庫克氏菌鑒定方法及臨床感染分析

【摘要】庫克氏菌（Kocuria）是需氧生長的革蘭氏陽性球菌，廣泛分布于自然界的空氣、水、土壤中，是人體的皮膚及呼吸道黏膜表面的正常菌群。通常情況下不致病，當機體免疫力低下時引起各種機會感染，如腦膜炎、心內膜炎、菌血癥、敗血癥、膿腫、關節炎、呼吸道感染等癥。近些年來庫克氏菌引起的感染報道日漸增多，已是人體重要的機會致病菌，應引起臨床和微生物室的重視。

【關鍵詞】庫克氏菌；鑒定；臨床感染

1 庫克氏菌的分類

自然環境和臨床常見的庫克氏菌是玫瑰庫克菌（K.roesus）、變異庫克菌（K.varians）、克氏庫克菌（K.kristinas）。《伯杰系統細菌學手冊>將這3個菌規屬于細菌域，放線菌門，放線菌綱，放線菌亞綱，放線菌目，微球菌亞目，微球菌科（Micrococcaceae），微球菌屬（Micrococcus），也稱玫瑰微球菌、變異微球菌、克氏微球菌。1995年根據16S rRNA序列同源性和化學分析，重新分類將其劃歸庫克菌屬，和微球菌屬同屬微球菌科。

2 庫克氏菌的生物學特性

2.1 培養特性

庫克氏菌專性需氧，營養要求不高，生長速度慢于葡萄球菌，在血瓊脂平板或營養瓊脂平板35℃孵育24h，形成略小于葡萄球菌的圓形、突起、表面光滑、邊緣整齊、不透明、白色、黃色、橙色或桔紅色菌落，可出現α溶血，延長孵育時間菌落色素加深，在液體培養基呈渾濁生長。菌落有粘性，不易混懸于鹽水中。

2.1 形態染色

庫克氏菌直徑為1-1.8μm，略大于葡萄球菌，多成對、四聯、成簇排列，因生長繁殖時呈兩個垂直平面分裂，故成四個聯在一起呈方塊狀，立體感強；無鞭毛、無芽胞，在膿液及體液等原始標本中可形成莢膜，體外培養即消失。

2.3 生化特性

庫克氏菌觸酶陽性，以氧化形式利用葡萄糖，氧化酶（改良法）多陽性，但變異庫克菌、氧化酶陰性。庫克氏菌大多耐鹽，可在6.5%的NaCI平板生長良好，不被溶葡萄球菌素溶解，不水解精氨酸。

2.4 鑒定與鑒別

庫克氏菌的鑒別應先從菌落形態、性狀、色素、生長速度等做初步判定，再依據鏡下形態、排列方式、有無鞭毛、有無莢膜等特性結合主要生化反應做出鑒定。有些庫克氏菌菌落特征和鏡下形態有時和葡萄球菌很形似，通過氧化發酵試驗和氧化酶試驗（改良法），以及桿菌肽、紅霉素和呋喃唑酮敏感性試驗相鑒別；玫瑰庫克菌產生粉紅色或橙色色素、還原硝酸鹽、不液化明膠可區別于其他菌種；變異庫克菌產生黃色素，可利用葡萄糖產酸、硝酸鹽還原試驗陽性、枸櫞酸鹽和尿素試驗均陽性，液化明膠；克氏庫克菌在有氧環境下分解甘油產酸、發酵葡萄糖和甘露糖、V-P試驗陽性、水解七葉苷，是唯一在1%麥芽糖甲紫瓊脂平板上形成皺紋狀菌落的菌種。庫克氏菌相關革蘭氏陽性球菌屬間及屬內鑒定劉錫光等和陳東科等應用。

3 臨床感染分析

庫克氏菌一般被認為是無害的腐生菌，寄生或污染人體皮膚、黏膜，也可累積口咽部，常從暴露的臉，手臂、腿部檢出。一般情況下，寄生人體的正常菌群與人體保持平衡狀態，各菌群之間相互依賴、相互制約，保持一定的微生態平衡。當宿主機體防御機能減退，外環境發生變化，以及抗生素、激素等藥物廣泛、大量使用，導致這種平衡被打破或失調，寄生菌趁機侵入造成感染。人體黏膜屏障損害可能是侵人途徑之一，侵入的病原菌數量和質量（毒力）也是主要因素。2009年我們從一位手拇指及魚際間隙感染的患者膿腔中檢出一株玫瑰色庫克菌，該菌有溶血毒素，初代培養菌落周圍出現透明溶血環。庫克氏菌除對呋喃唑酮，諾佛沙星耐藥外，對青霉素等多數抗生素敏感。我們檢索了中國知網，萬方數據庫發現，近年來庫克氏菌除臨床感染數量和類型不斷增加外，對常用抗生素均有耐藥，更有多重耐藥現象，提示臨床應合理使用抗生素，以減少耐藥菌株的產生。幼兒感染較多，提示幼兒，特別是新生兒由于各系統、器官發育尚未成熟，皮膚屏障功能差，對環境適應能力差，對疾病的抵抗力弱，是庫克氏菌感染的易感人群。