抗凝劑對C反應(yīng)蛋白檢測結(jié)果的影響研究

方　偉

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100015)

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抗凝劑對C反應(yīng)蛋白檢測結(jié)果的影響研究

方偉

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100015)

摘要:目的分析抗凝劑種類對C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測結(jié)果的影響。方法隨機(jī)選取門診和住院患者120例，同時采集患者肝素和乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝標(biāo)本，在相同條件下，采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀進(jìn)行兩種全血標(biāo)本CRP濃度檢測，比較檢測結(jié)果間的差異。結(jié)果兩種抗凝標(biāo)本CRP檢測結(jié)果具有相關(guān)性，但肝素抗凝標(biāo)本對CRP低、中、高值標(biāo)本的檢測結(jié)果均低于EDTA-K2抗凝標(biāo)本(P<0.05)。結(jié)論肝素抗凝標(biāo)本不適用于邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀CRP檢測。

關(guān)鍵詞:乙二胺四乙酸鹽；肝素；C反應(yīng)蛋白

C反應(yīng)蛋白(CRP)屬于急性時相反應(yīng)蛋白之一，對微生物具有直接及輔助清除作用，是用于細(xì)菌感染早期診斷和鑒別診斷的主要指標(biāo)[1]。在臨床檢驗(yàn)中抗凝劑的使用非常普遍，且不同檢測系統(tǒng)及項(xiàng)目都有與之相應(yīng)的抗凝劑，而不同抗凝劑對檢測項(xiàng)目的影響不同[2]。CRP檢測標(biāo)本多以肝素作為抗凝劑，血液學(xué)檢測標(biāo)本則多以乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)作為抗凝劑。在日常工作中，經(jīng)常出現(xiàn)1份標(biāo)本加做項(xiàng)目和抗凝劑使用混淆的情況。本研究以肝素和EDTA-K2抗凝標(biāo)本分別進(jìn)行CRP檢測，并對檢測結(jié)果進(jìn)行比較分析，旨在探討兩種抗凝劑抗凝標(biāo)本對CRP檢測結(jié)果的影響，評價不同抗凝標(biāo)本能否通用。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源隨機(jī)選取2015年5～6月門診和住院患者120例，男58例，女62例，均采集晨起空腹靜脈血標(biāo)本，分別采用肝素及EDTA-K2抗凝。

1.2方法標(biāo)本采集后2 h內(nèi)，采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀及配套試劑對采集的肝素及EDTA-K2抗凝全血標(biāo)本進(jìn)行CRP檢測，嚴(yán)格按儀器、試劑盒說明書操作。參照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)EP9-A2文件的要求，在室內(nèi)質(zhì)控在控、儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)和試劑在效期內(nèi)的條件下進(jìn)行檢測[3]。每份標(biāo)本平行檢測3次，計算均值。本研究采用的邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀參加衛(wèi)計委臨床檢驗(yàn)中心CRP檢測室間質(zhì)評，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可以接受。

2結(jié)果

120例標(biāo)本中，檢出CRP異常值標(biāo)本78例，正常值標(biāo)本42例。按CRP濃度分為低、中、高值標(biāo)本。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果顯示，在CRP各濃度范圍內(nèi)，與EDTA-K2抗凝標(biāo)本相比，肝素抗凝標(biāo)本CRP檢測結(jié)果降低，且比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。以肝素抗凝標(biāo)本結(jié)果為Y軸，以EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測結(jié)果為X軸，繪制回歸直線，并計算回歸方程。直線回歸方程及相關(guān)性，見圖1～3。

表1　　不同抗凝標(biāo)本CRP檢測結(jié)果比較

圖1　　　低值標(biāo)本CRP檢測結(jié)果相關(guān)性(Y=0.926 8X-

圖2　　　中值標(biāo)本CRP檢測結(jié)果相關(guān)性(Y=0.999 8X-

圖3　　　高值標(biāo)本CRP檢測結(jié)果相關(guān)性(Y=0.990 5X-

3討論

對于CRP低值標(biāo)本而言，肝素與EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測結(jié)果偏倚較大，隨著CRP濃度增大，偏倚逐漸降低[4-5]。這是因?yàn)榈蜐舛葧r，檢測結(jié)果較小，很小的差異即可導(dǎo)致較大的偏倚，隨著濃度增大，數(shù)值增大，差異所占比例相對降低，偏倚降低。本研究結(jié)果顯示，在其他條件相同的情況下，同一患者肝素抗凝全血標(biāo)本CRP檢測結(jié)果低于EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測結(jié)果，呈負(fù)偏倚傾向，表明采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀進(jìn)行肝素抗凝全血標(biāo)本CRP檢測可能存在系統(tǒng)誤差。臨床通常以CRP<8 mg/L作為正常參考值。在低濃度范圍，肝素抗凝全血標(biāo)本易出現(xiàn)CRP假陰性結(jié)果[6-7]。雖然兩種抗凝標(biāo)本CRP檢測結(jié)果相關(guān)性良好，但為了保證結(jié)果可靠性，筆者不建議在采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀進(jìn)行肝素抗凝全血標(biāo)本CRP檢測。

邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀采用膠乳試劑免疫比濁法的原理檢測CRP，通過紅細(xì)胞壓積、白細(xì)胞壓積和血小板壓積的實(shí)測值校正CRP檢測結(jié)果[計算公式為：CRP=CRP定標(biāo)曲線計算值/(1-BCT%)，BCT為白細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞壓積、血小板壓積之和]，以確保全血與血清標(biāo)本CRP檢測結(jié)果一致，提高了結(jié)果準(zhǔn)確性，優(yōu)于床旁檢驗(yàn)(POCT)分析儀。

進(jìn)行血常規(guī)檢測時，不同抗凝劑對白細(xì)胞計數(shù)結(jié)果幾乎無影響，對紅細(xì)胞壓積檢測結(jié)果也影響較小[8-9]。目前血常規(guī)檢測廣泛使用的抗凝劑是國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)會(ICSH)推薦的EDTA-K2。EDTA-K2可有效結(jié)合血液中的鈣離子，通過膜離子通道進(jìn)入血小板內(nèi)[10-11]。ETDA-K2對鈣離子的螯合作用強(qiáng)于枸櫞酸鈉，能更好地防止血小板受各種因素影響而發(fā)生的凝集，對血小板計數(shù)影響較小，有較好的穩(wěn)定性[12-13]。此外，EDTA-K2血細(xì)胞有很好的保護(hù)作用[14]。因此，采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀檢測EDTA-K2抗凝全血標(biāo)本CRP水平，結(jié)果更加準(zhǔn)確。肝素主要通過抑制凝血活酶與凝血酶的形成[15]，同時激活纖溶酶而發(fā)揮抗凝作用。肝素可引起血小板聚集及腫脹，肝素過量可破壞血小板，對血小板檢測結(jié)果影響較大[16-17]。因此，采用校正公式進(jìn)行計算時，肝素抗凝全血標(biāo)本CRP檢測結(jié)果低于EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測結(jié)果，出現(xiàn)系統(tǒng)誤差和假陰性結(jié)果。

本研究證實(shí)，邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀對不同抗凝劑抗凝標(biāo)本的CRP檢測結(jié)果有所差異。因此，在開展新項(xiàng)目、使用新儀器時，應(yīng)注意抗凝劑的選擇，避免因儀器和方法學(xué)的改變而用錯抗凝劑。護(hù)士在采集外周血標(biāo)本時，應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目使用正確的抗凝管，做好分析前質(zhì)量控制工作。在具體工作中，更應(yīng)嚴(yán)格根據(jù)檢測系統(tǒng)的要求使用相應(yīng)的抗凝標(biāo)本，不能交叉使用或者一管多用，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，EDTA-K2與肝素的抗凝機(jī)制不同，對血細(xì)胞的影響不同，導(dǎo)致邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀對不同抗凝劑抗凝標(biāo)本的CRP檢測結(jié)果存在差異。采用肝素抗凝全血標(biāo)本對邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀CRP檢測結(jié)果影響較大。不同的儀器、方法學(xué)、檢測項(xiàng)目應(yīng)根據(jù)各自的要求使用相應(yīng)的抗凝劑，不能隨意更換抗凝劑種類，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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(收稿日期：2015-12-13)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.052

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1673-4130(2016)06-0829-03