibody;Autoantibodies

(收稿日期：2015-07-16)

中圖分類號：R593.241

文獻標識碼：A

*通訊作者

基金項目：河北省衛生廳科研項目(20150956)

文章編號：1007-4287(2016)04-0592-04