白血病/淋巴瘤免疫分型檢驗技術研究

江竹 李川

【摘要】目的：對白血病/淋巴瘤免疫分型檢驗技術進行研究。方法：選擇2015年1月至2015年11月間收治的白血病/淋巴瘤患者20例，采用流式細胞術對患者的免疫分型進行檢驗，討論流式細胞術在白血病/淋巴瘤免疫分型檢驗中的應用價值。結果：入選的20例患者中ALL11例，其中B-ALL6例、T-ALL5例，AML9例；B-ALL患者HLA-DR陽性表達率最高，為100%，CD21、CD38、CD22依次為94.2%、91.3%、59.8%；T-ALL患者CD25陽性表達率最高，為100.0%，CD1、CD71、CD38依次為76.2%、65.3%、52.9%；AML患者MPO陽性表達率最高，為91.2%，CD15、CD68、HLA-DR、CD64依次為86.6%、81.2%、83.2%、65.7%；AML合并淋系抗原2例，CD25、CD24陽性率為7.6%、1.6%。結論：白血病/淋巴瘤患者應用流式細胞術進行免疫分析，對疾病的診斷及治療具有重要意義。

【關鍵詞】白血病；淋巴瘤；免疫分型；流式細胞術

【中圖分類號】R-0 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801（2016）02-0205-01

白血病/淋巴瘤現已成為臨床治療中的多發疾病，隨著生活環境的污染、飲食結構及生活習慣的改變，白血病/淋巴瘤的發生不但在逐年升高，且發病人群也逐漸趨于年輕化。白血病/淋巴瘤的免疫分型檢驗可為疾病的診斷及治療提供更加完善的臨床依據，并對治療效果進行有效評價，流式細胞術在白血病/淋巴瘤免疫分型檢驗中具有較高的利用率。現以40例白血病/淋巴瘤患者為對象，對流式細胞術的應用價值進行研究。

1 資料與方法

1.1一般資料

選擇2015年1月至2015年11月間收治的白血病/淋巴瘤患者20例。患者年齡在16-74歲之間，平均年齡為（42.7±24.6）歲；其中男性患者12例，女性患者8例。

1.2檢驗方法

1.2.1樣本采集

抽取患者靜脈血5ml，真空肝素抗凝采血管盛裝；淋巴瘤患者可做穿刺活檢，應用EDTA三或二鉀進行抗凝處理；樣本對號標記、合理儲存；檢驗時如血液標本出現溶血、凝固現象則棄用，重新進行樣本采集，樣本采集完成至檢驗不可超過1d。

1.2.2免疫分型

采用四色免疫分型法進行檢測：100ul樣本內混入20ul常用免疫分型單克隆抗體，在20攝氏度的環境下避光孵育15分鐘；續加溶血劑，完全融合后繼續避光孵育10分鐘；以濃度為10mmol/L的弱堿性磷酸鹽溶液為緩沖液，樣本2000r/min條件下離心5min，去除上層血清，分離單核細胞；將分離后的單核細胞制成濃度為107/L的細胞懸濁液，完成檢驗樣本配置，放置流式細胞儀中等待檢測；NK淋系白血病單抗為CD16、CD57，B淋系白血病單抗為CD21、CD22、CD24，T淋系白血病單抗為CD71、CD1、CD25，髓系白血病單抗為CD15、CD64、CD68、MPO（髓過氧化物酶），非系列特異性白血病單抗為CD9、CD38、CD45、HLA-DR；儀器檢驗前調試，使變異系數小于2%，以CD45/SSC為設門，淋巴、髓系抗原超過20%、高度特異性抗原超過10%作為判斷標準。

1.3數據處理

文中數據采用spss17.0軟件進行處理，計數資料采用%表示，資料采用卡方檢驗，計量資料采用 ±S表示，資料采用t值檢驗，P<0.05，數據差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 入選的20例患者流式細胞術免疫分型結果為ALL11例，所占比例為60.0%，AML9例，所占比例為40.0%。

2.2 11例ALL患者中，6例B-ALL，所占比例為54.55%；5例T-ALL，所占比例為45.45%；B-ALL患者的HLA-DR的陽性表達率為100.0%，CD21的陽性表達率為94.2%，CD38的陽性表達率為91.3%，CD22的陽性表達率為59.8%；T-ALL患者CD25的陽性表達率為100.0%，CD1、CD71的陽性表達率分別為76.2%、65.3%，CD38的陽性表達率為52.9%。

2.3 9例AML患者中，髓系白血病特異性抗原MPO的陽性表達率最高，為91.2%，其次為CD15，其陽性表達率為86.6%，CD68的陽性表達率為81.2%，HLA-DR的陽性表達率為83.2%，CD64的陽性表達率最低，為65.7%；AML患者中有2例患者伴隨T淋系及B淋系抗原表達，CD25的陽性表達率為7.6%，CD24的陽性表達率為1.6%。

3 討論

白血病/淋巴瘤是一種致死率極高的全身性癌癥，疾病的早期診斷及有效治療方案的實施，對維持患者機體功能，延長患者生存時間具有重要意義[1]。現今臨床上所采用的診斷方法多缺乏特異性，無法為臨床診斷、治療提供更多的臨床依據。

免疫分型在白血病/淋巴瘤中具有較高的臨床應用價值，可利用單抗對白細胞細胞漿中或表面的抗原進行分析[2]，尋找細胞來源，明確細胞分化階段，進而為臨床治療、診斷提供確切的依據，甚至可對治療后的臨床效果進行有效評估[3]。流式細胞術是一種快捷、精確、準確性高的免疫分型方式。流式細胞術是以標記后的單抗作為分子探針，根據細胞克隆過程中抗原的表達方式，對細胞克隆的特點及所處階段進行分析，進而對白細胞的分化程度、所屬類別進行劃分[4]。

采用流式細胞術對白血病/淋巴瘤患者進行免疫分析，可為患者制定具有針對性的治療方案，對提高患者生存率、延長患者生存時間具有重要意義[5]。

參考文獻：

[1]李娜.淋巴系統白血病細胞免疫分型的臨床研究[D].吉林大學，2012.

[2]周麗蘭.流式細胞術免疫分型在非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的研究[D].昆明醫學院，2011.

[3]朱明清.白血病和淋巴瘤免疫分型的標準化方案[A].中華醫學會、中華醫學會檢驗分會.中華醫學會第七次全國中青年檢驗醫學學術會議論文匯編[C].中華醫學會、中華醫學會檢驗分會：，2012：2.

[4]孫曉非，何麗容，馮海林，嚴蘇麗，夏忠軍，陳曉勤.多參數流式細胞術在淋巴細胞白血病和非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯診斷的應用[J].癌癥，2003，11：1232-1236.

[5]劉鑫，龐鐵光.流式細胞術在白血病和淋巴瘤診斷中的應用[J].內蒙古民族大學學報（自然科學版），2010，03：347-350.