IgG在特發(fā)性膜性腎病中的表達(dá)研究

尹保杰+朱濤+李志民等

【摘要】 目的 分析免疫球蛋白G（IgG）在特發(fā)性膜性腎病（IMN）中的表達(dá)， 并評(píng)估IgG4與特發(fā)性膜性腎病24 h尿蛋白、血清白蛋白（ALB）等的關(guān)系。方法 97例經(jīng)腎活檢證實(shí)的IMN患者， 應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)腎組織IgG， 分析IgG表達(dá)， 并對(duì)IgG4與IMN患者血清白蛋白、 24 h尿蛋白量、血清總膽固醇等指標(biāo)的關(guān)系進(jìn)行分析。結(jié)果 97例IMN患者中IgG4表達(dá)陽性率最高為95.9%， 其后依次為IgG1、IgG2、IgG3， 陽性率分別為61.9%、24.7%、16.5%。IgG4含量（+）組、（2+）組、（3+）組24 h尿蛋白含量分別為（1.53±0.87）、（2.75±1.12）、（6.84±2.01）g/L；血清白蛋白含量分別為（28.54±1.56）、（24.13±1.20）、（20.22±0.97）g/L。IgG4 （+）組與（2+）組、（2+）與（3+）組24 h尿蛋白比較， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；血清白蛋白差異也均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 IMN患者病理組織IgG4表達(dá)陽性率最高， 其次為IgG1；IgG4表達(dá)強(qiáng)度與IMN患者24 h尿蛋白量、血清白蛋白存在一定關(guān)系， 提示IgG4可能在IMN的發(fā)病中起了重要作用， 并與IMN患者的嚴(yán)重程度相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 特發(fā)性膜性腎病；免疫球蛋白G4相關(guān)性膜性腎病；免疫球蛋白G4相關(guān)性疾病；抗磷脂酶A2抗體

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.14.028

膜性腎病（MN）屬于原發(fā)性腎小球疾病的一種， 是以腎小球基底膜上皮細(xì)胞下原位免疫復(fù)合物的沉積并伴腎小球基底膜彌漫性增厚為病理特征的一組疾病。MN分為特發(fā)性膜性腎病及繼發(fā)性膜性腎病兩大類[1]。特發(fā)性膜性腎病的發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚， 目前認(rèn)為其可能與自身免疫性反應(yīng)有關(guān)， 好發(fā)于 50～60歲中老年人， 我國IMN占原發(fā)性腎病綜合征（NS）的25%～30%[2]。盡管有1/3的IMN患者能夠自行緩解， 但仍有1/3～1/2的患者逐漸進(jìn)展為終末期腎病[2]。IgG 是血液和胞外液中的主要抗體成分， 發(fā)揮著重要免疫學(xué)效應(yīng)， 如調(diào)理抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC）及抗感染作用等， IgG 按重鏈氨基酸的不同分為 IgG1、IgG2、IgG3、IgG4 四個(gè)亞類， 以往的研究表明IgG4在炎性腸疾病、橋本甲狀腺炎等疾病中表達(dá)并參與其發(fā)病[3， 4]， 并且聯(lián)合病變組織IgG4陽性漿細(xì)胞和血清IgG4的表達(dá)可以把部分炎性腸疾病、橋本氏甲狀腺炎歸為IgG4-相關(guān)性疾病（IgG4-RD）， 成為同類疾病的一個(gè)新的亞型。關(guān)于IgG在膜性腎病中的表達(dá)情況， 以往研究[3]證實(shí)在IMN中IgG4有較高的表達(dá)率， 本文也著重分析了我國IMN患者腎組織IgG的表達(dá)， 同時(shí)也對(duì)IgG4表達(dá)強(qiáng)度與IMN患者24 h尿蛋白及 血清白蛋白等指標(biāo)關(guān)系進(jìn)行分析。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年12月～2015年5月在本院腎臟內(nèi)科經(jīng)腎臟病理證實(shí)的特發(fā)性膜性腎病患者97例， 其中男63例， 女34例， 平均年齡（48.3±16.1）歲， 所有患者均排除肝炎、腫瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等疾病， 并且所有患者均知情同意。

1. 2 方法

1. 2. 1 臨床資料 血清總蛋白、尿素、肌酐、24 h尿蛋白等。

1. 2. 2 標(biāo)本采集 所有患者于清晨空腹抽取靜脈血， 3500 r/min， 10 min 分離血清， 存放于-20℃冰箱。收集患者24 h尿液。

1. 2. 3 操作方法 所有腎穿刺病理標(biāo)本處理后分別行免疫熒光（IgG、lgA、IgM、C3）、光學(xué)顯微鏡（HE、PAS、Masson 及PASM 染色）檢查， 所有標(biāo)本直接免疫組化染色， 觀察IgG1、IgG2、IgG3、IgG4分布情況， 第一抗體分別為小鼠抗人IgG1、IgG2、IgG3、IgG4 單克隆抗體， Sigma 公司（1∶500）。用PBS 代替第一抗體進(jìn)行染色作陰性對(duì)照。

1. 2. 4 相關(guān)生化指標(biāo)的檢測(cè) 羅氏cobas-P8000全自動(dòng)生化分析儀完成肌酐（CREA）、尿素氮（BUN）、ALB、24 h尿蛋白的檢測(cè)。BUN、CREA檢測(cè)采用酶法， ALB檢測(cè)采用溴甲酚綠法， 尿蛋白檢測(cè)采用比色法。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 非正態(tài)分布以中位數(shù)表示， 三組間比較采用 Kruskal-Wallis檢驗(yàn)， 兩兩比較采用Bonferroni法。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

97例IMN患者中IgG1、IgG2、IgG3、IgG4表達(dá)陽性率分別為61.9%、24.7%、16.5%、95.9%， IgG4含量（+）組、（2+）組、（3+）組24 h尿蛋白含量分別為（1.53±0.87）、（2.75±1.12）、（6.84±2.01）g/L；血清白蛋白含量分別為（28.54±1.56）、（24.13±1.20）、（20.22±0.97）g/L。IgG4（+）組與（2+）組、（2+）與（3+）組24 h尿蛋白差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；血清白蛋白差異也均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

本研究結(jié)果同以往的研究一致， 顯示IgG4在IMN患者腎組織中高表達(dá)， 且表達(dá)強(qiáng)度與患者的病情相關(guān)， 這提示IgG4在特發(fā)性膜性腎病的發(fā)病中可能起了重要作用。而近期關(guān)于IgG4相關(guān)性疾病的研究也成為了研究的熱點(diǎn)， 它是一種新近認(rèn)識(shí)的以多器官損害為特點(diǎn)的疾病， 可累及肝臟、胰腺、腎臟等多個(gè)器官， 其中累及腎臟就稱之為IgG4-RKD， 包括IgG4相關(guān)膜性腎病、IgG4相關(guān)小管間質(zhì)性腎病等， 其診斷標(biāo)準(zhǔn)為[4]：免疫組化≥10個(gè)IgG4陽性細(xì)胞/高倍視野； 血清 IgG4≥1.35 g/L， 同時(shí)滿足兩項(xiàng)可以認(rèn)為是IgG4-RD。特發(fā)性模性腎病能否看成IgG4-MN的一種， 目前少量的研究認(rèn)為IgG4-MN傾向于繼發(fā)性膜性腎病[5]， 但I(xiàn)gG4-MN最終能否歸為繼發(fā)性膜性腎病的一種， 仍需大量的研究來證實(shí)， 因?yàn)镮gG4-MN也有可能成為特發(fā)性膜性腎病一種特殊的亞型， 這對(duì)膜性腎病的分類及治療可能有新的指導(dǎo)意義。由于本研究未對(duì)特發(fā)性膜性腎病進(jìn)行血清學(xué)IgG4的檢測(cè)， 因此也無法用上述診斷標(biāo)準(zhǔn)對(duì)97例IMN患者進(jìn)行評(píng)估并判斷有多少例IMN可以判定為IgG4-RD， 如果有IMN患者符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)， 可以對(duì)其臨床資料、病情、預(yù)后等情況與正常特發(fā)性膜性腎病進(jìn)行分析， 并觀察他們?cè)谥委煛㈩A(yù)后等方面的情況， 這將成為以后工作的重點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)

[1]王擁濤， 許清玉， 郭明好， 等. 919例腎活檢資料流行病學(xué)分析. 中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志， 2010， 11（3）：232-234.

[2]劉志紅. 膜性腎病的治療.腎臟病與透析腎移植雜志， 2009， 18（4）：353-355.

[3]黃勤， 鄒曉平. IgG4相關(guān)的自身免疫性胰腺炎的診斷. 中華消化內(nèi)鏡雜志， 2013， 30（6）：301-303.

[4]李亞瓊.橋本氏甲狀腺炎與IgG4相關(guān)性疾病有關(guān)的臨床病理學(xué)特征的相關(guān)研究 .山東大學(xué)， 2012.

[5]管音， 李航. 自身抗原、抗體與IgG亞型在膜性腎病中的意義. 中華腎臟病雜志， 2014， 30（8）：634-638.

[收稿日期：2015-11-18]