2 007例乙肝標志物、HBV-DNA及ALT檢測結果分析及臨床價值

成克銘,閔 瑤

(1.四川省瀘州市人民醫院檢驗科，四川瀘州 646000；2.重慶市東華醫院檢驗科，重慶 400032)

·臨床研究·

2 007例乙肝標志物、HBV-DNA及ALT檢測結果分析及臨床價值

成克銘1,閔 瑤2△

(1.四川省瀘州市人民醫院檢驗科，四川瀘州 646000；2.重慶市東華醫院檢驗科，重慶 400032)

目的 通過聯合檢測乙肝患者血清學標志物(HBV-M)、乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)和丙氨酸氨基轉移酶(ALT)，探討3項檢測指標在乙肝診治中的臨床意義。方法 對2 007例標本采用連續監測速率法檢測血清中的ALT；實時熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)檢測HBV-DNA；時間分辨免疫熒光分析法(IFMA)檢測HBV-M。結果 HBV-DNA>100 IU/mL的患者為1 098例(54.71%)，其中，HBV-M檢測Ⅰ組[HBsAg 陽性(+)，HBeAg陽性(+)，HBcAb陽性(+)]和Ⅱ組[HBsAg陽性(+)，HBeAg陽性(+)]的HBV-DNA 陽性率、ALT陽性率明顯高于Ⅲ組[HBsAg陽性(+)，HBeAb陽性(+)，HBcAb陽性(+)]、Ⅳ組[HBsAg陽性(+)，HBcAb陽性(+)]和Ⅴ組[HBsAg陽性(+)，HBeAb陽性(+)]，差異有統計學意義(P<0.05)；HBV-DNA為陽性的患者中，HBV-DNA含量與ALT水平成正相關，差異有統計學意義(P<0.01)。結論 聯合檢測HBV-M、HBV-DNA載量和ALT水平，能全面了解HBV感染、復制以及傳染性狀態。在判斷病情轉歸、肝功能損害情況和療效觀察方面具有重要意義。

HBV； ALT； HBV-DNA； HBV-M

乙型肝炎(下稱乙肝)病毒(HBV)是引起病毒性肝炎的最常見病原體，可通過血液、性接觸、母嬰垂直傳播感染他人。雖然乙肝疫苗的應用有效地減少了HBV的傳播，但它仍是一種嚴重危害人類健康的世界性傳染病，感染呈全世界流行，全球大約20億人已經感染HBV，其中的3.5億轉變成慢性感染，慢性乙肝患者有發展成為肝硬化、肝功能失代償和肝細胞癌的風險。我國是高流行區，一般人群乙型肝炎表面抗原(HBsAg)陽性率為9.09%[1],成為嚴重影響整個民族的健康素質的傳染性疾病，也給社會帶來沉重的經濟負擔，是我國目前最突出的公共衛生問題之一。因此，乙型肝炎的診斷、治療和預后判斷是廣大醫務人員和患者普遍關注的問題。目前臨床上主要通過血清學標志物(HBV-M)、肝功能指標以及近年興起的實時熒光定量PCR技術等方法進行檢查，采取上述3種方法對乙肝感染患者進行監測以及評定其病情、療效均具有重要臨床價值。尤其是實時熒光定量PCR技術的發展和應用，對患者進行HBV-DNA定量測定更能準確反映其體內病毒復制以及活躍狀態。本文通過3種方法檢測2 007例乙肝樣本，以探討不同檢驗指標在乙肝患者診斷和治療中的臨床意義，現將檢測結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年1月至2014年12月在本院門診或住院的乙肝患者2 007例，其中男936例，女1 071例，年齡14～65歲，平均36.6歲。排除合并肝癌、HIV、HAV、HCV、HEV感染及伴有其他嚴重肝臟疾病，所有樣本均于空腹靜脈采血分離血清進行檢測。其中Ⅰ組[HBsAg 陽性(+)，HBeAg陽性(+)，HBcAb陽性(+)]636例(31.69%)；Ⅱ組[HBsAg陽性(+)，HBeAg陽性(+)]279例(13.90%)；Ⅲ組[HBsAg陽性(+)，HBeAb陽性(+)，HBcAb陽性(+)]858例(42.75%)；Ⅳ組[HBsAg陽性(+)，HBcAb陽性(+)]174例(8.67%)；Ⅴ組[HBsAg陽性(+)，HBeAb陽性(+)]60例(2.99%)。

1.2 主要儀器 新波 SYM-BIO時間分辨免疫熒光分析儀(蘇州新波生物技術有限公司)、DA7600熒光定量PCR分析儀(廣州達安公司)、日立7180全自動生化分析儀(日本日立公司)。

1.3 檢測指標及方法 (1)乙肝血清標志物定量檢測：采用時間分辨免疫熒光分析法(IFMA)，陽性標準：HBsAg>0.2 ng/mL；HBsAb>10 mIU/mL；HBeAg>0.5 PEIU/mL；HBeAb>0.2 PEIU/mL；HBcAb>0.9 PEIU/mL。(2)HBV-DNA 含量：采用實時熒光定量分析法(FQ-PCR)，嚴格按試劑說明書操作。HBV-DNA<1.0×102IU/mL者為陰性，HBV-DNA>1.0×102IU/mL者為陽性。(3)ALT采用全自動生化分析儀測定，ALT>40 U/L為陽性。

1.4 統計學處理 數據采用SPSS 17.0軟件進行統計分析，將HBV-DNA(copy/mL)轉化為對數，計數資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗；當P<0.05時，表示差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 不同HBV-DNA載量乙型肝炎患者ALT測定結果，見表1。患者ALT在HBV-DNA陰性組與陽性各組間比較,差異均有統計學意義(P<0.05)；而在HBV-DNA表達陽性的各組中，乙肝患者ALT之間差異無統計學意義(P>0.05)。

2.2 2 007例乙型肝炎患者不同血清模式HBV-DNA與ALT含量比較見表2。其中HBV-DNA陽性1 098例，總陽性率為54.71%。模式Ⅰ、Ⅱ組與其他各組相比，HBV-DNA陽性率差異有統計學意義(P<0.05)。模式Ⅰ組ALT陽性率明顯高于其他各模式組(P<0.05)。

表1 不同HBV-DNA載量乙型肝炎患者ALT

HBV-DNA含量以對數值表示。△:P<0.05,與HBV-DNA陰性組比較。

表2 不同血清模式HBV-DNA與ALT結果比較[n(%)]

△:P<0.05,與Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組比較；*:P<0.05,與Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組比較。

3 討 論

乙型肝炎是目前危害人類健康最嚴重的傳染病之一，可引起多種急、慢性肝臟疾病，部分患者發展為肝硬化，甚至肝癌。隨著檢驗醫學的快速發展，實驗室對HBV感染診斷的技術越來越多，目前，主要的檢測技術有血清標志物檢測、核酸檢測、HBV基因型和變異檢測等[2]。乙肝標志物檢測是臨床診斷HBV感染的傳統手段，它檢測的是人體對HBV的免疫反應狀態。既往HBeAg被認為是乙型肝炎患者具有傳染性的標志物，是評價慢性乙型肝炎重要的免疫耐受因子及病毒復制的主要指標。但在臨床中，隱匿性HBV感染在不明原因的慢性肝臟疾病或肝癌患者中也較常見，其特點是在患者血清中檢測不到HBsAg,究其原因可能為HBV病毒復制和基因表達的強烈抑制或HBV基因組調控序列的突變等。在這種情況下，檢測HBV-DNA就顯得十分必要，因為HBV-DNA載量可真實反映乙肝病毒感染、復制及病程變化，病毒在復制過程中會激發機體免疫系統對病毒的清除，同時也會引發機體的免疫病理反應，導致肝細胞損傷、破壞，隨之會引起肝臟組織的修復及纖維化[3，同時，臨床醫師在治療過程中，可以通過動態觀察乙型肝炎患者的HBV-DNA水平來掌握抗病毒藥物的療效，為臨床醫師及時調整治療方案起到參考依據。ALT主要存在于肝、腎、心臟、骨骼肌、十二指腸、脾臟及肺等器官的組織細胞中，其中尤以肝組織細胞中含量最多，正常情況下，僅有極少量的ALT釋放入血液中，當人體感染乙型肝炎病毒后，會刺激機體免疫系統產生特異性抗體和致敏淋巴細胞，致敏淋巴細胞與肝細胞膜表面上的病毒抗原相結合，使致敏淋巴細胞釋放出各種體液因子，這些體液因子對病毒清除的同時，也會導致肝細胞的破壞，從而導致大量的ALT從受損的肝細胞中釋放入血液，從而引起ALT水平升高。因此，在排除肝外臟器病變的情況下，ALT升高可直接反映肝細胞的損傷情況[4]，是現階段臨床應用最廣的肝功能檢測指標。同時，引起乙肝患者肝功能損害、肝炎、肝硬化的原因主要是由于HBV的持續感染[5]。因此，多指標的聯合運用，有助于乙型肝炎患者的診斷、治療和病情評估，對臨床治療及療效觀察有著及其重要的意義[6]。

本文結果顯示，患者ALT在HBV-DNA陰性組與陽性組之間存在差異具有統計學意義(P<0.05)；而在HBV-DNA表達陽性的乙肝患者中，血清HBV-DNA水平的遞增并無引起ALT的明顯變化，表明肝功能的損害程度與HBV在宿主體內復制水平無直接正相關關系[7]。對乙肝患者不同血清標志物模式檢測的HBV-DNA和ALT含量上可以看出，Ⅰ、Ⅱ組HBV-DNA陽性率較其他三組高，ALT水平只有Ⅰ組明顯高于其他各組，說明在乙肝病毒處于強復制和強傳染性階段，對肝細胞的損害也相應較重[8]。在Ⅰ組中HBV-DNA陽性占HBeAg陽性的73.58%，說明HBeAg和HBV-DNA兩者之間有著很好的相關性，表明HBeAg陽性的乙型肝炎患者HBV-DNA處于高水平復制。但在模式Ⅰ組(“大三陽”)中仍有26.42%的HBV- DNA檢測結果小于1.0×102IU/mL，在理論上HBeAg陽性應與血清HBV-DNA陽性一致，分析出現HBV-DNA陰性的原因可能是:(1) 檢測標本內含有 TaqDNA聚合酶抑制物；(2)HBV-DNA已經極低，而之前表達的HBeAg尚未被完全降解，導致 HBV-DNA的消失早于HBeAg；(3)存在病毒基因的變異造成HBV-DNA檢測陽性率偏低。因此，臨床上運用HBV-DNA和乙肝標志物及ALT 3項指標檢測，對HBV感染的臨床診斷會更明確，對設計治療方案、觀察療效及預后判斷可提供更有效的參考依據[9]。

綜上所述，乙型肝炎患者的血清標志物、HBV-DNA與ALT水平之間存在著一定的關系，但三者反映的是疾病的不同方面。因此，臨床醫師在HBV感染的診療過程中應聯合檢測相關指標，根據檢測結果進行補充和應證，綜合考慮患者病程，采用有針對性的治療方案，以提高治療質量和減輕患者經濟負擔[10]。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.07.052

A 文章編號：1673-4130(2016)07-0987-03

2015-10-18)