顯微鏡操作技能及相關知識

一、顯微鏡操作技能

（1）操作口訣：一取二放，三安裝；四轉低倍，五對光；六上玻片，七下降；八升鏡筒細觀察；看完低倍轉高倍；九退整理，后歸箱。

（2）高倍顯微鏡的操作流程：找——移——轉——調。在低倍鏡下觀察清楚，找到物像——將物像移至視野中央——轉動轉換器換用高倍鏡觀察——調節光圈或反光鏡及細準焦螺旋，直到看清楚物像為止。

（3）注意事項：①調節粗準焦螺旋使鏡筒下降時，兩眼要注視物鏡與玻片之間的距離，到接近但未接觸時（一般距離約為0.5cm）停止下降。②首先用低倍鏡觀察，后用高倍鏡觀察。③換上高倍鏡后，不能再轉動粗準焦螺旋，而只能用細準焦螺旋來調節。④觀察顏色深的材料，視野應適當調亮，反之則適當調暗；若視野中出現一半亮一半暗，則可能是反光鏡的調節角度不對；若觀察花生切片標本材料，視野中一半清楚一半模糊不清，則可能是花生切片薄厚不均造成的。

二、顯微鏡的相關知識

（1）放大倍數的含義。放大倍數也稱放大率，物像大小對物體大小的比例叫顯微鏡的放大倍數。放大倍數=目鏡放大倍數×物鏡放大倍數。放大倍數指的是物像長度和寬度的放大倍數，而不是面積或體積的放大倍數。

（2）鏡頭結構及放大倍數的關系。目鏡和物鏡結構如下圖所示：①物鏡長度與放大倍數成正比；物鏡越長，放大倍數越大，距裝片距離越近，如H1。②目鏡長度與放大倍數成反比；目鏡越長，放大倍數越小，距裝片距離越遠 ，如H2。

（3）放大倍數與視野范圍的關系。視野是指一次所能觀察到的被檢標本的范圍。視野的大小與放大倍數成反比，即放大倍數越大視野越小，看到的標本范圍越小（細胞數目越小），反之看到的標本范圍越大（細胞數目越多）。

三、放大倍數與視野亮度的關系

在光源一定的情況下，視野的亮度與放大倍數成反比，即放大倍數越大視野亮度越暗。視野亮度的調整：欲使顯微鏡的視野亮度變亮或變暗，需要調節光圈或反光鏡。欲使視野變亮，用大光圈和凹面鏡，欲使視野變暗，用小光圈和平面鏡。

四、視野中污點位置的判斷

五、顯微鏡成像特點

顯微鏡成放大倒立的虛像，例如實物為字母“b”，則視野中觀察到的為“q”。若物像在偏左上方，則裝片應向左上方移動。移動規律：向偏向相同的方向移動（或：同向移動）。

六、放大倍數與視野中細胞數目變化的相關計算

若視野中細胞成單行，則計算時只考慮長度或寬度，可根據放大倍數與實物范圍成反比的規律計算。若視野中充滿細胞，計算時應考慮面積的變化，可根據看到的實物范圍與放大倍數的平方成反比的規律計算。

七、例題解析

例1、如圖所示：甲圖中①②表示目鏡，③④表示物鏡，⑤⑥表示物鏡與載玻片之間的距離，乙和丙分別表示不同物鏡下觀察到的圖像。下面描述正確的是（ ）。

A.①比②的放大倍數大，③比④的放大倍數小

B.把視野里的標本從圖中的乙轉為丙時，應選用③，同時提升鏡筒

C.從圖中的乙轉為丙，正確調節順序：轉動轉換器―→調節光圈―→移動標本―→轉動細準焦螺旋

D.若使物像放大倍數最大，甲圖中的組合一般是②③⑤

例2、下圖是光學顯微鏡的一組鏡頭，目鏡標有5×字樣和15×字樣，物鏡標有10×和40×字樣。請根據圖回答下面的問題。

（1）仔細觀察葉綠體的形態時，顯微鏡的目鏡、物鏡及其與蓋玻片間距離的組合為____________（用標號作答）。此時放大的倍數為___________。

（2）在觀察時，③與④的顯微視野中比較明亮的是____________。

（3）若在低倍鏡視野中發現有一異物，當移動裝片時，異物不動，轉換高倍鏡后，異物仍可觀察到，此異物很可能在______________。

A.物鏡上 B.目鏡上 C.裝片上 D.反光鏡上

答案：（1）②③600 （2） ④（3）B

例3下圖為顯微鏡下黑藻細胞的細胞質環流示意圖，視野中的葉綠體位于液泡的右方，細胞質環流的方向為逆時針，則實際上，黑藻細胞中葉綠體的位置和細胞質環流的方向分別為：（ ）

A.葉綠體位于液泡的右方，細胞質環流的方向為順時針。

B.葉綠體位于液泡的右方，細胞質環流的方向為逆時針。

C.葉綠體位于液泡的左方，細胞質環流的方向為逆時針。

D.葉綠體位于液泡的左方，細胞質環流的方向為順時針。

答案：B，解析：顯微鏡成像是倒立的虛像，所以實際上葉綠體位于液泡的左方，細胞質環流的方向為逆時針。

例4、用小麥根尖成熟區表皮細胞觀察細胞質流動時，由于根細胞的細胞質無色透明，難于觀察到細胞質的流動，這時需采取的措施是（ ）

A.縮小光圈，用弱光線 B.開大光圈，用強光線

C.縮小光圈，用強光線 D.開大光圈，用弱光線

答案：A。解析：顯微鏡觀察用的是透射光，如果標本無色透明，往往難辨。如果使視野變暗，效果會好些。為使視野變暗，可采用的措施有平面鏡反射，縮小光圈，使用較弱光線。

例5、顯微鏡的目鏡為10*，物鏡為10*時，在視野直徑范圍內可看到8個細胞，若目鏡不變，物鏡換成40*時，可觀察到多少個細胞？答案：2。解析：根據放大倍數與視野范圍成反比的規律計算。放大倍數變為原來的4倍，范圍變為原來的四分之一，可觀察到2個細胞