卵巢癌組織中ABCF2、ABCG2陽性表達及意義

宋靜，趙云霞，田永杰( 茌平縣人民醫院，山東茌平500； 山東大學附屬省立醫院)

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卵巢癌組織中ABCF2、ABCG2陽性表達及意義

宋靜1，趙云霞1，田永杰2(1 茌平縣人民醫院，山東茌平252100；2 山東大學附屬省立醫院)

摘要：目的探討ABCF2、ABCG2在卵巢癌組織中的陽性表達及其與化療耐藥的關系。方法選擇卵巢癌患者94例，均行腫瘤細胞滅活術配合紫杉醇類與鉑類聯合化療，并對化療耐藥情況進行隨訪。采用免疫組化SP法觀察卵巢癌組織中ABCF2和ABCG2表達，觀察其陽性表達與卵巢癌患者臨床病理特征的關系。采用Logistic回歸分析對化療耐藥的相關因素進行分析。結果卵巢癌組織中ABCF2陽性表達與腫瘤病理類型和腫瘤分級無關(P均>0.05)，與腫瘤分期、化療耐藥情況有關(P均<0.05)。卵巢癌組織中ABCG2陽性表達與腫瘤病理類型、腫瘤分期、腫瘤分級無關(P均>0.05)，與化療耐藥情況有關(P<0.05)。Logistic回歸分析顯示，ABCF2和ABCG2陽性表達是卵巢癌患者發生化療耐藥的獨立危險因素(OR分別為1.067和1.132，P均<0.05)。結論腫瘤組織ABCF2和ABCG2陽性表達可能是卵巢癌患者發生化療耐藥重要原因。

關鍵詞：卵巢癌；三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白；化療耐藥

卵巢癌是女性生殖系統常見的惡性腫瘤，病死率居女性生殖系統惡性腫瘤首位[1]。因早期無明顯臨床癥狀或體征，大多數患者確診時已進展為晚期，出現淋巴結廣泛轉移，手術難以徹底切除，預后較差[2]。目前，臨床上對晚期卵巢癌患者一線治療方案是腫瘤細胞滅活術配合紫杉醇類與鉑類聯合化療，多數患者可緩解，但復發率高，化療耐藥是導致復發的主要原因[3]。三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白(ABC)是一種跨膜蛋白超家族，參與多種分子的跨膜轉運，能夠將細胞內藥物排出[4]。ABCF2是ABC蛋白家族的一員，主要在細胞核內表達，可能是引起腫瘤化療耐藥的重要誘導基因[5]。ABCG2亦是ABC蛋白家族的一員，主要在細胞膜和細胞質內表達，可能與腫瘤轉移、復發及侵襲有關[6]。本研究對卵巢癌組織中ABCF2、ABCG2陽性表達進行檢測，并分析其與化療耐藥的關系。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇2005年1～12月茌平縣人民

醫院收治的卵巢癌患者94例，年齡(54.3±7.2)歲，均經組織病理學檢查明確診斷。病理類型：漿液性腺癌71例、透明細胞癌23例；WHO組織分級：G1級4例、G2級27例、G3級40例，透明細胞癌不進行分級；國際婦產科聯盟(FIGO)腫瘤分期：Ⅰ期25例，Ⅱ期7例，Ⅲ期54例，Ⅳ期8例。

1.2卵巢癌組織ABCF2、ABCG2表達檢測采用免疫組化SP法。取卵巢癌組織，甲醛固定，石蠟包埋，4 μm厚連續切片。切片脫蠟、水化，PBS沖洗；微波(ABCF2)或水浴(ABCG2)修復，PBS沖洗；3%過氧化氫阻斷18 min，PBS沖洗；10%山羊血清封閉10 min，滴加一抗(鼠抗人ABCF2單克隆抗體和兔抗人ABCG2多克隆抗體，稀釋濃度分別為1∶75和1∶250)，陰性對照采用PBS替代一抗，于4 ℃冰箱過夜。次日取出，室溫下放置25 min，PBS沖洗3次，每次3 min；滴加二抗(抗鼠和兔二步法抗體)，孵育18 min，二氨基聯苯顯色，進行封片觀察。評價標準：ABCF2陽性表達定位于細胞核，呈棕褐色團塊狀或顆粒狀物質；ABCG2陽性表達定位于細胞膜或細胞質，呈棕褐色團塊狀或顆粒狀物質。收集圖片，采用LeicaQwin顯微圖像處理系統對圖像數據進行分析，用積分光密度(IOD)值表示ABCF2和ABCG2陽性表達情況。同時，分析不同病理類型、腫瘤分期、組織分級卵巢癌患者ABCF2和ABCG2陽性表達情況。

1.3治療與隨訪所有患者行腫瘤細胞滅活術。首次腫瘤細胞滅活術后采用紫杉醇類聯合鉑類方案化療6～8個療程。具體方案：紫杉醇175 mg/m2+順鉑60 mg/m2或環磷酰胺1 000 mg/m2+順鉑60 mg/m2，3周為一療程，每月化療1次，至少化療6個療程。末次化療后隨訪，隨訪截至2014年5月31日。依據美國綜合癌癥網絡關于卵巢癌臨床指南中相關定義[7]：化療敏感指初次化療完全緩解，停藥6個月未出現復發；化療耐藥指初次化療不能部分緩解，或雖初次化療有效但化療結束6個月內復發。所有患者完成6～8個療程規范化療，化療敏感73例，化療耐藥21例。分析化療敏感、化療耐藥者卵巢癌組織ABCF2和ABCG2陽性表達情況。

1.4統計學方法采用SPSS15.0統計軟件。ABCF2和ABCG2陽性表達采用范圍和中位數表示，比較采用Wilcoxon秩和檢驗。采用Logistic回歸分析分析患者年齡、病理類型、腫瘤分期、組織分級、ABCF2和ABCG2陽性表達與化療耐藥的關系。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1卵巢癌組織ABCF2、ABCG2陽性表達與患者臨床病理特征的關系卵巢癌組織ABCF2陽性表達與病理類型和組織分級無關(P均>0.05)，與腫瘤分期、耐藥情況有關(P均<0.05)；卵巢癌組織ABCG2陽性表達與病理類型、腫瘤分期、組織分級無關(P均>0.05)，與化療耐藥有關(P<0.05)。見表1。

表1　卵巢癌組織ABCF2、ABCG2陽性表達與患者臨床病理特征的關系

2.2化療耐藥相關因素的Logistic回歸分析Logistic回歸分析顯示，卵巢癌患者年齡、病理類型、腫瘤分期和組織分級與化療耐藥的發生無關(P均>0.05)，而ABCF2、ABCG2陽性表達是化療耐藥的獨立影響因素(P均<0.05)。見表2。

表2　卵巢癌患者化療耐藥相關因素的

3討論

卵巢癌早期缺乏典型的臨床癥狀和體征，患者就診時大部分已是中晚期，出現淋巴結或其他臟器轉移，錯過了手術治療的最佳時期，只能通過化療改善預后[8]。臨床研究發現，卵巢癌患者化療耐藥發生率較高，尤其是卵巢透明細胞癌[9]。目前已有研究從改變治療手段或改進化療方法的角度解決卵巢癌患者化療耐藥，并取得了一定效果[10,11]。

ABCF2是ABC家族的重要成員，只含有2個核苷酸結合區，不同于ABC家族的經典結構，缺少穿膜結構，使其不具有跨膜轉運功能，可能參與細胞基因翻譯起始與延長[12]。有研究指出，ABCF2在某些腫瘤組織中高表達，并且與化療耐藥程度密切相關[13]。本研究發現，卵巢癌組織中ABCF2陽性表達與腫瘤病理類型和組織分級無關，而與腫瘤分期、化療耐藥情況有關。說明ABCF2在卵巢漿液性腺癌和透明細胞癌中的表達無差異，亦與腫瘤不同分級無關，與Nishimura等[14]研究結論不同；ABCF2陽性表達只與腫瘤分期和化療耐藥有關，但ABCF2是否會對腫瘤進展產生影響鮮見報道。ABCG2是ABC家族的一個重要成員，能夠通過經典外排途徑將細胞內物質排出。有研究指出，ABCG2與細胞內藥物外排密切相關，是重要的耐藥蛋白[15]；ABCG2與晚期卵巢癌患者鉑類和紫杉類為基礎的化療敏感性密切相關[16]。本研究結果顯示，卵巢癌組織中ABCG2陽性表達與腫瘤病理類型、腫瘤分期和組織分級無關，而與化療耐藥有關，說明ABCG2陽性表達與腫瘤化療耐藥有關，ABCG2可能通過外排作用將結合的化療藥物排出細胞外，繼而產生化療耐藥。本研究結果顯示，ABCF2和ABCG2陽性表達是卵巢癌患者發生化療耐藥的獨立危險因素，進一步說明卵巢癌患者發生化療耐藥與腫瘤病理類型、組織分級等無關，而與ABCF2和ABCG2陽性表達有關。

綜上所述，ABCF2和ABCG2陽性表達可能是卵巢癌患者發生化療耐藥的重要原因，但ABCF2在腫瘤進展中的作用尚需進一步研究。

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(收稿日期：2015-05-07) 2015-10-12)

中圖分類號：R737.31

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)08-0065-03

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2016.08.026

通信作者：田永杰(E-mail： 3219475665@qq.com)