化學發光法定量檢測乙型病毒性肝炎患者血清HBsAg的水平與Pre—S1的相關性研究

金娟 陳正徐

【摘要】 目的 探討化學發光法檢測的乙型病毒肝炎患者血清HBsAg的水平與乙型肝炎病毒前s1蛋白（Pre-S1）的相關性。方法 分別用化學發光法檢測2015年1月-12月本院乙型病毒性肝炎患者血清中HBsAg水平，酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測這些患者血清中的Pre-S1，探討血清HBsAg值高低與Pre-S1陽性率的關系。結果 共收集HBsAg≥0.5ng/ml標本824例，血清HBsAg≥165ng/ml患者387例，其中Pre-S1陽性252例；血清100ng/ml≤HBsAg<165ng/ml患者120例，其中Pre-S1陽性45例；血清50ng/ml≤HBsAg<100ng/ml患者112例，其中Pre-S1陽性21例；血清0.5ng/ml≤HBsAg<50ng/ml患者205例，其中Pre-S1陽性23例。結論 血清中HBsAg值與Pre-S1陽性率呈正相關，p<0.05有統計學意義?；瘜W發光定量檢測血清中HBsAg值對于臨床判斷乙型病毒肝炎患者病毒水平及復制情況有一定的意義。

【關鍵詞】 化學發光法 乙型病毒肝炎 HBsAg Pre-S1

乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus，HBV）感染在許多國家是一個重大的公共衛生問題，全世界有近3億人攜帶乙肝病毒，每年約有100萬人死于肝硬化和肝癌[1]。我國是乙型肝炎病毒的高發流行區域，衛生部在2006 年開展了全國人群乙型肝炎等有關疾病血清流行病學調查，成人HBV感染率高達42.40% ～80.77%，人群HBsAg 攜帶率為7.18%[2]。

實驗室通常采用ELISA技術檢測乙型肝炎病毒血清免疫學標志物（HBV-M），隨著科學技術的發展，越來越多的實驗室使用化學發光技術來定量檢測HBV-M，該技術具有靈敏度高、特異性強、方法穩定快速、自動化程度高等優點。pre-S1為乙型肝炎病毒外膜蛋白的重要組成部分，它含有肝細胞膜受體，在乙肝病毒感染肝細胞和機體免疫應答方面起重要作用。目前有研究認為pre-S1測定可作為反映HBV 復制和傳染性的指標，其持續存在提示了體內有處于復制狀態的 HBV 顆粒 [3]。本文通過化學發光法檢測乙型病毒性肝炎患者血清中HBsAg水平，ELISA法檢測血清中pre-S1，兩者進行比對分析，探討乙肝HBsAg定量檢測的臨床意義。

1 材料與方法

標本來源 收集我院2015年1月-12月住院患者HBsAg≥0.5ng/ml血清標本824例，其中男性438例，女性386例。

儀器與試劑 化學發光免疫分析法采用北京科美生物技術有限公司化學發光免疫分析儀，乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）測定試劑盒由北京科美提供，標本檢測結果≥0.5 ng/ml時判斷為陽性。Pre-S1檢測試劑盒由英科新創（廈門）科技有限公司提供。血清標本嚴格按說明書操作檢測。

統計學方法 應用SPSS17.0統計軟件，采用趨勢卡方檢驗對數據進行統計分析，P<0.05有統計學意義。

2 結果

2.1 HBsAg的含量及Pre-S1的檢測結果如下（表1）

2.2 BsAg的含量與Pre-S1陽性率相關性分析

使用SPSS17.0軟件對數據進行分析，Gamma=0.713，p<0.05為差異有統計學意義，血清中HBsAg的含量與Pre-S1陽性率二者成正相關。

3 討論

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一種嚴重危害人群健的傳染性疾病，HBV 可以通過母嬰、性傳播、血液等方式傳播。臨床上主要通過檢測HBV-M和 HBV-DNA 作為 HBV 的檢測項目， HBV-DNA 檢測被認為HBV 感染和復制的金標準，但由于 HBV DNA 檢測對實驗場所以及試驗設備有較高的要求，因此無法在基層醫院開展。

ELISA 法檢測乙肝病毒的血清標志物HBV-M是目前臨床最為常用的檢測項目，主要應用于確定受檢者是否感染了HBV，但因其是一種定性檢測，不能確切地反映乙肝患者血清 HBV 含量和 HBV 在體內的復制狀況?；瘜W發光技術檢測法是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的一類免疫測定方法，能對血清中HBV-M進行定量檢測。HBsAg作為一個最早的乙型肝炎診斷指標，其定量檢測使臨床應用價值得到極大拓展。

Pre-S1主要存在于Dane顆粒表面，是肝細胞特異的無涎糖蛋白受體，有高度活躍的細胞內吞飲功能。其氨基酸的21-47 肽段可以與宿主肝細胞膜上的相應受體結合，介導 HBV 侵入肝細胞。近年來 ，Pre-S1作為乙肝患者血清學新標志物，逐漸顯示出較高的臨床應用價值。有學者認為ELISA試劑檢測Pre-S1診斷HBV復制特異度高，誤診率低，與HBV-DNA有高度一致性[4]。普遍研究認為，Pre-S1與HBV-DNA高度相關，可作為反映HBV復制和感染的指標，能更完善傳統的乙肝病毒血清標志物體系，在 HBeAg檢測陰性時可作為很好的補充項目[5-7]。

本研究結果顯示乙肝患者血清中HBsAg水平與Pre-S1陽性率正相關：血清HBsAg≥165ng/ml時，Pre-S1陽性率高達65.1%；隨著HBsAg水平的下降，Pre-S1陽性率明顯降低，血清0.5ng/ml≤HBsAg<50ng/ml，Pre-S1陽性率為11.2%。而在血清0.5ng/ml≤HBsAg<50ng/ml，Pre-S1陽性的23例標本中，有19例標本為HBeAg≥0.4NCU/ml，說明血清中HBsAg濃度雖然比較低，但是當HBeAg為陽性時血液中的HBV病毒仍然可能處于活躍的復制狀態。

綜上所述，相對于傳統的ELISA檢測方法，化學發光定量檢測法具有快速、準確、自動化程度高等優點。對于條件有限不能開展HBV DNA檢測的基層醫院，定量檢測患者血清HBsAg水平，結合其他HBV-M指標、Pre-S1檢測，在乙肝患者的臨床病情診斷和療效觀察中有良好的應用價值。

參考文獻

[1] Nicola Coppola， Lorenzo Onorato， Carmine Minichini， Giovanni Di Caprio，Mario Starace， Caterina Sagnelli， Evangelista Sagnelli.Clinical significance of hepatitis B surface antigen mutants. World J Hepatol 2015，7（27）： 2729-2739

[2] 胡曉麗，趙宏偉，吳曉巖，?？∑?乙型肝炎病毒感染的流行現狀. 臨床肝膽病雜志，2012 ，28（6）：413-416

[3] 閔福援，孫桂珍，王健，辛永梅.前Sl杭原在乙型肝炎診斷及判斷預后中的作用.中華檢驗醫學雜志， 2004， 27（4）： 224-226

[4] 王曉存，唐婧，吳軍. ELISA試劑檢測前S1抗原診斷乙型肝炎病毒復制價值的Meta分析. 中國循證醫學雜志，2014，14（11）：1318-1325

[5] 陳永剛，肇玉博，楊文濤. HBV血清標志物聯合 Pre-S1 抗原或 HBV DNA檢測的臨床價值. 現代中西醫結合雜志，2014，23（10）：1116-1117

[6] 曾繁鈺，蔣冰，譚璐. Pre-S1抗原與HBV血清學標志物和HBV DNA的相關性及臨床意義. 武漢大學學報，2014，35（1）：85-88

[7] 張菊英，張亞衡. 920例乙型肝炎患者病毒前s1抗原檢測的臨床價值探討. 檢驗醫學與臨床，2014，11（2）：246-248