118株肺炎鏈球菌的耐藥性分析

曾金紅，曾小青，李培敏

(東莞市石排醫院檢驗科，廣東東莞 523330)

?

·臨床研究·

118株肺炎鏈球菌的耐藥性分析

曾金紅，曾小青，李培敏

(東莞市石排醫院檢驗科，廣東東莞 523330)

摘要:目的監測該院肺炎鏈球菌的耐藥性，為臨床合理應用抗菌藥物提供依據。方法采集該院2010年1月至2014年12月門診與住院感染患者痰液及咽拭子標本，培養、分離和鑒定肺炎鏈球菌。用法國生物梅里埃公司的ATB細菌鑒定及藥敏儀進行菌種鑒定和藥敏試驗。結果共分離出118株肺炎鏈球菌，來自兒童患者肺炎鏈球菌70株，占59.3%，來自成人患者肺炎鏈球菌48株，占40.7%。分離自兒童的肺炎鏈球菌對青霉素不敏感率80.3%[耐青霉素肺炎鏈球菌(PRSP)占28.6%；低耐青霉素肺炎鏈球菌(PISP)占57.1%]，高于分離自成人的肺炎鏈球菌70.8%的不敏感率(PRSP占41.6%，PISP占29.2%)，青霉素不敏感的菌株與青霉素敏感的菌株相比，容易表現出更多的耐藥性。分離自兒童的肺炎鏈球菌對四環素、紅霉素、克林霉素、復方磺胺甲噁唑的耐藥率分別為 100.0%、100.0%、87.1%、75.7%，而分離自成人的肺炎鏈球菌對以上4種抗菌藥物的耐藥率均達到100.0%。結論該院分離的肺炎鏈球菌對青霉素的耐藥性呈上升趨勢，四環素、紅霉素、克林霉素和復方磺胺甲噁唑已不是治療肺炎鏈球菌的有效藥物。

關鍵詞:肺炎鏈球菌；耐藥性；青霉素不敏感菌

肺炎鏈球菌存在于人的喉部和鼻腔后部，大約40.0%的人攜帶此菌，能引發肺炎、菌血癥和腦膜炎，對人類健康構成了一定威脅。近年來肺炎鏈球菌對抗菌藥物耐藥性呈上升趨勢，并已出現多重耐藥菌株，是臨床感染控制中棘手的難題。為進一步做好本院感染管理及預防工作，了解本院肺炎鏈球菌感染及耐藥狀況，本研究分析了本院2010年1月至2014年12月臨床分離的118株肺炎鏈球菌的耐藥情況，為臨床用藥提供依據，現將結果報道如下。

1材料與方法

1.1菌株來源本院2010年1月至2014年12月分離出的118株肺炎鏈球菌，均來自痰液及咽拭子標本，其中70株來自成人患者，48株來自兒童患者(14歲以下)。

1.2質控菌株采用的質控菌株肺炎鏈球菌ATCC49619由原國家衛生部臨檢中心提供。

1.3儀器與試劑法國梅里埃生物分析儀ATB及配套試劑RapidID32STREP鏈球菌快速鑒定試劑條、ATBSTREP5藥敏板。哥倫比亞血瓊脂由廣州迪景公司提供。

1.4肺炎鏈球菌的鑒定與藥敏試驗將標本種植于哥倫比亞血瓊脂，置于35 ℃5%CO2培養和孵育18～24 h，挑選草綠色溶血、臍窩狀的可疑菌落進行革蘭染色、奧普托欣(Optochin)試驗作初步鑒定，Optoehin試驗陽性者采用鏈球菌快速鑒定試劑條進行鑒定。藥敏試驗按相關操作規程進行[1]，采用瓊脂稀釋，使用鏈球菌藥敏板，按其操作指南進行，分別檢測青霉素、阿莫西林、頭孢噻肟、左氧氟沙星、四環素、紅霉素、氯霉素、萬古霉素等11種藥物最低抑菌濃度(MIC)。肺炎鏈球菌ATCC49619標準菌進行質控。按照2010年美國臨床和實驗室標準協會(CLSI) M100-S20文件進行結果判斷[2]：肺炎鏈球菌非腦膜炎，青霉素(胃腸道外)MIC≥8.00 g/L，為耐藥(R)，稱耐青霉素肺炎鏈球菌(PRSP)；MIC=4.00 mg/L，為中介(I)，稱低耐青霉素肺炎鏈球菌(PISP)；MIC≤2.00 mg/L，為敏感(S)，稱青霉素敏感肺球菌(PSSP)。肺炎鏈球菌性腦膜炎，青霉素(胃腸道外)MIC>2.00 mg/L為R；MIC≤0.06 mg/L為S。PRSP和PISP為青霉素不敏感菌株。

1.5統計學處理采用梅里埃生物ATB NEW1.1軟件進行數據處理及統計分析。

2結果

2.1呼吸道標本中肺炎鏈球菌分離率118株肺炎鏈球菌均分離自4 380份痰液及咽拭子標本，檢出率為2.69%。

表1　　兒童患者肺炎鏈球菌對11種抗菌藥物的

2.2成人與兒童患者肺炎鏈球菌耐藥性差異70株肺炎鏈球菌來自兒童患者，占59.3%，青霉素不敏感菌株檢出率為80.3%(PRSP占28.6%，PISP占57.1%)，兒童患者肺炎鏈球菌對11種抗菌藥物耐藥率見表1。48株肺炎鏈球菌來自成人患者，占40.7%，青霉素不敏感菌株檢出率為70.8%(PRSP占41.6%，PISP占29.2%)，成人患者肺炎鏈球菌對11種抗菌藥物的耐藥率見表2。

表2　　成人患者肺炎鏈球菌對11種抗菌藥物的

3討論

長期以來青霉素都是治療肺炎鏈球菌感染的首選藥物，而近年來，由于抗菌藥物在臨床治療上的大量使用及不當使用，導致肺炎鏈球菌對青霉素的耐藥率不斷增長，給臨床治療帶來了一定的困難。

本研究結果顯示兒童感染肺炎鏈球菌比率(59.3%)高于成人感染肺炎鏈球菌比率(40.7%)。兒童與成人感染肺炎鏈球菌對青霉素耐藥率分別為28.6%、41.6%，對青霉素不敏感率分別為80.3%、70.8%，肺炎鏈球菌對青霉素不敏感率高于肖素坤等[3]和楊啟文等[4]的報道；成人肺炎鏈球菌對青霉素、阿莫西林、頭孢噻肟的耐藥率高于兒童肺炎鏈球菌，與相關文獻報道有差異[5-6]，可能是地區差異所導致。

本研究結果顯示，兒童患者肺炎鏈球菌對萬古霉素、左氧氟沙星、阿莫西林、頭孢噻肟耐藥率分別為100.0%、100.0%、28.6%、7.2%。萬古霉素的不良反應較多，限制了其在臨床上的應用，而左氧氟沙星可對兒童軟骨發育造成損傷，因此，阿莫西林和頭孢噻肟是治療兒童肺炎鏈球菌的首選藥物。分離自成人患者的肺炎鏈球菌對阿莫西林、頭孢噻肟的耐藥率分別為47.9%、31.3%，高于兒童患者肺炎鏈球菌，左氧氟沙星可作為治療成人肺炎鏈球菌的首選藥物[7]。兒童患者肺炎鏈球菌與成人患者肺炎鏈球菌對四環素、紅霉素、克林霉素和復方磺胺甲噁唑的耐藥率都非常高，表明這4種抗菌藥物已不適合用于治療肺炎鏈球菌感染。

肺炎鏈球菌對β-內酰胺類藥物的耐藥性主要由青霉素結合蛋白變異所致，非pbp基因突變也會導致對β-內酰胺類藥物的耐藥。肺炎鏈球菌耐大環內酯類抗菌藥物的主要原因是ermB編碼的23SrRNA甲基化酶致靶位改變。tetM基因編碼蛋白質的核糖體保護作用,是肺炎鏈球菌四環素耐藥的重要機制。DNA促旋酶和拓撲異構酶Ⅳ基因突變引起的靶位改變導致肺炎鏈球菌對氟喹諾酮類藥物耐藥。肺炎鏈球菌也存在氟喹諾酮耐藥性主動外排系統，pmrA基因編碼了外排PmrA。接合性轉座子Tn1545的存在與菌株的紅霉素和四環素耐藥關系密切,可能是肺炎鏈球菌多重耐藥的重要機制之一。

了解肺炎鏈球菌對抗菌藥物的耐藥狀況及耐藥機制，微生物室應當及時準確地對肺炎鏈球菌做出檢測，并報告藥敏結果，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據。

參考文獻

[1]葉應嫵，王毓三，申子瑜．全國臨床檢驗操作規程[M]．3版．南京：東南大學出版社，2006：767-768．

[2]Clinical and Laboratory Standards Institute.M100-S20 Performance standards for antimicrobial susceptibility testing;Twentieth informational[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2010.

[3]肖素坤，趙春江，劉春林，等．我國成人和兒童中分離的肺炎鏈球菌的耐藥性與血清型研究[J]．中華結核和呼吸雜志，2010，33(8)：601-607．

[4]楊啟文，王瑤，陳民均，等．中國14家教學醫院2005～2008年臨床分離肺炎鏈球菌耐藥性分析[J]．中華檢驗醫學雜志，2011，34(6)：511-516．

[5]朱旭慧，孫自鏞，李麗，等．肺炎鏈球菌的分布及耐藥性分析[J]．現代檢驗醫學雜志，2010，25(2)：100-102．

[6]張勇昌，張九進，陳月新，等．成人及兒童社區與醫院獲得肺炎鏈球菌的耐藥性分析[J]．中華醫院感染學雜志，2014，24(15)：3661-3662．

[7]張敏，朱小燕，王四利，等．肺炎鏈球菌感染的分布及耐藥性分析[J]．檢驗醫學，2013，28(12)：1147-1149．

(收稿日期：2015-12-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.049

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)06-0824-03