半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)在微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用

楊小珍 楊應(yīng)合

【摘要】根據(jù)微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的應(yīng)用情況來看，其要求的實(shí)驗(yàn)設(shè)備需要較高的成本，并需要教師具備較高的教學(xué)水平、教學(xué)能力，才能真正促進(jìn)微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果進(jìn)一步提高。本文就半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)在微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用過程進(jìn)行分析，并對(duì)其實(shí)驗(yàn)流程進(jìn)行探討，以推動(dòng)微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)不斷創(chuàng)新。

【關(guān)鍵詞】半自動(dòng)細(xì)菌鑒定；藥敏分析；微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)；應(yīng)用

在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)屬于比較先進(jìn)的醫(yī)療設(shè)備，在與計(jì)算機(jī)有機(jī)結(jié)合的情況下，可以準(zhǔn)確進(jìn)行細(xì)菌鑒定、藥敏檢測(cè)等。因此，將其合理應(yīng)用到微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，對(duì)于提高學(xué)生的實(shí)踐能力、應(yīng)用能力和操作能力有著極大作用。

一、前期準(zhǔn)備

在還沒正式半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析的時(shí)候，學(xué)生學(xué)習(xí)重視前期準(zhǔn)備工作，熟悉各種與醫(yī)學(xué)微生物學(xué)相關(guān)的操作方法、操作技術(shù)等，如細(xì)菌形態(tài)檢查，需要通過取材、圖片和鏡檢等多個(gè)步驟來完；藥物敏感試驗(yàn)、細(xì)菌分離培養(yǎng)，等等。同時(shí)，對(duì)半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析的相關(guān)原理、配套試劑盒說明等資料有比較全面的了解，才能在自學(xué)、查詢其它資料等的過程中掌握更多實(shí)驗(yàn)方面的知識(shí)，從而為半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析實(shí)驗(yàn)順利、安全實(shí)施奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

一般情況下，細(xì)菌鑒定是從粗向著細(xì)方向發(fā)展的，其整個(gè)過程有著較強(qiáng)復(fù)雜性。因此，需要將待檢標(biāo)本的各種細(xì)菌分離培養(yǎng)、純化，才能對(duì)純化后的細(xì)菌進(jìn)行進(jìn)一步鑒定，以便確定這些細(xì)菌屬于哪個(gè)課、哪一種等。通常情況下，細(xì)菌的初步鑒定是通過手工操作方式，從細(xì)菌的培養(yǎng)特點(diǎn)、形態(tài)染色性、部分生化試驗(yàn)上來判定的。所以，操作過程比較麻煩，但在合理應(yīng)用半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的情況下，整個(gè)操作過程則變得非常便捷、簡(jiǎn)單。在初步鑒定每個(gè)待檢標(biāo)本時(shí)，需要使用合適的試劑盒，并把學(xué)生合理分為四個(gè)實(shí)驗(yàn)小組，以在教師提供兩組待檢標(biāo)本的情況下，確保兩組實(shí)驗(yàn)可以有效對(duì)比。與此同時(shí)，具體的實(shí)驗(yàn)方案需要每個(gè)小組自己設(shè)計(jì)，以在教師的指導(dǎo)、審核下進(jìn)行完善，以便更好的解決實(shí)驗(yàn)過程中學(xué)生遇到的相關(guān)問題，從而確定最終的實(shí)驗(yàn)流程。

三、實(shí)施流程

第一次：在待檢標(biāo)本被分類培養(yǎng)后，根據(jù)他們的種類選擇最合適的培養(yǎng)基，并將其制作出來。一般各小組的分工由組長(zhǎng)來安排，以及時(shí)完成培養(yǎng)基的如下幾個(gè)操作：一是，稱量；二是，將培養(yǎng)基加熱，使其融化；三是，用高壓對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行殺菌；四是，將培養(yǎng)基傾注到平的器皿中，等等。在完成上述操作后，需要在已經(jīng)準(zhǔn)備好的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行待檢標(biāo)本的劃線接種。在整個(gè)操作過程中，學(xué)生是主要操作人員，教師只是負(fù)責(zé)指導(dǎo)、改正、解答等，如果有空閑的時(shí)間，還可以讓學(xué)生借助計(jì)算機(jī)進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)的模擬訓(xùn)練，以便學(xué)生更加熟悉整個(gè)實(shí)施過程。

第二次：細(xì)菌形態(tài)染色、初步生化實(shí)驗(yàn)。將已經(jīng)分離培養(yǎng)和純化的細(xì)菌菌落取出一定量，對(duì)其進(jìn)行革蘭染色和鏡檢，并進(jìn)行一些定科生化試驗(yàn)，如糞便標(biāo)本中有腸桿菌科細(xì)菌，需要進(jìn)行觸酶試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)等。在實(shí)際操作學(xué)生與教師的操作流程與第一次是一樣的。

第三次：進(jìn)行初步鑒定、選擇合適的試劑盒加樣。在分析第二次試驗(yàn)的結(jié)果后，選擇出合適的試劑盒，并根據(jù)試劑盒的情況將分離的菌株配置成濃度為0.5麥?zhǔn)媳鹊木海栽谠噭┖械乃幟粼囼?yàn)孔、生化反應(yīng)孔加入菌液后，進(jìn)行試劑盒的加樣培養(yǎng)。一般情況下，加樣試劑盒要放在溫度為35攝氏度的溫箱中，并保持16到18小時(shí)的時(shí)間。其中，教師與學(xué)生需要完成的操作與上述兩個(gè)步驟是一樣的。

第四次：在觀察試劑盒后，將其結(jié)果輸入到計(jì)算機(jī)中，以便根據(jù)自動(dòng)分析結(jié)果進(jìn)行最后的鑒定。在完成所有操作后，每個(gè)小組的學(xué)生需要對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行一定討論，以便與預(yù)期結(jié)果進(jìn)行可靠性對(duì)比，最終將實(shí)驗(yàn)結(jié)果、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)等呈現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)報(bào)告上。通常教師對(duì)學(xué)生進(jìn)行評(píng)價(jià)都是將實(shí)驗(yàn)報(bào)告作為參考依據(jù)的，對(duì)于提升學(xué)生的專業(yè)技能有著極大影響。所以，對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行比較完整的總結(jié)，并詳細(xì)的敘述實(shí)驗(yàn)過程的注意事項(xiàng)，以及學(xué)生遇到的相關(guān)問題，對(duì)于促進(jìn)微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果進(jìn)一步提高有著極大影響。

結(jié)束語(yǔ)：

綜上所述，在微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中合理應(yīng)用和推廣半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)，是社會(huì)、經(jīng)濟(jì)等不斷發(fā)展的必然趨勢(shì)，是理論知識(shí)應(yīng)用到實(shí)踐操作的重要體現(xiàn)。因此，根據(jù)微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)的實(shí)際情況，注重半自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的充分運(yùn)用，有利于大大提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣、操作技能、綜合素質(zhì)等。

【參考文獻(xiàn)】

[1]張俊琪，謝幼華，王葳，劉晶，袁正宏，瞿滌.細(xì)菌學(xué)綜合性實(shí)驗(yàn)在《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》教學(xué)中的應(yīng)用效果分析[J].微生物與感染，2015，06：365-370.

[2]沈喜，胡建成，張巧穎，陳強(qiáng).基因芯片鑒定細(xì)菌技術(shù)在本科實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用[J].中國(guó)科教創(chuàng)新導(dǎo)刊，2013，20：27-28.

[3]楊致邦，徐晨，王毅，鄧西川，劉佳.醫(yī)學(xué)微生物學(xué)虛擬試驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索，2014，10：46-49.