綠茶提取物對化學性肝損傷保護作用的研究及應用進展

王玲，吳軍林，，*，吳清平，袁林，張文（.廣東環凱微生物科技有限公司，廣東廣州50663；.廣東省微生物研究所，廣東廣州50070）

?

綠茶提取物對化學性肝損傷保護作用的研究及應用進展

王玲1，吳軍林1，2，*，吳清平2，袁林1，張文1
（1.廣東環凱微生物科技有限公司，廣東廣州510663；2.廣東省微生物研究所，廣東廣州510070）

摘要：綠茶提取物含有茶多酚、茶氨酸、生物堿等活性物質，具有很強的抗氧化能力，對化學性肝損傷具有顯著的保護作用，本文就國內外綠茶提取物對化學性肝損傷保護作用及提高其生物利用率的研究進行了闡述，并分析了綠茶提取物的安全性，對其在功能食品上的應用進行了綜述，最后對綠茶提取物的應用及前景進行了展望。

關鍵詞：綠茶提取物；化學性肝損傷；安全性；應用

綠茶又稱不發酵茶，是不經發酵，直接經殺青、揉捻、干燥等工藝制成的一種茶，含有豐富的藥理活性成分。研究者對綠茶提取物的藥理活性及活性成分進行了全面的研究，發現綠茶提取物具有抗氧化、抗菌、抗癌、抗血管生成、抗誘變、抗病毒、抗衰老、保護中樞神經、保護心臟、抗炎、降血糖、降血壓、護肝等藥理作用［1-6］。

近年來，由于長期大量飲酒引起的酒精性肝病變、服用藥物引起藥物性肝損害及環境毒物或其他物質引起的肝損傷等一系列化學性肝損傷己越來越成為當今威脅人類健康的疾病。有關綠茶提取物對化學性肝損傷的保護作用及提高綠茶生物利用率的研究和安全性問題引起了眾多學者的關注。

1　國內外對綠茶提取物的化學性肝損傷保護作用的研究

綠茶提取物具有強抗氧化能力，能夠調節體內氧自由基與自由基清除劑的平衡，綠茶提取物的對化學性肝損傷的保護作用與其具有的強抗氧化能力有密切關系［7-8］。目前關于綠茶提取物的化學性肝損傷保護作用的研究進展主要集中在三方面。

1.1綠茶提取物活性成分對化學性肝損傷的保護作用研究

學者目前研究的綠茶提取物護肝成分主要有茶多酚，咖啡堿、茶氨酸等，其中茶多酚主要含有4種單體：表沒食子酸酯（Epigallocatechi-3-gallate，EGCG）、表沒食子兒茶素（Epigallocatechin，EGC）、表兒茶素沒食子酸酯（Epicatechi gallate，ECG）和表兒茶素（Epi－catechi，EC）。吳偉青等［9］研究發現綠茶多酚對小鼠酒精性肝損傷具有明顯保護作用，機理與其抗氧化活性有關。Tipoe G.L.等［10］研究發現同時給予小鼠四氯化碳（CCl4）和EGCG，可以減輕小鼠肝臟炎癥，氧化應激和肝纖維化?？Х葔A通過減輕炎癥反應和氧化應激抑制酒精性肝損傷［11］。茶氨酸能通過抑制CCl4代謝激活與增強小鼠肝臟抗氧化能力來減弱炎癥反應和肝細胞凋亡，從而抑制CCl4誘導的小鼠急性肝損傷［12］。

1.2綠茶提取物對不同模型化學性肝損傷的保護研究

學者對CCl4肝損傷模型、酒精性肝損傷模型、藥物肝損傷模型、環境中有毒物質如重金屬、煙毒等肝損傷等模型進行了研究。Shahid S.M.等［13］讓大鼠自由飲用5%的綠茶8周，研究發現綠茶能顯著降低CCl4升高的谷丙轉氨酶（ALT）、結合膽紅素、堿性磷酸酶（ALP）、丙二醛（MDA）水平，超氧化物歧化酶（SOD）水平，對肝損傷具有明顯的保護作用，機理可能與綠茶具有抗氧化性質和減少氧化應激有關。綠茶提取物能抑制酒精導致的肝臟、膽管和血漿中ROS的減少，肝臟中4-羥基壬烯醛-蛋白加合物的增加，Kupffer細胞浸潤，脂質集聚以及ALT水平的升高［14］。學者研究發現綠茶提取物對咪唑硫嘌呤、甲氨蝶呤，它莫昔芬引起的藥物性肝損傷具有保護作用［15-17］。另外有學者研究發現綠茶提取物對鉛、鎘等、焦油、尼古丁、硫代乙酰胺、二甲基亞硝銨等引起的肝損傷具有顯著保護作用［18-23］。

1.3綠茶提取物與護肝保肝藥或其他物質對化學性肝損傷的保護作用的比較

目前已有的護肝保肝藥有聯苯雙酯、水飛薊素、干擾素-α等。Cui Y.M.等［24］研究黃山毛峰綠茶抑制CCl4肝損傷作用，并用抗肝炎藥聯苯雙酯片做比較，結果發現高劑量黃山毛峰綠茶具有理想的肝保護作用。Mahmoud M.F.等［25］比較了綠茶、硒、水飛薊素三者對CCl4的引起的肝纖維化的保護作用，研究發現綠茶和硒與水飛薊比較，具有同等的保護作用的，但在降低膠原纖維化程作用方面比水飛薊更強。Nosseir D.A.等［26］比較了綠茶和干擾素-α對CCl4肝損傷的保護作用，研究發現與干擾素-α比較，綠茶提取物抑制CCl4導致肝纖維化的作用更強，可作為肝纖維化患者的輔助治療物。

2　國內外提高綠茶提取物生物利用率的研究

綠茶提取物茶多酚具有穩定性差，易被氧化的特點，李地才等［27］利用卵磷脂、膽固醇將其制備成脂質體制劑，可以提高其穩定性和在體內的生物利用度及其靶向作用。馬寧等［28］研究了茶多酚脂質體最佳制備工藝參數為茶多酚∶磷脂（質量比）=81∶300，膽固醇∶磷脂（質量比）=58∶300，VE∶磷脂（質量比）=16.7∶300和乙醇4.5 mL。在最優條件下茶多酚脂質體包封率達7 8.10%，電鏡觀察表明茶多酚脂質體形態均勻，呈現不規則的橢圓形，粒徑分布于400 nm～1000 nm范圍內。

齊連祥［29］利用微膠囊技術，乙基纖維素（EC）和硬脂酸作壁材，在溫度為120℃、壓力0.2 MPa的條件下，芯材與壁材比例為1∶10，EC與硬脂酸的比例為1∶4，固形物含量為20%，最終產品的包埋率為93%。熊和建等［30］研究了茶多酚微囊化包埋最佳條件為：采用3%的海藻酸鈉（海藻酸鈉∶茶多酚=3∶1）、1%殼聚糖和3%的氯化鈣體系用一步法制備茶多酚微膠囊，該微膠囊在體外模擬胃、腸液中約2 h中達到茶多酚釋放峰值，表現出較好的緩釋效果。

Raederstor等［31］研究發現綠茶提取物主要成分兒茶素與高分子聚合物聚乙二醇（PEG）、聚乙醇酸（PGA）通過偶極-偶極相互作用后，能延長綠茶提取物作用時間，降低血液乙醇和乙醛濃度，對肝臟起到保護作用。

3　綠茶提取物安全性研究

一般認為綠茶提取物是無毒的。鄭子新等［32］采用經口毒性試驗、蓄積毒性試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗，V79細胞基因突變試驗對綠茶提取物的急性毒性、蓄積毒性、遺傳毒性進行了觀察，結果表明綠茶提取物不具有任何毒性。陸益等［33］對茶多酚進行了毒理研究，結果各項指標都未見異常，大白鼠長期灌服茶多酚 ［833 mg/（kg·d）］相當于人擬用日用量的100倍也是安全的。

但是早年就不斷有病例案例報道服用綠茶提取物，患者服用一種綠茶減肥用補充劑，導致急性肝損傷，嚴重情況甚至導致肝移植［34］。有學者研究可能與茶多酚的主要成分EGCG有關，EGCG損傷線粒體膜，引起氧化過激［35］。目前又有學者對IGS大鼠腹膜內注射綠茶提取物200 mg/d，發現綠茶提取物能引起急性嚴重的肝中毒，可能與肝細胞脂質過氧化和DNA氧化應激有關［36］。

4　綠茶提取物護肝功能食品研究及應用

綠茶提取物護肝功能食品的研究主要有三方面，一是對產品的工藝的研究，Wu C.B.等［37］以新鮮藜蒿、綠茶為主要原料，加以白砂糖、檸檬酸為輔料，經科學加工制成有保健功能的復合型飲料。試驗結果表明：該飲品的最佳工藝為藜蒿汁10 mL，綠茶茶汁200 mL，白砂糖6 g，檸檬酸0.06 g。最佳穩定劑CMC-Na添加量為0.03%，在該工藝條件下的產品呈淺黃綠色，具有藜蒿特有的香氣，酸甜可口，呈均勻液體狀。二是產品配方功效的研究，唐嬌玉［38］采用茶多酚、茶氨酸、牛至油、魚腥草4種中草藥提取物組合而成得茶多酚復方制劑。研究發現茶多酚復方制劑灌胃可顯著降低大鼠血液谷草轉氨酶（AST）、ALT、ALP活性，可顯著降低肝臟總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、游離脂肪酸（FFA）、MDA含量，可顯著提高肝臟SOD活性。茶多酚復方制劑對脂肪肝大鼠肝臟具有顯著的保護作用。三是產品安全性的研究。宿迷菊等［39］通過急性毒性試驗、遺傳毒性試驗（Ames試驗、小鼠骨髓微核試驗、小鼠精子畸形試驗）、30 d喂養試驗對一款綠茶口含片進行了毒理學研究，結果為綠茶口含片屬于無毒級別、無遺傳毒性，確定了試驗中最大無損害作用劑量。

綠茶提取物制成的保健食品在國家食品藥品監督管理局注冊的已有不少，綠茶提取物很少單獨用于保健食品，主要是和其他植物提取物、維生素、營養強化劑復配制成具有對化學性肝損傷保護作用的保健食品，如葆苾牌茶薊椰橄片是由綠茶提取物與朝鮮薊提取物、五味子提取物等復配制成的?？地愄嘏泼袅︼嬃鲜怯删G茶提取物與其他植物提取物、維生素、營養強化劑共同組成的配方。

5　結論及展望

綠茶提取物對化學性肝損傷具有顯著的保護作用，但是其引起肝損傷的病例也不斷報道，近年來對綠茶提取物的肝毒性也有研究，綠茶提取物確實產生肝毒性。因此急需對綠茶提取物的安全性進一步研究，明確綠茶提取物中具有肝毒性的化學成分，以及產生毒性的劑量。有利于綠茶提取物在臨床、功能性食品方面的應用。

綠茶提取物中含有豐富的生物活性成分，對于各種肝損傷均有顯著的保護能力。各成分間存在協同作用，有研究發現，EGCG和茶氨酸對細胞氧化損傷具有協同保護和修復作用［40］。為了充分發揮綠茶提取物的作用，其成分間的協同作用值得進一步研究。

參考文獻：

［1］Senanayake S P J N.Green tea extract：chemistry，antioxidant properties and food application［J］.Journal of functional foods，2013，5（4）：1529-1541

［2］ Leggio L，Addolorato G.“Do you want a vodka？NO，a green tea please！”Epigallocatechi gallaet and its possible role in oxidative stress and liver damage［J］.Nutrition，2009，25（1）：1-2

［3］張煥金，蔡林兒.綠茶提取物茶多酚抗癌作用的研究進展［J］.華南國防醫學雜志，2012，26（5）：522-523

［4］劉婧，陳登榜.茶多酚治療心血管疾病的臨床應用研究進展［J］.中華臨床醫師雜志，2010，4（6）：794-796

［5］Assuncao M，Santos M J，Carvalho F，et al.Green tea averts age-dependent decline of hippocampal signaling systems related to antioxidant defenses and survival［J］.Free Radic Biol Med，2010，48（6）：831-838

［6］李軍，辛勤，楊雁.綠茶多酚藥理作用的研究進展［J］.中國熱帶醫學，2014，14（1）：28-30

［7］趙雪珂，穆茂，程明亮.酒精性肝病與氧化應激［J］.臨床肝膽病雜志，2014，30（2）：118-120

［8］Aram G，Potter J J，Liu X P，et al.Deficiency of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，reduced form oxidase enhances hepatocellular injury but attenuates fibrosis after chronic carbon tetrachloride administration［J］.Hepatology，2009，49（3）：911-919

［9］吳偉青，陳靜，劉超群，等.綠茶多酚對小鼠酒精性肝損傷的保護作用［J］.食品科學，2011，32（13）：310-313

［10］Tipoe G L，Leung T，Ming E C，et al.Epigallocatechin-3-gallate （EGCG）reduces liver inflammation，oxidative stress and fibrosis in carbon tetrachloride（CCl4）-induced liver injury in mice［J］.toxicology，2010，273（1/3）：45-52

［11］Lv X W，Che Z，Li J，et al.Caffeine protects against alcoholic liver injury by attenuating inflammatory response and oxidative stress［J］. Inflammation Research，2010，59（8）：635-645

［12］姜薇.L-茶氨酸抑制四氯化碳誘導的小鼠急性肝損傷的研究［D］.南京：南京大學，2012：1-64

［13］Shahid S M，Shamim S，Mahboob T，et al.Protective effect of green tea on CCl4induced hepatoxicity in experimental rats［J］.Africa Journal of pharmacy and pharmacology，2012，6（26）：1958-1963

［14］Chen K H，Li P C，Lin W H，et al.Depression by a green tea extract of alcohol-induced oxidative stress and lipogenesis in rat liver［J］. biosci biotechnol biochem，2011，75（9）：1668-1676

［15］El-Beshibsh H A，Tork O M，El-Bab M F，et al.Antioxidant and antiapoptotic effects of green tea poluphenols against azathioprine-induced liver injury in rats［J］.Pathophysiology，2011，18（2）：125-135

［16］Muhsin D A，Latif A R.The possible protective effect of green tea extract against Methotrexate-induced liver injury in male rats［J］.medical journal of Babylon，2012，9（3）：650-655

［17］Hussein H H，Mahmoud O M.Protective role of green tea extract against tamoxifen-induced liver injury in albino rats［J］.Egyptia Journal of Histology，2014，37（2）：386-392

［18］Kumar P，Bricey A，Selvi V，et al.antioxidant effect of green tea extract in cadmium chlorie intoxicated rats［J］.adv appl sci res，2010，1 （2）：9-13

［19］Mehana E E，Meki A R，Fazili K M，et al.Ameliorated effects of green tea extract on lead induced liver toxicity in rats［J］.Experimental and toxicologic pathology，2012，64：291-295

［20］常福厚，扈延茂.三種中藥及綠茶對煙焦油引起的小鼠肝ANDM 和GST活性變化的影響［J］.動物醫學進展，2006，27（2）：79-83

［21］Gawish A M，Issa A M，Bassily N S，et al.Role of green tea on nicotine toxicity on liver and lung of mice：histological and morphometrical studies［J］.African journal of biotechnology，2012，11（8）：2013-2025

［22］Dashti A A，Saleh F H，Jadaon M M，et al.The effect of green tea in normalization of liver function test in experimental liver injury［J］. trace ements and electrolytes，2006，23（2）：113-118

［23］Kim H K，Yang T H，Cho H Y，et al.Antifibrotic effects of green tea on in vitro and in vivo models of liver fibrosis［J］.word journal of gastroenterology，2009，15（41）：5200-5205

［24］Cui M，Yang X B，Lu X S，et al.Protective effects of polyphenols-enriched extract from Huangshan Maofeng green tea against CCl4-induced liver injury in mice［J］.chemico-biological interactions，2014，220：75-83

［25］Mahmoud M F，Fahmy A，Auf M A，et al.Evaluation of the hepatoprotective effect ofgreen tea extract and selenium on CCl4-induced fibrosis［J］.e-SPEN Journal，2012，7（1）：e23-e29

［26］Nosseir D A，Gawish S A，Moustafa A M，et al.The possible protective effect of green tea versus interferon-α on carbon tetrachloride-induced hepatic fibrosis in albino rat：light and electron microscopic study［J］.The Egyptian Journal of Histology，2012，35（3）：398-411

［27］李地才.綠茶中茶多酚的提取和脂質體制備［D］.廣州：華南理工大學，2011

［28］馬寧，濮少杰，李鋒，等.茶多酚脂質體的制備［J］.食品科學，2012，33 （20）：16-20

［29］齊連祥.高酯型兒茶素微膠囊制備研究［D］.大連：大連理工大學，2006

［30］熊何健，馬玉嬋，吳國宏.茶多酚的提取及微膠囊化工藝研究［J］.食品科學，2005，26（10）：137-140

［31］Raederstorff D G，Schlachter M F，Elste V，et al.Effect of EGCG on lipid absorption and plasma lipid levels in rats［J］.J nutr biochem，2003，14（6）：326-332

［32］鄭子新，宋瑞霞，邱繼紅，等.綠茶提取物的安全性分析［J］.中國公共衛生，2005，21（5）：583-584

［33］陸益，楊帆，梁寧生，等.茶多酚毒理學實驗研究［J］.廣西醫科大學學報，2005，22（6）：831-834

［34］Patel S S，Beer S，Kearney D L，et al.Green tea extract：A potential cause of acute liver failure［J］.World J Gastroenterol，2013，19（31）：5174-5177

［35］Schmidt M S，Schmitz H J，Baumgart A，et al.Toxicity of green tea extracts and their constituents in rat hepatocytes in primary culture ［J］.Food and chemical toxicology，2005，43（2）：307-314

［36］Emoto Y，Yoshizawa K，Kinoshita Y，et al.Green Tea Extract-induced Acute Hepatotoxicity in Rats［J］.J Toxicol Pathol，2014，27（3/ 4）：163-174

［37］Wu C B，Wu J Y，Tian L S，et al.Study on processing technology of health beverage Made from Artemisia selengensis turoz and Green Tea［J］.Agricultu ral Science＆Technology，2014，15（6）：990-993

［38］唐姣玉.茶多酚復方制劑保肝實驗研究［J］.科技信息，2009（17）：5

［39］宿迷菊，王岳飛，駱耀平，等.綠茶口含片安全性毒理學研究［J］.茶業科學，2006，26（2）：122-127

［40］劉曉慧，揭國良，林康，等.egcg和茶氨酸對細胞氧化損傷的協同保護和修復作用研究［J］.茶葉科學，2014，34（3）：239-247

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.11.044

基金項目：國家自然科學基金（51271940）；廣東省省級科技計劃項目（2013B091500024，2013B0102019）；廣州市科技計劃項目（2013J2200079）

作者簡介：王玲（1984—），女（漢），工程師，碩士，主要研究方向：功能性食品。

*通信作者：吳軍林（1978—），男，研究員，博士。

收稿日期：2015-05-08

Research and Application Progress of Green Tea Extracts for Hepataprotective

WANG Ling1，WU Jun-lin1，2，*，WU Qing-ping2，YUAN Lin1，ZHANG Wen1

（1.Guangdong Huankai Microbial Sci＆Tech Co.Ltd.，Guangzhou 510663，Guangdong，China；2.Guangdong Institute of Microbiology，Guangzhou 510070，Guangdong，China）

Abstract：Current studies had revealed that green tea extracts had significantly hepataprotective effect.The scientists have paid extensive attention to the research in this field.The effects and mechanisms of green tea and bioactive component against liver injury and the research of improving the biological availability were introduced.The safety of the green tea extracts was analyzed.In addition，the future development trend had also been discussed.

Key words：green tea extracts；hepataprotective；safety；mechanism