婦女及兒童尿液分析復(fù)檢規(guī)則的建立與應(yīng)用

梁肖云，黃鎮(zhèn)華，張素娟，曾蘭蘭，趙學(xué)芹

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心檢驗科，廣東廣州 510120)

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·臨床研究·

婦女及兒童尿液分析復(fù)檢規(guī)則的建立與應(yīng)用

梁肖云，黃鎮(zhèn)華，張素娟，曾蘭蘭，趙學(xué)芹

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心檢驗科，廣東廣州 510120)

摘要:目的建立LabUMat全自動尿液分析工作站對婦女、兒童尿液分析鏡檢的復(fù)檢規(guī)則。方法收集2014年8月至9月在婦女兒童醫(yī)療中心門診就診和住院的兒童和婦女的隨機尿液常規(guī)標本共1 036份，用LabUMat全自動尿液分析儀分別進行尿液干化學(xué)和有形成分分析；檢測完畢后采用雙盲法進行顯微鏡檢查，采用人工鏡檢與全自動沉渣分析儀器檢測平行比對的，探討復(fù)檢規(guī)則及復(fù)檢方法，并計算復(fù)檢規(guī)則的真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率(漏診率)、復(fù)檢率。根據(jù)自動化尿液分析工作站的檢測方法，根據(jù)婦女兒童尿液標本的特點，參照在《中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志》發(fā)表的有關(guān)尿液有形成分的復(fù)檢規(guī)則的方案，設(shè)計制訂適合婦女兒童的復(fù)檢規(guī)則。選取2014年10月門診和住院的隨機尿液常規(guī)標本300份進行復(fù)檢規(guī)則的驗證。結(jié)果建立復(fù)檢規(guī)則的1 036份尿液標本中，陽性標本占35%，陰性標本占65%。其中RBC陽性標本占65.30%，WBC陽性標本占53.32%，管型(CAST)陽性標本占3.86%。驗證規(guī)則的符合率為86.5%，漏診率為0.5%，復(fù)檢率為21.7%。300份尿液常規(guī)標本進行復(fù)檢規(guī)則的驗證，驗證結(jié)果符合率為91.67%，漏診率0.67%，復(fù)檢率為19.67%，圖片審核修正后的復(fù)檢率為8.67%。結(jié)論針對朗邁全自動尿液分析工作站，根據(jù)婦女兒童尿液標本的特征，制訂適合本實驗室的復(fù)檢規(guī)則及方法能夠有效地篩選異常標本，結(jié)合圖片人工審核，可顯著減少工作量。

關(guān)鍵詞:全自動尿液分析；尿液；復(fù)檢規(guī)則

目前有關(guān)尿液有形成分鏡檢篩查有不少報道[1-3]，但針對婦女、兒童的報道較少。因為婦女的尿液經(jīng)常受白帶的污染，兒童特別是新生兒由于尿液比較難留取、標本超時等原因，容易出現(xiàn)假陽性，所以制訂適合婦女、兒童的尿液有形成分的鏡檢規(guī)則，規(guī)范尿液常規(guī)的檢測，保證檢驗質(zhì)量，是目前急需解決的問題。文獻報道的有關(guān)尿液復(fù)檢規(guī)則建立，雖然使用同一款儀器，但由于標本人群的來源、復(fù)檢率、漏檢率等結(jié)果存在較大差異。本研究為探討這種差異是否出現(xiàn)在不同人群間，并結(jié)合基于數(shù)字成像原理的朗邁尿液分析工作站儀器特點，制訂了針對該儀器在本院尿液自動化檢測的復(fù)檢規(guī)則。

1資料與方法

1.1標本來源收集2014年8月至9月在婦女兒童醫(yī)療中心門診就診和住院的兒童和婦女的隨機尿液常規(guī)標本共1 036份，用于建立復(fù)檢規(guī)則；所采集標本覆蓋腎病科、新生兒科、內(nèi)分泌科、血液科、婦女免疫腫瘤科、婦產(chǎn)科、產(chǎn)科等臨床科室；其中兒童400例，婦女636例，兒童年齡0～14歲，婦女20～60歲。選取2014年10月門診和住院的隨機尿液常規(guī)標本300份，以驗證復(fù)檢規(guī)則的有效性，其中兒童100份，婦女200份。尿液留取標準依據(jù)《臨床檢驗操作規(guī)程(第3版)》[4]，標本均在2 h內(nèi)完成檢測。

1.2儀器與試劑朗邁尿液分析工作站由匈牙利Elektronika77公司生產(chǎn)制造，配套試紙條和沉渣板由北京倍肯公司提供。顯微鏡采用日本Olympus雙目顯微鏡。

1.3方法

1.3.1自動化尿液分析檢測每日隨機抽取50份尿液標本，在朗邁尿液分析工作站上檢測，尿有形成分分析指標包括紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)、管型(CAST)等，尿干化學(xué)檢測指標包括潛血(BLD)、中性粒細胞酯酶(LEU)、蛋白(PRO)、亞硝酸鹽(NIT)，將原始檢測結(jié)果備份存檔。UriSed尿液分析儀檢測RBC、WBC、CAST及顯微鏡人工鏡檢任何一項參數(shù)超過正常參考范圍均定義為陽性標本。

1.3.2顯微鏡檢查每份標本在尿液分析工作站上檢測完畢后由選定的2名主管檢驗師采用雙盲法做顯微鏡檢查[5]，并計算檢測結(jié)果的均值作為鏡檢結(jié)果。操作方法嚴格按照《臨床檢驗操作規(guī)程》第3版要求檢測，鏡檢內(nèi)容包括：RBC、WBC、CAST的定量計數(shù)，上皮細胞、酵母菌、結(jié)晶、精子、黏液絲、細菌及雜質(zhì)等定性檢測。

1.3.3陽性標本判斷標準對于RBC、WBC、CAST 超出參考范圍上限，或出現(xiàn)非透明管型時即判定為陽性(+)。本研究使用Fast Read-10 尿沉渣計數(shù)板計數(shù)尿沉渣中的有形成分，根據(jù)《臨床檢驗操作規(guī)程》第3版提供的參考范圍[4]，陽性判斷標準如下：(1)RBC，>4 個/μL(男)，>9個/μL(女)；(2)WBC，>5 個/μL(男)，>12個/μL(女)；(3)CAST，≥1個/μL。尿液干化學(xué)分析的參考范圍由廠家提供，以BLD、WBC、NIT 和PRO 達到陽性閾值及以上判斷為陽性。COBISxs 尿液有形成分分析儀的參考范圍為本實驗自建范圍，RBC、WBC 和CAST 超出參考范圍上限判斷為陽性。

1.3.4復(fù)檢規(guī)則制定及復(fù)檢方法見表1。

表1　　復(fù)檢規(guī)則的制訂及采取的復(fù)檢方法

1.3.5復(fù)檢規(guī)則的評估以尿沉渣顯微鏡檢查中RBC、WBC、CAST 的結(jié)果作為參考標準，針對復(fù)檢方案，根據(jù)國內(nèi)外通用的復(fù)檢規(guī)則評估指標，評估復(fù)檢規(guī)則篩選的真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率(即漏診率)和復(fù)檢率。

2結(jié)果

2.1尿沉渣鏡檢結(jié)果將尿沉渣出現(xiàn)RBC、WBC、CAST 數(shù)量異常的標本稱為陽性標本，而鏡檢未見異常者稱為陰性標本。建立復(fù)檢規(guī)則的1 036份尿液標本中，陽性標本占35%(363/1 036)，陰性標本占65%(673/1 036)。其中RBC陽性標本占65.30%(237/363)，WBC陽性標本占53.32%(194/363)，CAST陽性標本占3.86%(14/363)。

2.2復(fù)檢規(guī)則的評估驗證復(fù)檢規(guī)則的真陽性率是37.5%(388/1 036)，假陽性率是13.0%(135/1 036)，真陰性率是29.0%(508/1 036)，假陰性率(漏診率)是0.5%(5/1 036)，復(fù)檢率是21.7%(225/1 036)，符合率為86.5%。

2.3臨床驗證對300份尿液常規(guī)標本進行復(fù)檢規(guī)則的驗證，驗證結(jié)果符合率為91.67%(275/300)，真陽性率、假陽性率、真陰性率、假陰性率(漏診率)分別為35.67%(107/300)、7.67%(23/300)、56.00%(168/300)、0.67%(2/300)，其復(fù)檢率為19.67%(59/300)，圖片審核修正后的復(fù)檢率為8.67%(26/300)。

3討論

由于女性其生理結(jié)構(gòu)特殊性，易患尿路感染；對于妊娠期婦女，由于其激素水平及生理結(jié)構(gòu)改變，如子宮逐漸增大壓迫輸尿管使尿路不暢、腎盂積水、尿糖升高等因素以及妊娠早期抵抗力下降等，更易受到各種病原體侵襲而引發(fā)尿路感染[5]。因此，早期確診和治療尿路感染，對婦女，尤其是妊娠婦女及其胎兒的健康尤其重要[6-7]。兒童方面，由于兒童無癥狀性蛋白尿或血尿，低分子量蛋白尿未在尿中形成管型；尿液標本的復(fù)雜性，多樣性及在體外易發(fā)生改變，兒童的腎病改變情況與成人并不相同，并且相對較輕，尤其是臨床上表現(xiàn)為單純性血尿的患兒，可能與患兒年齡相對較小，疾病尚處于早期有關(guān)；新生兒尿少，留尿困難，導(dǎo)致取樣不合格引起的假陽性較多等原因：所以設(shè)定婦女、兒童尿液分析復(fù)檢規(guī)則，可避免婦女、兒童泌尿系統(tǒng)疾病的漏檢及延誤病情，既保證質(zhì)量，又提高工作效率，滿足臨床需要。

朗邁尿液分析工作站包括干化學(xué)尿液分析儀LabUMat和尿液有形成分分析儀UriSed，是干化學(xué)及尿液有形成分檢查一體機，在聯(lián)機狀態(tài)下可以自動連續(xù)工作檢測。UriSed全自動尿液有形成分分析儀采用自動顯微鏡成像技術(shù)和神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)自適應(yīng)共振理論專家控制技術(shù)，通過訓(xùn)練過的ARTEC神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)識別系統(tǒng)計算可能性的圖譜，根據(jù)有形微粒的圖譜，對結(jié)果進行評定，并進行計算和自動標記。本研究旨在針對朗邁尿液分析工作站建立一套符合婦女、兒童，而且準確性高與可操作性強的指導(dǎo)尿液檢測的復(fù)檢規(guī)則，把規(guī)則導(dǎo)入LIS系統(tǒng)，既能提高檢驗人員的工作效率，又能最大可能地降低假陽性及假陰性率，保證檢驗規(guī)則效率和結(jié)果準確性。

本研究根據(jù)婦女、兒童和該儀器自身特點，利用干化學(xué)檢測指標中的RBC、WBC、PRO、NTT及有形成分分析中的RBC、WBC、CAST等項目，制訂出的復(fù)檢規(guī)則和復(fù)檢要求與文獻[3,8-10]的復(fù)檢規(guī)則有區(qū)別，更加詳細地制訂出復(fù)檢的方法和流程，提高了工作效率。研究中的假陰性病例由黏液絲、細菌、非結(jié)晶鹽類、上皮細胞等背景不清晰因素造成；假陽性病例中RBC易受細菌、黏液絲雜質(zhì)、兒童紙尿片的棉絮、婦女月經(jīng)期等影響，WBC受聚集成團的細菌、黏液絲雜質(zhì)、上皮細胞(主要是非鱗狀上皮細胞)、細胞碎片、非結(jié)晶鹽類及婦女的分泌物等影響。有全景拍攝圖譜真實顯示復(fù)檢標本可以直接在儀器可視操作界面人工審核并修正。用于驗證試驗的300份尿常規(guī)標本，以提高檢出率和降低漏檢率為原則，經(jīng)修正后篩選出最終需要復(fù)檢的標本例數(shù)為26份，復(fù)檢率為8.67%。

由于本院陽性標本占的比率不是特別高，所以根據(jù)本院的特點制訂的復(fù)檢規(guī)則是符合陽性復(fù)檢要求的。標本先在儀器可視操作界面人工審核并修正，可疑的標本才進行人工顯微鏡復(fù)檢，該規(guī)則經(jīng)過驗證漏檢率是0.5%，符合國家標準漏診率低于5%的要求，提高了工作效率。

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(收稿日期：2015-12-16)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.034

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)06-0797-03