食管黏膜脫落細(xì)胞DNA倍體聯(lián)合血清標(biāo)志物檢測(cè)在食管癌診斷中的價(jià)值

李德生,居來(lái)提·安尼瓦爾,伊力亞爾·夏合丁,張　鑄,張力為

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 胸外科 ,新疆 烏魯木齊830054)

?

食管黏膜脫落細(xì)胞DNA倍體聯(lián)合血清標(biāo)志物檢測(cè)在食管癌診斷中的價(jià)值

李德生,居來(lái)提·安尼瓦爾,伊力亞爾·夏合丁,張鑄,張力為*

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 胸外科 ,新疆 烏魯木齊830054)

摘要：目的探討血清腫瘤標(biāo)志物神經(jīng)元特異性烯醇化酶( NSE) 、癌胚抗原( CEA) 聯(lián)合食管黏膜脫落細(xì)胞DNA倍體在食管癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法選取我院收治的經(jīng)胃鏡診斷為食管病變患者128例,其中64為食管癌患者,64例為食管良性病變患者,使用羅氏電化學(xué)發(fā)光免疫系統(tǒng)檢測(cè)其血清 NSE 、CEA 水平,采用ICM檢測(cè)DNA倍體水平,分析其特異性及敏感性。結(jié)果64例食管癌患者中有45例DNA倍體為陽(yáng)性,64例食管良性病變患者中,3例DNA倍體異常,食管癌組患者的NSE、CEA水平均明顯高于良性病變組,組間比較有明顯差異,P<0.05,CEA、NSE以及DNA倍體對(duì)于食管癌的診斷均具有較高的特異性,而敏感性較低,3者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于食管癌的診斷有較高的敏感性以及特異性,其分別為87.50 %以及84.38 %。結(jié)論NSE、CEA以及DNA倍體可以作為早期診斷食管癌的重要輔助指標(biāo),而聯(lián)合檢測(cè)則能夠顯著提高診斷的敏感性,具有一定的臨床意義。

關(guān)鍵詞：DNA倍體；NSE；CEA；聯(lián)合檢測(cè)

(ChinJLabDiagn,2016,20:0554)

我國(guó)是食管癌的高發(fā)地區(qū),其發(fā)病率和死亡率均較高,食管癌患者確診時(shí)大多數(shù)已處于晚期,病情嚴(yán)重,預(yù)后較差,故需尋求早期診斷的方法[1],腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)對(duì)于惡性腫瘤的早期診斷有著十分重要的作用,目前已發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物有百余種,DNA倍體即DNA復(fù)制物,其分為DNA二倍體、三倍體以及多倍體,其出現(xiàn)與癌變率和癌前病變?cè)錾潭扔嘘P(guān),是癌前病變發(fā)生癌變的一個(gè)重要指標(biāo)。隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)的不斷發(fā)現(xiàn),人們采用圖像分析技術(shù)(ICM)來(lái)測(cè)定DNA倍體含量[2],從而使我們能夠從分子生物學(xué)水平來(lái)了解癌前病變,實(shí)現(xiàn)早期發(fā)現(xiàn)和治療腫瘤的目的,提高患者的預(yù)后,本研究中,我們將對(duì)腫瘤標(biāo)志物NSE、CEA以及DNA倍體測(cè)定聯(lián)合用于食管癌的診斷價(jià)值分析。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2013年1月-2015年1月間我院門(mén)診以及住院行胃鏡檢查發(fā)現(xiàn)的食管病變患者128例,其中男75例,女53例,年齡35-88歲,平均年齡(51.44±11.38)歲,經(jīng)過(guò)病理確診為食管惡性腫瘤64例,其余64例為食管良性病變例。

1.2檢測(cè)方法

對(duì)所有入選的患者于入院后行內(nèi)鏡及X線鋇透檢查,內(nèi)鏡下懷疑有惡性病變的患者則需取病理組織進(jìn)行活檢,胃鏡下刷取食管壁上的可疑病灶處黏膜脫落細(xì)胞,采用流式細(xì)胞儀檢進(jìn)行DNA倍體分析,隨后進(jìn)行細(xì)胞染色,再采用ModFit LT2.0軟件分析,用正常人外周血的淋巴細(xì)胞作為正常二倍體參照標(biāo)準(zhǔn)[3],根據(jù)軟件所作出的DNA倍體分析判定如下： 陰性( -) :主要為二倍體細(xì)胞,未發(fā)現(xiàn)異倍體細(xì)胞; 弱陽(yáng)性(+):可見(jiàn)DNA指數(shù)( DI)>2.5細(xì)胞及D1-2的細(xì)胞數(shù)量超過(guò)了選取細(xì)胞總量的10%;陽(yáng)性(++):DI>2.5細(xì)胞數(shù)量為3-5個(gè);強(qiáng)陽(yáng)性(+++):DI>2.5細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目超過(guò)6個(gè)。抽取清晨空腹靜脈血,離心處理后取上清液,采用羅氏公司 ELECSY S2010電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)對(duì)NSE以及CEA水平進(jìn)行檢測(cè),參考標(biāo)準(zhǔn)：不吸煙者CEA<3.4 ng/ml,吸煙者<4.3 ng/ml,NSE<15.2 ng/ml。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1病理組織診斷與DNA倍體分析結(jié)果

在64例病理學(xué)診斷為食管癌患者中有45例患者的DNA倍體為陽(yáng)性,陽(yáng)性率為70.31%(45/64),64例病理診斷為食管良性病變患者中,有3例患者DNA倍體異常,陽(yáng)性率為4.69 %(3/64),陽(yáng)性率方面組間比較有明顯差異,χ2=18.397,P<0.05,見(jiàn)表1。

表1食管脫落細(xì)胞DNA倍體分析結(jié)果

DNA倍體含量食管癌食管良性病變合計(jì)-196180+9312++15015+++21021合計(jì)6464128

2.2腫瘤標(biāo)志物水平比較

食管癌組患者的NSE、CEA水平均明顯高于良性病變組,組間比較有明顯差異,P<0.05,見(jiàn)表2。

組別nNSECEA食管癌組6422.18±3.178.63±2.88良性病變組644.67±1.390.83±0.14t值6.7375.624P值<0.05<0.05

2.3標(biāo)志物聯(lián)合DNA倍體檢測(cè)的特異性和敏感性比較

CEA、NSE以及DNA倍體對(duì)于食管癌的診斷均具有較高的特異性,而敏感性較低,3者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于食管癌的診斷有較高的敏感性以及特異性,其分別為84.38%以及87.50%,見(jiàn)表3。

表3　　　　血清NSE、CEA以及DNA倍體聯(lián)合檢測(cè)的特異性

3討論

食管癌是臨床上常見(jiàn)的惡性腫瘤疾病之一,但臨床確診時(shí)多數(shù)患者已處于晚期,行手術(shù)治療的5年生存率也僅為25 %-40 %左右,而早期食管癌患者手術(shù)治療后則能夠達(dá)到90%[4],所以對(duì)于食管癌進(jìn)行早期診斷和治療顯得十分重要,腫瘤標(biāo)志物在腫瘤之中,或是由腫瘤自身產(chǎn)生,也可能是腫瘤的宿主因腫瘤的存在而產(chǎn)生,可以應(yīng)用其對(duì)腫瘤組織以及正常組織進(jìn)行鑒別,而所謂的腫瘤標(biāo)志物指的就是取自血漿、組織以及其他體液中所能檢測(cè)到的相關(guān)生化物質(zhì),當(dāng)這類(lèi)物質(zhì)達(dá)到一定的水平時(shí),就表明有腫瘤存在[5]。

CEA是被最早發(fā)現(xiàn)存在于結(jié)腸癌以及胎兒的腸組織細(xì)胞膜上的一類(lèi)酸性糖蛋白,經(jīng)過(guò)免疫學(xué)研究發(fā)現(xiàn)[6],其歸屬于免疫球蛋白超家族中的一員,在成年人的胃腸道腫瘤中,腫瘤細(xì)胞會(huì)重新表達(dá)CEA,若發(fā)現(xiàn)CEA水平開(kāi)始升高,則有可能為結(jié)腸癌、肺癌、胰腺癌,腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)也成為了近些年來(lái)臨床對(duì)于腫瘤進(jìn)行早期診斷的一項(xiàng)重要方法[7],同時(shí)也不斷有新的腫瘤標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)而應(yīng)用于臨床,NSE、CEA則是目前臨床上較為廣泛應(yīng)用的兩種腫瘤標(biāo)志物,本研究選取NSE和CEA對(duì)食管癌進(jìn)行早期診斷,結(jié)果發(fā)現(xiàn),食管癌組患者的NSE、CEA水平均明顯高于食管良性病變組,表明NSE、CEA對(duì)于食管癌的診斷有著積極的意義。

而大量的研究表明,DNA倍體異型性與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著十分緊密的聯(lián)系,通過(guò)了解腫瘤細(xì)胞DNA倍體情況,了解其生物學(xué)特性,有助于我們對(duì)腫瘤進(jìn)行診斷、預(yù)后的判斷以及選擇治療方案,隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)的不斷發(fā)展,ICM應(yīng)用于DNA的測(cè)定也被應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域[8-10],國(guó)內(nèi)以及國(guó)外的許多研究都發(fā)現(xiàn)了DNA倍體以及食管癌的生理、病理以及預(yù)后之間有著緊密的聯(lián)系[11-14]。

通過(guò)本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),良性病變患者中僅3例表現(xiàn)出了DNA倍體異常,但是食管癌患者中出現(xiàn)了45例異常,說(shuō)明DNA倍體有助于診斷食管癌,通過(guò)NSE、CEA以及DNA倍體的單獨(dú)以及聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果顯示,三者單獨(dú)檢測(cè)在食管癌中均具有較高的特異性,而敏感性較低,3者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于食管癌則均具有較高的特異性以及敏感性,分別達(dá)到了87.50 %以及84.38 %,可以看出,兩種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合DNA倍體的檢測(cè),不僅能夠提高診斷的符合率,同時(shí)也能夠?qū)颊叩寞熜б约邦A(yù)后評(píng)價(jià)提供客觀的量化指標(biāo)。

綜上所述,NSE、CEA以及DNA倍體聯(lián)合檢測(cè)可以作為食管癌診斷的輔助指標(biāo),其能夠提高食管癌診斷敏感性,值得臨床推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)：

[1]Blom RL,Steenbakkers IR,Lammering G,et al.PET/CT-based metabolic tumour volume for response prediction of neoadjuvant chemoradiotherapy in oesophageal carcinoma[J].Eur J Nucl Med Mol Imaging,2013,40(10):1500.

[2]Cho H,Kang ES,Kim YT,et al.Diagnostic and prognostic impact of osteopontin expression in endometrial cancer[J].Cancer Invest,2009,27(3):313.

[3]Morteza Aghmesheh,Akshat Saxena,Farshid Niknam.BRCA 1 mutation site may be linked with nuclear DNA ploidy in BRCA 1-mutated ovarian carcinomas[J].Asia-Pac J Clin Oncol,2015,11(2):135.

[4]李學(xué)民,湯薩,彭秀青,等.1973—2005年手術(shù)治療食管癌患者5年生存率變化分析[J].腫瘤防治研究,2014,12(03):237.

[5]Chen CG,Cui L,Tang P,et al.Clinical significance of serum high-mobility group box 1 detection in esophageal squamous cell carcinoma[J].Zhonghua Wei Chang Wai Ke Za Zhi,2010,48(10):1467.

[6]Groblewska M,Mroczko B,Kozlowski M,et al.Serum matrix metalloproteinase 2 and tissue inhibitor of matrix metalloproteinases 2 in esophageal cancer patients[J].Folia Histochem Cytobiol,2014,35(4):3793.

[7]Wang TY,Liu SG,Zhao BS,et al.Implications of microRNA-197 downregulated expression in esophageal cancer with poor prognosis[J].Genetics and Molecular Research,2014,13(3):5574.

[8]Pellicer J,Clermont S,Houston L,et al.Cytotype diversity in the Sorbus complex (Rosaceae) in Britain:sorting out the puzzle[J].Ann Bot,2012,110(6):1185.

[9]Walter J,Vekslyarska T,Dobe C.Flow cytometric,chromosomal and morphometric analyses challenge current taxonomic concepts in the Portulacaoleracea complex ( Portulacaeae,C aryophyllales)[J].Bot J Linn Soc,2015,179(01),144.

[10]Green RW,Engblom S,Baldetorp B,et al.Cell proliferation,measured as flow cytometric S‐phase fraction,is a strong prognostic indicator in FIGO stage I endometrioid endometrial carcinoma:a population‐based study[J].Acta Obstet Gynecol Scand,2015,94(10):1064.

[11]張廷友,黃文碧,柏玉舉,等.三維適形放療同期聯(lián)合奈達(dá)鉑加替加氟化療治療中晚期食管癌39例近期療效觀察[J].貴州醫(yī)藥,2013,37(03):214.

[12]Pradhan M,Abeler VM,Danielsen HE,et al.Prognostic importance of DNA ploidy and DNA index in stage I and Ⅱ endometrioid adenocarcinoma of the endometrium[J].Ann Oncol,2012,23(5):1178.

[13]Tollefson MK,Karnes RJ,Kwon ED,et al.Prostate Cancer Ki-67 (MIB-I) Expression,Perineural Invasion,and Gleason Score as Biopsy-Based Predictors of Prostate Cancer Mortality:The Mayo Model[J].Mayo Clin Proc,2014,89(3):308.

[14]Shirazi Fard S,All-Ericsson C,Hallbook F.The heterogenic final cell cycle of chicken retinal Lim1 horizontal cells is not regulated by the DNA damage response pathway[J].Cell Cycle,2014,13(03):408.

The value of esophageal mucosal exfoliated cells DNA times body detection joint serum marker detection using in the diagnosis of esophageal cancer

LIDe-sheng,JULAITIAiniwaer,IlyarSheyhidin,etal.

(DepartmentofThoracicSurgery,theFirstAffiliatedHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi830054,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the value of esophageal mucosal exfoliated cells DNA times body detection joint serum marker detection using in the diagnosis of esophageal cancer.MethodsSelect 128 patients with esophageal lesions who was diagnosed by gastroscope in our hospital,of which 64 were esophageal cancer patients,64 cases were esophageal benign lesions,used roche electrochemical luminescence immune system to detect the serum NSE and CEA level,used ICM to detect the level of DNA times body,analyzed its specificity and sensitivity.ResultsDNA times body of 45 patients from 64 esophageal cancer patients were positive,only 3 cases from 64 esophageal benign lesions patients' DNA times body were positive,NSE and CEA levels in patients with esophageal cancer group were significantly higher than that of benign lesion group,it had obvious difference between groups,P<0.05,CEA,NSE and DNA double body detection used in diagnosis of esophageal cancer have high specificity and low sensitivity,but three factors joint detection for the diagnosis of esophageal cancer have higher sensitivity and specificity,were 87.50 % and 84.38 % respectively.ConclusionThe NSE,CEA and DNA double body can be used as auxiliary indexes in early diagnosis of esophageal cancer is important,while the joint detection can significantly improve the diagnostic sensitivity,has a certain clinical significance.

Key words:DNA times body;NSE；CEA

(收稿日期：2015-06-19)

作者簡(jiǎn)介：李德生(1973-),男,研究方向:胸部腫瘤的診斷與外科治療。

中圖分類(lèi)號(hào)：R735.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

*通訊作者

文章編號(hào)：1007-4287(2016)04-0554-03